深圳地区血红蛋白G的分子特征与血液学表型

目的分析深圳地区异常血红蛋白G(HbG)病的分子特征和血液学表型,进一步认识异常血红蛋白病的类型,为地中海贫血筛查提供参考数据。方法收集我院进行毛细管电泳法检测的72397例样本,对检出异常血红蛋白者采用Sanger测序法进行DNA测序鉴定,并分析其红细胞参数,采用跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)法和PCR结合反向点杂交(PCR-RDB)法检测并进行地贫基因分型。结果共检出6种HbG,均为杂合子,发生率为0.047%,位于α链异常的为Hb G-Honolulu和Hb G-Waimanalo;位于β链异常的为Hb G-Taipei、Hb G-Coushatta、Hb G-San José和Hb G-Siriraj。除1例Hb G-Honolulu合并β地贫(IVS-Ⅱ-654杂合突变)表现为轻型地贫特征,其余各类型HbG单纯杂合子的血液学表型均正常。新生儿Hb G-Taipei的毛细管电泳结果为HbA(8.6±2.4)%、HbF(89.1±3.1)%和Hb G-Taipei(2.3±0.6)%;Hb G-Coushatta结果为HbA 12.0%、HbF 83.7%和Hb G-Coushatta 4.1%。结论深圳地区HbG以杂合子多见,单纯HbG杂合子可表现为血常规正常,用毛细管电泳分析可发现携带者;合并地贫时可表现为地贫表型,临床应注意鉴别成人和新生儿HbG的毛细管电泳特征。     

罗氏Cobas c702全自动生化分析仪检测项目性能验证

目的从精密度、分析测量范围(AMR)、临床可报告范围(CRR)、参考区间验证及比对试验对罗氏Cobas c702全自动生化分析仪检测的41个项目进行性能验证。方法本文以临床较常见检测指标:天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、尿素(Urea)、肌酐(CREA)、尿酸(UA)、胱抑素C(CysC)为例进行考察。参考美国临床和实验室标准协会(CLSI)EP15-A3、CLSI EP6、美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)C28-A2和NCCLS EP15-A2文件,使用Cobas c702的原装配套试剂及校准品,从精密度、AMR、CCR、参考区间验证及比对试验等角度对9个项目进行性能验证。结果罗氏Cobas c702全自动生化分析仪检测AST、LDH、CK、CKMB、α-HBDH、Urea、CREA、UA和CysC 9个项目的精密度验证均合格;各项目在AMR内均表现出良好的线性关系(R20.95,b在0.93～1.03范围内);最大稀释倍数验证时回收率在可接受范围内,CCR为AMR的上限乘以最大的可稀释倍数;选择20份体检合格的健康人标本,在检测系统上进行测定,对结果进行统计并对仪器说明书提供的参考区间进行验证,结果显示参考区间验证通过率均≥90%,验证通过;比对试验中各项目相对偏倚小于实验室允许的偏倚或相对偏倚验证值,比对试验通过。结论罗氏Cobas c702全自动生化分析仪检测项目的精密度、AMR、CCR、参考区间验证及比对试验均验证通过。     

不同离心条件对血清指数和生化免疫检测TAT的影响

目的探讨不同离心条件组合对血清指数的影响,以及不同离心时间对生化免疫检测标本流转时间(TAT)的影响。方法在50 d内,分别将离心条件设置为5种不同的组合:2000×g,10 min,15℃;2000×g,10 min,25℃;3000×g,10 min,15℃;3000×g,5 min,15℃;3000×g,7 min,25℃。每组离心条件运行10 d,统计分析离心力、离心时间、离心温度对血清指数的影响;统计不同离心时间对生化免疫检测TAT的影响。结果TAT只受离心时间影响,14:00-16:00时间段离心时间设置为5 min时实验室内TAT最短,12:00-14:00时间段离心时间设置为7 min时实验室内TAT最短。溶血指数与离心时间、离心力、离心温度有关。当离心力为3000×g时溶血指数中位数是5 mg/dL,离心力为2000×g时溶血指数中位数是4 mg/dL;离心时间为10 min时溶血指数中位数是5 mg/dL;离心时间为5 min时溶血指数中位数是4 mg/dL;离心温度为25℃时溶血指数中位数是3 mg/dL,离心温度为15℃时溶血指数中位数是4 mg/dL。结论增大离心力、延长离心时间、降低离心温度,溶血程度会升高,但仍在临床可接受范围内。综合以上因素,5种组合中3000×g、7 min、25℃为本实验室的最佳离心条件。     

深圳市罗湖区育龄男女优生十项(TORCH)筛查结果分析

目的分析本地区育龄男女优生十项(TORCH)的筛查结果,了解TORCH感染现状,为提高生育质量提供参考。方法以2015年5月至2018年7月在深圳市罗湖区人民医院进行TORCH筛查的19 973例育龄男女为研究对象,采用化学发光免疫法(CLIA)检测血清TORCH特异性抗体IgG及IgM并统计分析。结果所调查育龄人群的弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、单纯疱疹病毒Ⅰ/Ⅱ(HSVⅠ/Ⅱ)、巨细胞病毒(CMV),细小病毒B19(PV B19)IgG抗体阳性率分别为1.58%、75.66%、98.10%、91.03%和18.17%;TOX、RV、CMV、HSVⅠ/Ⅱ、PV B19IgM抗体阳性率分别为0.41%、1.24%、0.31%、8.26%和0.54%;育龄女性CMV-IgG、HSVⅠ/Ⅱ-IgG和HSVⅠ/Ⅱ-IgM的阳性率均高于育龄男性,差异具有统计学意义(P0.05);将调查人群分为低龄组(18～30岁)和高龄组(31～45岁),CMV-IgG、HSVⅠ/Ⅱ-IgG、PV B19-IgG和PV B19-IgM在高龄组阳性检出率均高于低龄组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论本地区有一定比例的育龄男女感染TORCH,而CMV-IgG和HSVⅠ/Ⅱ-IgG阳性率最高,应加强育龄期男女产前筛查TORCH力度,降低先天性TORCH感染风险,提高人口素质。     

血红蛋白J-Bangkok及其合并地中海贫血的表型分析

目的分析异常血红蛋白J-Bangkok(Hb J-Bangkok)及其合并不同类型地中海贫血(简称地贫)的血液学表型特征。方法收集本院进行毛细管电泳法检测的72397例样本,对筛查出Hb J-Bangkok者采用Sanger测序法进行DNA测序鉴定和红细胞参数分析,以及跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)法和PCR结合反向点杂交法进行地贫基因分型检测。结果共检出31例Hb J-Bangkok,均为杂合子。男性单纯Hb J-Bangkok杂合子的血红蛋白含量(Hb)、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量、Hb J-Bangkok和Hb A2分别为(158±13.0)g/L、(90.1±2.3)fL、(31.1±2.5)pg、(51.3±0.7)%和(2.5±0.1)%;女性分别为(124±9.3)g/L、(93.3±4.9)fL、(31.1±1.6)pg、(50.9±1.1)%和(2.6±0.2)%;Hb J-Bangkok合并-α3.7杂合缺失分别为124 g/L、82.1 fL、26.1 pg、49.4%和2.4%;合并--SEA杂合缺失分别为(120±14.1)g/L、(67.7±5.7)fL、(20.5±2.6)pg、(50.1±1.9)%和(2.1±0.4)%;合并β地贫分别为(134±11.3)g/L、(71.6±0.9)fL、(21.7±1.0)pg、(92.7±0.6)%和(5.5±0.8)%,无Hb A。结论单纯Hb J-Bangkok杂合子血液学表型正常,合并不同类型地贫时表型存在差异,临床应结合表型来开展遗传咨询工作。     

临床实验室信息化管理平台的设计与应用

摘要:目的依据 ISO 15189质量管理体系,结合计算机技术建立临床实验室信息化管理平台。方法系统采用 B/S架构,基于JAVA+R语言开发,采用Spring+ Shiro+ Snakerflow技术框架,以Redis为缓存数据库,MySQL5.7为业务数据库,建立临床实验室信息化管理平台。结果临床实验室信息化管理平台包括 10个功能模块:文档管理、电子记录、人事管理、ISO 15189认可迎检、内审核查、试剂管理、设备管理、业务管理、质量指标和性能评价，各模块之间既可互联互通,也可单独安装使用,且全面满足ISO 15189 医学实验室认可要求。结论该平台 与实验室管理工作高度契合,以业务智慧化、记录电子化、系统标准化和审核便捷化为主线,显著提高了实验室管理能力。     

雅培i2000SR全自动化学发光分析仪检测甲状腺功能五项的性能验证

目的评价和验证雅培i2000SR全自动化学发光分析仪检测甲状腺功能五项[促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)]的方法学性能,并探讨甲状腺功能五项检测对甲状腺疾病的临床应用价值。方法选取该院2018年接受治疗的180例甲状腺功能异常患者,包括90例甲状腺功能亢进患者(甲亢组)和90例甲状腺功能减退患者(甲减组),同时选取健康体检者90例(健康对照组),比较不同组之间各指标检测结果的差异。根据ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则》的要求,参照美国临床实验室标准协会(CLSI)EP系列文件和相关标准对甲状腺功能五项的精密度、正确度、分析测量范围、参考区间、不确定度进行评价分析,将结果与公认的质量目标或厂家声明的性能指标进行比较。结果甲状腺功能五项的批内精密度和批间精密度分别为1.08%～4.55%和1.08%～5.11%;正确度符合实验室要求;TSH、FT3、FT4、TT3、TT4验证的线性范围均在厂家线性范围内,二者具有良好的线性关系(R2≥0.993 2);参考区间符合率达到100%;不确定度的评定结果符合要求。与甲减组比较,甲亢组TSH水平明显降低(P0.05),FT3、FT4、TT3、TT4水平明显升高(P0.05);与健康对照组比较,甲减组TSH水平明显升高(P0.05),甲亢组FT3、FT4、TT3、TT4水平明显升高(P0.05)。结论雅培i2000SR全自动化学发光分析仪检测甲状腺功能五项的性能验证结果符合临床要求,精密度高,准确度高,线性范围宽,测定结果准确可靠,可用于大批量临床标本的检测,且TSH、FT3、FT4、TT3、TT4对甲状腺疾病的诊断具有重要的价值。     

深圳地区血红蛋白Q-Thailand的表型和基因型分析

目的分析深圳地区血红蛋白(Hb)Q-Thailand的基因型和表型的关系,为Hb疾病的筛查提供参考数据。方法收集该院72397例标本,分为成年男性、成年女性及新生儿,采用毛细管电泳法对Hb Q-Thailand进行筛查,对筛查阳性者采用Sanger测序法进行DNA测序鉴定,采用跨越断裂点PCR法和PCR结合反向点杂交法进行珠蛋白生成障碍性贫血基因分型检测,并分析其红细胞参数。结果深圳地区人群Hb Q-Thailand的携带率为0.039%。成年男性Hb Q-Thailand合并-α4.2杂合缺失的Hb、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、Hb Q-Thailand和HbA2+变异体分别为(144.0±5.0)g/L、(80.7±2.1)fL、(27.1±0.1)pg、(26.6±3.3)%和(2.3±0.3)%;成年女性分别为(121.0±13.2)g/L、(76.7±3.1)fL、(25.7±1.6)pg、(28.5±0.9)%和(2.5±0.3)%;新生儿Hb电泳分析结果为HbA(13.7±4.1)%、HbF(64.9±4.1)%、Hb Q-Thailand(21.0±2.7)%和Hb Bart′s(0.4±0.1)%。结论深圳地区Hb Q-Thailand以杂合子常见,并与-α4.2缺失型珠蛋白生成障碍性贫血连锁遗传,临床需重视其表型与基因型的规律,以进行产前筛查和遗传咨询。     

生化检测系统携带污染的分析与处理策略

摘要：试剂成分、反应产物、反应条件以及分析系统各组件部分是生化配套检测系统和开放系统发生携带污染的来源和途径。配套系统从如试剂配方的污染源头进行设计、控制，并提高仪器的清洗能力，经过全遍历评估以及交叉污染规避设置，可有效切断携带污染。借鉴配套检测系统解决携带污染的方法，为生化开放系统解决携带污染提供策略。生化分析系统交叉污染来源多，污染途径复杂，保持检测系统的完整性是避免交叉污染的有效手段，是检测系统有效性的基本保证。