miR-144通过影响TLR/MyD88通路抑制肝癌SMMC-7721细胞侵袭

目的 探讨miR-144基因过表达对肝癌SMMC-7721细胞侵袭及Toll样受体（TLR）/髓样分化因子88（MyD88）免疫通路的影响。方法 培养人正常肝细胞HL-7702,肝癌细胞系SMMC-7721,采用荧光实时定量PCR法检测两组细胞miR-144基因表达差异,将SMMC-7721细胞分为空白组、miR-144 NC组、miR-144 mimics组,倒置荧光显微镜检测转染效率,qRT-PCR法检测转染后各组miR-144基因表达情况,通过细胞计数试剂盒（CCK8）法各组SMMC-7721细胞存活情况,通过Transwell法检测各组SMMC-7721细胞侵袭情况,应用免疫印迹法检测各组侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）以及TLR/MyD88通路相关蛋白表达情况,观察添加40 μmol/L MyD88抑制剂TJ-M2010-2组对SMMC-7721细胞TLR/MyD88通路相关蛋白表达情况。结果 与正常组相比,SMMC-7721组miR-144基因相对表达量显著降低（P<0.05）;与空白组、miR-144 NC组相比,miR-144 mimics组miR-144基因表达显著升高（P<0.05）;CCK-8实验显示,与对照组、miR-144 NC组相比,miR-144 mimics组转染48、72、96 h后细胞存活率显著降低（P<0.05）;与空白组、miR-144 NC组相比,miR-144 mimics组侵袭细胞数、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低（P<0.05）;与空白组、miR-144 NC组相比,miR-144 mimics组、TJ-M2010-2组Toll样受体4（TLR4）、MyD88、磷酸化核因子-κB（p-NF-κB）/核因子-κB（NF-κB）蛋白表达显著降低（P<0.05）,miR-144 mimics组与TJ-M2010-2组TLR4、MyD88、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 miR-144过表达可能通过抑制TLR/MyD88通路转导降低SMMC-7721细胞存活、抑制SMMC-7721细胞侵袭。     

腹腔镜下不结扎胆囊管的胆囊大部分切除术28例

[目的]探讨不结扎胆囊管的腹腔镜下胆囊大部分切除术(laparoscopic subtotal cholecystectomy ,LSTC)的可行性.[方法]回顾性分析了2003～2007年本院和湘雅三医院普外科采用LSTC 28例的病例资料,术中胆囊残端不结扎,分析术后胆漏发生率、持续时间、量及住院时间、胆道损伤等.[结果]28 例行LSTC,男18例、女10例,平均年龄68(38～87)岁,平均手术时间90 min,平均住院日5 d.其中2例发生一过性胆瘘,分别于术后12 d和14 d自愈;3例行ERCP下胆管取石术和鼻胆管引流治疗持续性胆瘘.其中1例合并有心肌梗死,1例并发膈下脓肿,无一例死亡.[结论]当胆囊三角分离难度高时,LSTC不失为替代中转开腹手术的一种选择,其胆瘘可预见且易于治疗.     

二甲双胍对人胆管癌RBE细胞的作用及其机制

目的：探讨二甲双胍对人肝胆管癌细胞的增殖、凋亡和细胞周期的影响及机制。 方法：将人肝胆管癌RBE细胞分别用二甲双胍、Compound C（AMPK抑制剂）、二甲双胍+ Compound C处理,以未处理的RBE细胞作为空白对照,分别用MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期、Western blot检测细胞AMPK/mTOR通路蛋白的表达。 结果：与空白对照组比较,二甲双胍作用后的RBE细胞存活率降低;细胞凋亡率升高;G0/G1期比例增加,而S期比例减少;磷酸化AMPK（p-AMPK）蛋白表达上调,而磷酸化mTOR（p-mTOR）蛋白表达明显下调,差异均有统计学意义（均P<0.05）。二甲双胍与Compound C联合作用RBE细胞后,二甲双胍的上述作用均被取消,各项指标与空白对照组差异均无统计学意义（均P>0.05）。单独的Compound C作用RBE细胞后,各项指标未见明显改变,与空白对照组差异均无统计学意义（均P>0.05）。 结论：二甲双胍能抑制人胆管癌RBE细胞的增殖、促进凋亡和细胞周期阻滞,该作用可能其与激活AMPK从而抑制mTOR下游效应分子有关。

     

皮下埋植式药泵经肝动脉灌注化疗联合无水乙醇注射治疗不能切除的原发性肝癌

目的探讨皮下埋植式药泵经肝动脉灌注化疗联合无水乙醇注射治疗不能切除的原发性肝癌的临床疗效.方法 32例经病理证实的不能切除的中晚期原发性肝癌病人,分为2组进行治疗.①无水乙醇注射治疗组(ITIE组,17例);②经皮下埋植式药泵经肝动脉插管灌注化疗(HAI)联合无水乙醇注射治疗组(联合治疗组,15例).结果 治疗后获二期手术切除率,二组分别为5.8%、20%(P<0.01);治疗后0.5、1、2年生存率ITIE组为58.5%、35.3%、11.7%;联合治疗组为80%、53.3%、26.6%,均有显著性差异(P<0.01).结论 HAI+ITIE 联合疗法是治疗不能切除的原发性肝癌的有效方法,效果优于单纯无水乙醇注射治疗.     

腹腔镜阑尾切除术价值探讨

目的探讨腹腔镜阑尾切除术的价值.方法;回顾性分析腹腔镜阑尾切除术与开腹阑尾切除术二组患者的临床资料.结果二组手术时间无差异(P＞0.05),住院费用相似(P＞0.05),腹腔镜组住院时间短(P＜0.001),术后并发症少.结论腹腔镜阑尾切除术是一种安全有效、创伤小的手术,可推广使用.     

DDR1基因在不同复发倾向肝癌患者中的表达水平差异及在肝癌临床预后中的价值

[目的]探讨DDR1基因在不同复发倾向肝癌患者中的表达水平差异及在肝癌临床预后中的价值.[方法]从本院肝癌标本库中选取2008年3月至2012年4月期间在本院进行肝癌根治性切除手术患者的肝癌标本23例作为研究材料,以无肝脏疾病的胆囊结石患者肝脏组织10人作为正常对照组.以免疫组化和Western blotting以及酶联免疫反应(ELISA)检测肝组织中DDR1的表达情况,根据表达情况分为DDR1阳性组(11例)和阴性组(12例).同时对术后患者进行为期2年的随访,根据复发情况分为早期复发组和非早期复发组,最后以不同组别的DDR1表达情况及不同表达情况的肝癌患者的生存率作对比分析.[结果]χ2检验结果表明早期复发肝癌组织和非早期复发肝癌组织DDR1阳性率差异显著(χ2=7.013,P<0.01)即DDR1在早期复发肝癌组织中表达量显著高于非早期复发肝癌组织,且与正常肝组织相比,二者DDR1阳性率均显著高于对照组,存在显著差异(P<0.05).t检验结果也表明DDR1蛋白在早期复发肝癌组织较非早期复发肝癌组织的表达量显著增高,两者之间具有统计学差异(t=2.786,P<0.05).肝癌组织中DDR1基因的表达与患者的性别、年龄、肿瘤直径和Edmonson分级无关而与患者早期复发倾向有着较为明显的相关性(t=16.186,P<0.01).DDR1在肝癌组织中的表达情况与术后患者的生存率并无明显的相关性.[结论]与非早期复发肝癌患者组织相比DDR1基因在早期复发的肝癌患者组织中的阳性率及表达量显著增高,因此可以将其表达情况作为判断肝癌患者术后预后的指标之一.     

乌司他丁对门脉高压症出血病人肝功能的保护作用

目的　探讨门脉高压症出血病人肝功能变化情况 ,同时评价应用乌司他丁 (Ulinastatin ,UTI)治疗的效果。方法　将 4 6例肝硬化门脉高压症出血病人分为两组 :Ⅰ组 (n =2 2 )为一般治疗组 ,Ⅱ组 (n =2 4 )为UTI治疗组 ,分别检测Ⅰ、Ⅱ组出血后 1,2 ,4 ,7,10 ,14d血ET变化情况 ,并检测1,7,14d的肝功能。另选肝硬化门脉高压症未出血病人 (n =2 0 ) ,检测血浆ET ,作为对照组。结果　出血后 7,14d ,Ⅰ、Ⅱ组总胆红素 (TBIL)均呈先升高后下降 ,但Ⅱ组较Ⅰ组下降快 (分别P <0 0 5 ,P <0 0 1)。ALT、AST亦呈先升高后下降 ,但于出血后 14日Ⅱ组较Ⅰ组下降快 (P <0 0 5 )。Ⅰ、Ⅱ组出血后 1d血ET浓度较对照组显著升高 (P <0 0 1) ,随后逐步下降。Ⅱ组ET下降较Ⅰ组快 ,于出血后 2d(P <0 0 5 )、4d (P <0 0 1)、7d(P <0 0 5 )有显著差异。出血后 1dⅠ、Ⅱ组ET浓度与TBIL呈正相关 (r=0 734,P <0 0 1) ;Ⅰ、Ⅱ组血ET下降指数与TBIL增高指数呈负相关 (r =- 0 4 86 ,P <0 0 5 )。结论　肝硬化门脉高压症大出血后应用UTI治疗可抑制TBIL、ALT、AST、ET等的升高 ,起到保护肝脏功能的作用。     

人羊膜上皮细胞上清液对人肝癌BEL-7402细胞的体外抗肿瘤作用

目的探讨人羊膜上皮细胞(h AECs)上清液对体外培养的肝癌细胞系BEL-7402细胞迁移、增殖与凋亡的影响。方法 BEL-7402细胞随机分为5组,其中对照组不加h AECs上清液,其余4组加入体积分数分别为6.25%、12.5%、25%和50%的h AECs上清液作用24 h后,通过划痕实验、MTT试验和流式细胞术检测BEL-7402细胞迁移、增殖和凋亡;Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达量。结果 h AECs上清液能剂量依赖性地抑制BEL-7402细胞迁移、增殖并诱导凋亡(P0.05);25%和50%h AECs上清液组BEL-7402细胞caspase-3和caspase-8蛋白的切割片断蛋白定量明显高于对照组(P0.05)。结论 h AECs上清液对体外培养的BEL-7402细胞具有一定的抗肿瘤作用。     

肝硬化门静脉高压症患者超声内镜引导门静脉压力梯度测定：附52例报告

背景与目的：门静脉高压症的特征是门静脉压力梯度（PPG）增加,然而,传统的PPG测定方法困难、风险大,临床很难常规实施。前期的动物实验及人体试验均显示了超声内镜引导门静脉压力梯度（EUS-PPG）测定技术的可行性及准确性,且近期一项前瞻性研究在肝小静脉闭塞所致的急性或亚急性门静脉高压症患者中验证了EUS-PPG与肝静脉压力梯度（HVPG）存在一致性。然而,对于肝硬化门静脉高压症患者进行EUS-PPG测定的相关临床研究在国内尚未见相关报道。因此,本研究探讨肝硬化门静脉高压症EUS-PPG测定的准确性、可行性及安全性。方法：选取2022年3月—2022年8月中南大学湘雅三医院收治的52例肝硬化门静脉高压症进行EUSPPG测定,分析EUS-PPG测定结果及其与患者临床特征的关系。结果：52例患者中,47例既往或近期有食管胃静脉曲张出血史（14例既往经历过脾切除断流手术）。51例（98%）成功实施EUS-PPG,1例技术失败。门静脉穿刺途径分别为经胃壁（42例）或经十二指肠（9例）,经胃壁穿刺肝静脉（10例）或肝后下腔静脉（41例）,操作时长（15.5±3.4） min。51例患者的平均门静脉...     

血浆内皮素与总胆红素含量检测在门脉高压大出血中的意义

【目的】探讨血浆内皮素(ET)和总胆红素(TBIL)含量在门脉高压症大出血时的动态变化及其临床意义。【方法】将61例肝硬化门脉高压症病人分为三组:对照组,出血组,死亡组。分别检测出三个组出血发生后不同时间血浆ET和血清TBIL含量变化情况。【结果】对照组ET含量(57.62±17.15)pg/ml,TBIL含量为(12.42±6.53)μmol/L,出血组ET(100.32±24.28)pg/ml,TBIL(37.20±28.87)μmol/l,出血组出血后d1、d2血浆ET浓度较对照组显著增高(P<0.01),随后于4～7d逐步下降。死亡组ET(124.86±20.7)pg/ml,呈显著增高,TBIL为(30.96±11.46)μmol/L。出血组、死亡组出血d1TBIL水平基本接近(P>0.05),d2TBIL显著升高(P<0.01)。【结论】过高的ET、TBIL水平可能提示肝功能损害和病人预后不良。动态检测ET、TBIL对于了解患者的病情,提高诊疗水平有重要的临床意义。