实时荧光PCR在乙肝病毒DNA检测中的临床意义

目的用实时荧光定量PCR检测乙型肝炎患者HBV DNA结果进行分析,以探讨其临床诊疗意义。方法对630例血清标本用时间分辨荧光免疫技术定量测定乙肝炎病毒血清学指标,用荧光定量PCR法检测血标本中的HBVDNA,并依据乙肝两对半结果进行归类分组。结果 630份标本中,大三阳206例标本中有173份HBV-DNA为阳性,阳性率为84.0%,其PCR定量拷贝数为(2.13±0.72)×107/ml;小三阳211例中有64份HBV-DNA阳性,阳性率达到30.3%,PCR定量拷贝数为(1.61±0.85)×106/ml;69份HBs Ab(+)、HBe Ab(+)、HBc Ab(+)标本有33份HBV-DNA阳性,阳性率47.8%;27份HBs Ag(+)、HBc Ab(+)标本中有8份HBV-DNA为阳性,阳性率为29.6%;22份HBe Ab(+)、HBc Ab(+)标本有3份PCR HBV-DNA阳性,阳性率13.6%;20份HBs Ag(+)、HBs Ab(+)、HBe Ag(+)、HBc Ab(+)标本中有17份HBV-DNA为阳性,阳性率为85.0%;17份HBs Ab(+)、HBe Ab(+)阳性标本有3份PCR HBV-DNA阳性,阳性率为17.6%;13份HBs Ab(+)、HBc Ab(+)标本有1份HBV-DNA阳性,阳性率7.7%;12份HBc Ab(+)标本有5份PCR HBV-DNA阳性,阳性率为41.7%;2份HBs Ab(+)的标本HBV-DNA均为阴性,PCR定量拷贝数为1.00E×103;1份HBs Ag(+)标本HBV-DNA均为阳性,阳性率为100%;其余30例全阴性结果和各少见模式基本未见有HBV-DNA的检出。结论 PCR定量测定HBV-DNA可以真实反映体内乙肝病毒感染和复制及病毒载量情况,更有利于临床治疗和疗效观察。     

奥曲肽对肝硬化食管静脉曲张破裂出血患者血清血管紧张素转化酶水平的影响

血管紧张素转化酶(angiotensin convening enzyme,ACE)能够催化血管紧张素I转变为血管紧张素Ⅱ.研究表明ACE在肝硬化门脉高压的发病机制中发挥作用[1],而应用血管紧张素转化酶抑制剂能够快速降低门脉压力[2].     

cDNA芯片检测耐药急淋患者细胞凋亡调控相关基因的差异表达

目的通过观察耐药／非耐药急性淋巴细胞性白血病（急淋）患者细胞凋亡调控相关基因的差异表达,探索多药耐药的分子病理机制。方法用TRIzol抽提外周血标本总RNA，逆转录生成cDNA并标记后，与含有4096个人类已知基因的cDNA表达谱芯片杂交，检测细胞凋亡调控相关基因在两者间的差异表达。结果耐药组与非耐药组有150个基因表达显著差异，包括耐药组83个基因低表达，67个基因高表达，其中凋亡调控相关基因有6个低表达，8个高表达。结论细胞凋亡调控相关基因表达异常可能是白血病多药耐药的分子病理机制之一。     

人缺血修饰白蛋白对糖尿病合并冠心病早期诊断及其预后的价值分析

目的探讨治疗前人缺血修饰白蛋白（ischemia modified albumin,IMA）水平在预测冠心病病情程度中的作用,并分析其与冠心病预后及心血管事件发生之间的关系。方法选取南京医科大学附属无锡市人民医院2010年11月～2011年5月收治的患者88例,分为糖尿病合并急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）急性发作组（ACS组）、糖尿病合并稳定性心绞痛（stable angina pectoris,SAP）组（SAP组）、仅有糖尿病而无冠心病组（无冠心病组）。收集患者的一般临床资料,应用ELISA方法测定所有患者血清中IMA含量。结果 ACS组中血清IMA的含量为（37.5±21.3）U/mL,SAP组为（27.4±16.3）U/mL,两组比较,差异有统计学意义（t=2.651,P〈0.05）,无冠心病组为（20.0±11.4）U/mL,与ACS组比较,差异有统计学意义（t=7.253,P〈0.05）,SAP组血清IMA含量与无冠心病组相比无显著增高,两组比较,差异无统计学意义（t=1.008,P〉0.05）。人血清IMA含量与肌酸激酶、乳酸脱氢酶、LVEF值无相关关系。人血清IMA含量与入院即刻血糖、hsCRP、肌酸激酶同工酶、门冬氨酸氨基转移酶呈正相关,与入院血压呈负相关。半年随访发生心血管事件患者的IMA水平[（40.29±25.89）U/mL]明显高于未发生心血管事件患者的IMA水平[（29.48±17.70）U/mL],两者比较,差异有统计学意义（P=0.014）。结论人血清IMA检测在冠心病严重程度及预后评估中具有重要的价值,可以作为冠心病早期诊断的生化指标之一;人血清IMA的升高程度与预后及心血管事件之间有一定的关系,可以作为反映病情的一个重要的实验室指标。     

成人胰岛细胞的分离纯化及初步的临床应用

目的分离及纯化成人胰岛,以用于同种胰岛细胞移植。方法利用胶原酶灌注消化以及Ficoll分离液分层纯化的方法获得成人胰岛细胞,并应用于2例临床糖尿病患者。结果经双硫腙染色鉴定,分离纯化后的胰岛细胞活性达到80%~90%;且经胰岛素释放试验表明,实验中收获的胰岛具有良好的胰岛素分泌功能。经临床试验,1例糖尿病患者在输入此胰岛后,已脱离胰岛素治疗;另1例患者已停止服用降糖药。结论用胶原酶灌注消化及Ficoll分离液分层纯化的方法获得成人胰岛细胞是可行的。     

血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性、血清ACE水平与2型糖尿病合并脑梗死的相关性研究

目的 :探讨血管紧张素转换酶 (ACE)基因多态性、血清ACE水平和 2型糖尿病合并脑梗死的关系。方法 :应用PCR方法检测 2型糖尿病患者和健康者ACE基因的缺失 /插入多态性并同时测定其血清ACE水平。结果 :糖尿病合并脑梗死组的DD基因型及D等位基因频率与非脑梗死组比较有显著性差异 ,且血清ACE水平在脑梗死患者中明显升高 ,与ACE基因多态性呈一致表现。结论 :糖尿病患者中DD基因型和D等位基因携带者具有患脑梗死易感性 ,并且在脑梗死患者ACE基因多态性与血清ACE水平呈一致表现     

动态检测血清降钙素原水平对多发伤患者伤情判断的临床意义

目的　探讨血清降钙素原 (PCT)水平的动态变化对多发伤患者伤情判断的意义。方法　对急诊抢救和入住重症监护病房 (ICU)的多发伤患者 96例在入院第 1、3、5、7、10、14和 2 1天分别采集静脉血标本 ,采用免疫发光法检测血清PCT ,以判断PCT水平变化与多发性创伤严重程度和预后之间的关系。结果　多发伤患者在创伤后血PCT水平明显升高 ,各创伤严重程度评分 (ISS)分值区段内的创伤患者PCT水平有显著差异 (P <0 0 5 ) ,随着ISS评分值的增高 ,不同时段PCT水平亦升高 ,二者之间存在正相关性 ,而PCT与年龄无关。结论　动态检测多发伤患者外周血PCT的水平变化可以作为判断多发伤伤情的有效指标之一     

当归制剂对脂多糖诱导的肝组织炎性损伤的影响及分子机制初探

目的　探讨应用当归制剂对脂多糖诱导的肝组织炎症反应的影响及其分子机制。方法　将ICR小鼠分为用药组、实验对照组及正常对照组 3组 ,采用脂多糖 (LPS)配合卡介苗 (BCG)注射法建立小鼠 (用药组和实验对照组 )肝脏炎性损伤模型 ,经腹腔给用药组小鼠注射当归制剂 ,给实验对照组注射等量生理盐水 ,连续给药 10d后 ,常规组织病理学观察 ,比较小鼠肝组织炎症反应情况。同时用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)检测小鼠脾脏单个核细胞TNF -αmRNA表达的变化。结果　用药组小鼠肝脏的炎症反应明显弱于实验对照组 (P <0 .0 5 ) ;肝脏炎性损伤小鼠脾脏单个核细胞TNF -αmRNA的表达在注射LPS后 4h较正常对照组小鼠明显增加 (P <0 .0 1) ,在注射后 7h时达到峰值 ,而后有所下降 ;在注射LPS后 7h ,用药组小鼠TNF -αmRNA的表达与实验对照组相比 ,无显著差异。结论　当归制剂能显著抑制脂多糖诱导的肝组织炎症反应 ,明显减轻肝组织的炎性损伤 ,然而其主要抑制作用可能并非通过影响炎性介质TNF -αmRNA的表达来实现。     

MMP2和TGF-β1在人肾透明细胞癌组织中的表达及其意义

目的 探讨基质金属蛋白酶2(MMP2)和转化生长因子β1(TGF-β1)在肾透明细胞癌组织中的表达及其意义.方法 应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测43例肾透明细胞癌患者癌与癌旁组织MMP2和TGF-β1的表达水平.结果 在不同的病理分级和临床分期的43例肾透明细胞癌组织中,MMP2表达水平均显著高于痛旁组织;癌与癌旁MMP2表达的差值随临床分期的升高而呈上升趋势.TGF-β1在肾透明细胞癌组织巾的表达阳性率为32.56%(14/43),而癌旁组织均无表达;TGF-β1表达阳件的.肾透明细胞癌病理分级和临床分期均处于Ⅰ或Ⅱ级(期).结论 MMP2和TGF-β1在肾透明细胞癌组织过度表达参与其浸润生长,侵袭转移等病理过程,对其检测为预后判断提供了帮助.