高亲合力抗双链DNA抗体对系统性红斑狼疮的诊断价值

目的探讨高亲合力抗双链DNA抗体（抗dsDNA抗体）在系统性红斑狼疮（SLE）病人中的分布情况以及与性别、年龄、狼疮肾炎等指标之间的关系。方法收集2017年8月至2018年4月广东省中医院抗dsDNA抗体阳性的血清标本共155例,其中SLE组116例,非SLE组39例,分别使用酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接免疫荧光法（IIF）同时测定血清样本的总抗dsDNA抗体和高亲合力抗dsDNA抗体水平;采用Kappa分析探讨不同检测方法间结果的一致性;Spearman相关系数分析高亲合力dsDNA抗体与性别、年龄等临床指标的相关性。结果在非SLE组中IIF法总抗dsDNA抗体（dsDNA-IIF）阴性,ELISA法总抗dsDNA抗体（dsDNA-ELISA）阳性的例数为15例,说明dsDNA-ELISA检测结果对SLE的特异性不高。dsDNA-IIF与dsDNA-ELISA的总体符合率为58.7%（91/155）,Kappa=0.172 < 0.4,两种方法的一致性较低（P < 0.01）;而dsDNA-IIF与高亲合力抗dsDNA抗体的总体符合率为61.9%（96/155）,Kappa=0.514,0.4 < Kappa < 7.5,两种方法的一致性一般（P < 0.01）。高亲合力抗dsDNA水平与dsDNA-IIF和dsDNA-ELISA水平呈正相关（P < 0.01）,与性别、年龄、是否是狼疮肾炎无相关性（P>0.05）;dsDNA-IIF和高亲合力抗dsDNA抗体联合诊断敏感率为90.5%（105/116）,特异性为100%（39/39）。结论dsDNA-IIF和高亲合力抗dsDNA抗体水平的联合检测更有助于对SLE的诊断。高亲合力抗dsDNA抗体与年龄、性别和是否为狼疮性肾炎无相关性。     

革兰染色三步法在痰涂片找真菌中的实验探索及临床应用

目的 探讨革兰染色三步法在痰液涂片找真菌中的临床意义.方法 以直接镜检法为对照方法,通过自我设计实验和临床实验检测对革兰染色三步法进行临床评价.结果 自我设计实验中,直接镜检法真菌数为3～6个/HP痰液涂片的检出率为97.5％,真菌数为1～3个/HP痰液涂片的检出率为85.0％,真菌数为0～2个/HP痰液涂片的检出率为80.0％;革兰染色三步法真菌数为3～6个/HP痰液涂片的检出率为100.0％,真菌数为1～3个/HP痰液涂片的检出率为100.0％,真菌数为0～2个/HP痰液涂片的检出率为97.5％.临床实验中,直接镜检法真菌的检出率为27.38％,革兰染色三步法真菌检出率为36.31％.结论 革兰染色三步法真菌检出率比直接镜检法高,更适合临床实验检测.     

多种炎症指标联合淋巴细胞亚群在COVID-19不同临床分型的临床诊断价值分析

目的：探讨不同临床分型的新型冠状病毒肺炎（coronavirus disease 2019,COVID-19）患者多种炎症指标水平变化规律及临床意义。方法：收集2020年1月28日至3月3日在湖北省中西结合医院住院110例COVID-19确诊患者作为研究对象,并将其按《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（试行第7版）》诊断标准分为普通型、重型、危重型3组,回顾性分析和比较各组患者的一般资料、血清白蛋白（albumin,ALB）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、降钙素原（procalcitonin,PCT）及细胞因子白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）、白介素-8（interleukin-8,IL-8）、白介素-10（interleukin-10,IL-10）,以及全血CD4+ T淋巴细胞计数（CD4+ T lymphocyte,CD4+ T）、CD8+ T淋巴细胞计数（CD8+ T lymphocyte,CD8+ T）各指标水平;各组炎症指标表达的数据不符合正态分布以中位数（四分位间距）表示,普通组、重型组、危重型组肺炎组间数据差异采用Kruskal-Wallis秩和检验,组间两两比较采用Mann-Whitney U检验;对具有统计学意义的炎症指标鉴别诊断价值采用受试工作者特征曲线（receiver operator characteristic curve,ROC曲线）,并根据ROC曲线下面积（area under the curve,AUC）选取最佳诊断炎症指标。结果：对于血清IL-6、IL-10、CRP、PCT水平,危重型组＞重型组＞普通型组,ALB、CD4+ T、CD8+ T水平,普通型组＞重型组＞危重型组,差异均有统计学意义（P＜0.001）。血清IL-1β、IL-8水平在各临床分组中变化不明显,P值分别为0.388和0.128,无统计学意义（P>0.05）。IL-6与CRP/ALB 2个指标联合后AUC为0.931,敏感度为0.885,特异性为0.825。结论：血清多种炎症指标联合T淋巴细胞亚群实时检测有助于判断 COVID-19患者的临床病情评价,作为治疗效果评估、危重程度及预后等的重要参考,联合监测血清IL-6与CRP/ALB将大大提高预测COVID-19危重程度的准确率。     

多种中药对泛耐药肺炎克雷伯菌体外抗菌活性筛选

目的筛选对泛耐药肺炎克雷伯菌有抗菌活性的中药,并初步探究其体外抑菌机制。方法从60种中药颗粒剂中,筛选对28株泛耐药菌有体外抗菌活性的中药。调整有抗菌活性药液pH至中性,比较调整pH前后抑菌效果差异。检测有抑菌活性中药的最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）、联合抑菌效果以及对细菌细胞外碱性磷酸酶（ALP）活性改变。结果筛选出黄芩、黄连、麻黄和鸡血藤等4种对泛耐药菌均有抑菌作用的中药,其MIC依次为:64、64（82.1%黄连菌株）、128（19.9%）、128、256 mg/mL;MBC依次为:128、64（28.6%黄连菌株）、128（71.4%）、256、512 mg/mL。4种中药调整pH前后抑菌效果均无差异（P>0.05）。黄连和黄芩联合应用时的FIC值均>2。随着4种药物浓度的增加,ALP的浓度均升高,其中黄芩和黄连作用后的ALP浓度升高更为明显。结论黄芩、黄连、麻黄和鸡血藤具有良好的体外抗菌效果,其中黄芩和黄连的抗菌机制可能与增加细胞膜的通透性有关;但黄芩和黄连联合用药有拮抗作用。     

血浆渗透压冰点下降法与不同公式法之间比对

目的探讨16个常见血浆渗透压计算公式,评估血浆渗透压的公式计算值与冰点下降法测量值最为符合的计算公式;利用所收集数据模拟出一个与患者的血浆渗透压较为相符的公式。方法利用冰点下降法测量血浆渗透压,同时使用Vitros 5.1干化学分析仪检测血浆钠(Na)、钾(K)、氯(Cl)、葡萄糖(Glu)、尿素(Urea)浓度。运用16个计算公式计算出对应的血浆渗透压,运用Passing-Bablok回归来判断拟合优度,并与实测值进行配对t检验。采用多元线性回归及配对t检验的方法,拟合一个与测量值最符合的计算公式。结果血浆渗透压的公式计算值与测量值最为符合的是公式1.86(CNa+CK)+CGlu+CUrea+10;利用多元线性回归得出的回归公式为1.86CNa+2.75CK+1.16CGlu+0.92CUrea+5.77。结论初步认为可以使用1.86CNa+2.75CK+1.16CGlu+0.92CUrea+5.77作为血浆渗透压的计算公式。     

同位素稀释液相色谱串联质谱法测量血清未结合雌三醇的协作研究

目的用同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)候选参考方法进行实验室间血清未结合雌三醇(u E3)协作研究,通过该研究进一步确认方法的性能特征(正确度和精密度),并将该方法在国内参考实验室推广,推动u E3标准化进程。方法依据ISO/WD 15725-1和GB/T 6379标准,拟定我国血清u E3协作研究方案。协作研究分为两个阶段:初步试验和正式试验,共9家参考实验室参加。按要求收集5个浓度水平样品并进行均匀性评价,分发到9家参考实验室,要求每个样品每日重复测量5次,连续测量3 d。计算各实验室测量结果的偏移和精密度,用格拉布斯(Grubbs)检验和柯克伦(Cochran)检验识别离群值和离群实验室。根据合格实验室的结果计算靶值,并向离群实验室和偏出允许范围的实验室提供整改建议。结果样品均匀性评价:所有样品测量结果计算F值均小于F0.05(9,20)临界值,样品中u E3是均匀的。初步试验:Grubbs检验,1个实验室测量结果为离群值;Cochran检验,2个实验室检验结果为离群值。剔除离群值后计算靶值;2017E301为(22.08±0.24)nmol/L;2017E302为(33.46±1.67)nmol/L。2个实验室结果超出允许范围。正式试验:Grubbs检验,所有实验室测量结果均未检出离群值;Cochran检验,3个实验室数据出现离群值。剔除离群值后计算靶值,2017E303为(10.36±0.35)nmol/L,2017E304为(15.47±0.26)nmol/L,2017E305为(46.97±1.19)nmol/L;各实验室间测量结果不精密度分别为1.14%~2.21%、0.79%~1.93%、0.60%~2.09%,测量结果偏移分别为-6.18%~4.83%、-2.26%~2.39%、-4.19%~4.07%。结论通过组织开展协作研究,确认各参考实验室通过协作研究方案能够快速建立并运行u E3候选参考方法,除个别实验室外各实验室的检测性能满足预定要求(不精密度3.0%,偏移7.5%),进一步确认了该方法的性能和各实验室运行参考方法的能力。通过初步研究和正式研究对研究方案的各实验环节进行了验证和完善;推动了u E3项目参考方法在我国参考实验室的运行,为后续厂商试剂主校准品联合定值或标准物质研制搭建了平台,促进u E3项目的标准化。     

不同检测系统17项常规生化结果的比对和偏倚评估

目的探讨不同检测系统间常规生化结果的可比性，为不同实验室检验结果的互认和实验室认可提供依据。方法参考美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的EP9-A2文件，以Modular PPI检测系统为目标，用患者新鲜血清对不同自建检测系统的17项常规生化结果与目标系统进行比对，计算自建检测系统（y）和目标检测系统（x）之间的相对偏差，以美国临床医学检验部门修正法规（CLIA’88）允许总误差的1／2为标准，判断检验结果的可比性。结果自建检测系统1的总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）、1-谷氨酰基转移酶（GGT）、三酰甘油（TG）、总钙（TCa）、无机磷（IP）与目标系统不具可比性，自建检测系统2的白蛋白（Alb）、TBil、DBil、TG、IP与目标系统不具可比性，自建检测系统3的所有17个项目与目标系统均具可比性。结论自建检测系统与目标系统的常规生化结果依项目不同存在不同程度的偏差。当用2个以上的检测系统检测同一检验项目时．应进行方法比对和偏倚评估，以实现检验结果的可比性。     

前清蛋白定量检测限和功能灵敏度的评价及临床应用

目的：对 Roche Modular P 全自动生化分析仪检测前清蛋白（PA）的空白限（LoB）、检测限（LoD）、定量检测限（LoQ）以及功能灵敏度（FS）进行评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）EP-17A 文件,将空白样品生理盐水及系列低浓度样品在 Roche Modular P 全自动生化分析仪上进行检测确定该方法的空白限、检出限和定量检测限。依据国内通用方法确定功能灵敏度。结果 PA 的空白限为16．35 mg/L ,检测限为18．23 mg/L ,定量检测限暂无法评价,功能灵敏度为25．00 mg/L。结合其可报告范围的低值,确定其临床的报告范围及报告方式。结论建立了 PA 在 Roche Modular P 全自动生化分析仪上检测的定量检测限,为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息,对不同评价的方法进行比较,明确了不同方法实际应用的优点以及局限性。     

新型冠状病毒核酸抗体表达模式与基础性疾病和实验室指标的相关性

目的分析新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019, COVID-19)核酸抗体表达模式与实验室检测指标及患者基础性疾病的相关性。方法收集2020年1月28日至3月3日在湖北省中西结合医院的95例COVID-19确诊患者, 按照核酸和抗体结果的不同表达模式进行分型分组(分组1～分组7), 分析比较各组患者一般资料、基础疾病病史和实验室检测结果。计量资料组间比较采用Kruskal-Wallis秩和检验, 百分率的比较采用χ2检验, P<0.05为差异有统计学意义。结果抗体和核酸全阴性组(分组1)、抗体全阴性且核酸阳性组(分组2)血清白细胞介素6(interleukin 6, IL-6)在所有检测指标中异常率最高, 分别为62.5%(5/8)和100.0%(2/2);不同分期模式下, 抗体模式相同, 与核酸阴性组比较, 核酸阳性组CD4+ T淋巴细胞(CD4+ T)、CD8+ T淋巴细胞(CD8+ T)、IL-6、血清淀粉样蛋白A(SAA)、C反应蛋白(CRP)异常率和患者危重率明显升高。在所有分期模式中, SAA、CRP异常率无多大变化, 特异性不高。抗体...     

儿童甲型H1N1病毒感染早期血常规特点及C反应蛋白水平分析

目的分析甲型H1N1流感(甲流)患儿血常规特点及C反应蛋白水平特点,为初步诊断儿童甲流提供帮助。方法选择205例甲流患儿、135例普通流感患儿和60名健康对照儿童,统计分析白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比、单核细胞百分比和全血CRP水平。三组间计量资料比较采用ANOVA单因素方差分析,两两组间计量资料比较采用SNK-q检验。结果甲流组、普通流感组和健康对照组WBC均值分别为(6.83±2.80)×109、(8.61±4.07)×109、(8.13±1.99)×109,PLT总数均值分别为(242.44±85.70)×109、(326.74±116.03)×109、(248.67±42.16)×109,MPV均值分别为(8.62±0.95)fl、(8.40±0.78)fl、(9.41±0.61)fl。三组间WBC差异无统计学意义(F=2.6,P0.05),PLT总数差异有统计学意义(F=7.150,P0.05),MPV差异有统计学意义(F=5.981,P0.05)。甲流组患者淋巴细胞和中性粒细胞百分比与健康对照组比较差异无统计学意义(q值分别为0.57、2.06,P值均0.05),但单核细胞百分比明显高于健康对照组和普通流感组,差异有统计学意义(q值分别为8.17、5.39,P值均0.05)。结论甲型H1N1流感感染早期儿童血常规WBC无显著变化,单核细胞比例和CRP水平增高,而PLT总数低于普通流感患儿,可为鉴别普通流感和甲流提供参考。