新比色法测定血清铁

0　引　　言　　铁是人血清及其他体液中重要的微量元素 ,在许多病理状态下会出现变化。测定血清铁含量的方法有多种 ,其中原子吸收分光光度法为目前的参考方法 ,但需要昂贵的仪器设备 ,操作过程也比较复杂 ;另外微分电位溶出法 [1]也是测定血清铁的较好方法 ,但也需要特定的仪器设备。本研究以 Nitro-PAPS作为呈色配体 ,用 Triton X- 1 0 0从转铁蛋白中解离出铁 ,以抗坏血酸为还原剂 ,并通过巯基乙醇酸 ( thilglycolic acid)消除血清铜离子的干扰 ,建立起一种简便、快速的比色以测定血清铁。1　材料和方法1 .1　试剂　实验所用试剂均为…     

白色念珠菌对五种抗真菌药物体外敏感性研究

目的了解白色念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性情况,为临床正确选择抗真菌药物和有效控制该菌引起的感染提供依据。方法采用美国国家临床实验标准委员会(NCCLS)推荐的微量肉汤稀释法,测定从临床标本中分离的102株白色念珠菌对五种抗真菌药的最低抑菌浓度(MIC)。结果酮康唑、氟胞嘧啶和伊曲康唑对102株白色念珠菌MIC较低,其MIC90分别为0.25μg/ml、0.5μg/ml和0.5μg/ml。两性霉素B和氟康唑MIC90分别为2μg/ml和8μg/ml。受试菌对氟胞嘧啶敏感率最高为100%,对氟康唑和伊曲康唑的敏感率分别为88.3%和75.5%。对氟康唑耐药的9株菌株也同时对伊曲康唑耐药。结论受试白色念珠菌对氟胞嘧啶敏感率最高,未发现耐药菌株;酮康唑对受试菌抗菌活性最强,对唑类药物存在耐药性,且该类药物之间存在交叉耐药。     

抑制剂增强碳青霉烯类灭活法对革兰阴性杆菌碳青霉烯酶初步分类的评价

目的评价抑制剂增强碳青霉烯类灭活法(ieCIM)对革兰阴性杆菌碳青霉烯酶检测及初步分类的可靠性。方法分别以他唑巴坦和乙二胺四乙酸作为碳青霉烯酶抑制剂,对CIM进行改良。选取临床分离的198株肠杆菌科细菌和35株非发酵菌,采用ieCIM检测碳青霉烯酶并进行初步分类,以PCR方法检测碳青霉烯酶基因作对比。结果 198株肠杆菌科细菌中碳青霉烯酶基因阳性101株,CIM检测阳性99株;碳青霉烯酶基因阴性97株,CIM检测均阴性。35株非发酵菌中碳青霉烯酶基因阳性25株,CIM检测阳性24株;碳青霉烯酶基因阴性10株,CIM检测均阴性。使用ieCIM初步分类碳青霉烯酶,87株产A类酶菌株中检出85株(97.7%),25株产B类酶菌株中检出22株(88.0%),12株产D类酶菌株和2株同时产A、B类酶菌株全部检出,ieCIM检测敏感性为96%,特异性100%。结论 ieCIM与基因检测结果一致性高,适合临床微生物常规工作中对碳青霉烯酶的检测及初步分类。     

B淋巴细胞活化因子特异的单链DNA适体的人工进化

目的: 进化筛选与B淋巴细胞活化因子（B cell activating factor belonging to the TNF family，BAFF）特异结合的单链DNA适体，鉴定其结合力。方法:应用指数方式富集的配体系统进化（systematic evolution of ligands by exponential enrichment, SELEX）技术，将随机序列寡核     

TEM-116型ESBL天然酶与重组酶的动力学特性研究

目的 研究TEM-116型ESBL天然酶与重组酶的动力学特性，并比较它们的差异。方法 采用紫外分光光度法检测酶促抗生素水解反应，以Lee-Wilson改良双倒数方程数据处理法进行数据处理，测定天然酶与重组酶的Km、Vmax及kcat，观察温度和pH对酶促反应的影响。结果 以Lee-Wilson改良双倒数方程数据处理法进行数据处理方便而准确地测定了天然酶与重组酶的Km与Vmax并计算出kcat,温度和pH对天然酶与重组酶酶促反应效应相似。天然酶与重组酶最优先的底物均为头孢哌酮，其次是头孢氨苄；对氨苄西林、阿莫西林、青霉素和哌拉西林有最高的催化效率。结论 天然酶与重组酶的动力学参数无显著差异。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血APRIL基因表达水平初探

目的 建立检测人增殖诱导配体（APRIL）mRNA的实时荧光定量PCR方法,探讨外周血单个核细胞APRIL mRNA表达水平与原发性胆汁性肝硬化（PBC）的相关性。方法 采用实时荧光定量PCR法检测30例正常人和40例PBC患者外周血单个核细胞（PBMC）APRIL基因的相对表达量,以Ct值比较法计算APRIL基因相对表达水平。结果 PBC患者外周血单个核细胞APRIL mRNA的△Ct值为9．3±2.0,与正常对照组比较．差异显著（P〈0．05）。采用2^-△△Ct法进行数据分析后,PBC组APRIL mRNA相对表达量比正常对照组高3．5倍。PBC患者中抗核抗体（ANA）阳性占80％,其中荧光模式为核膜型19例。其他型13例（着丝点型10例,混合型3例）,其APRIL基因相对表达量比正常对照组高6.5和1．7倍。结论 PBC患者外周血单个核细胞APRIL mRNA表达水平显著升高,且与ANA荧光模式相关。     

Toll样受体4在强直性脊柱炎患者外周血白细胞中的表达及临床意义初探

目的：探讨Toll样受体4（Toll-likereceptor 4,TLR4）在不同人群外周血白细胞的差异表达及其在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,As）中的意义。方法：应用流式细胞术检测60例AS患者及40例健康对照外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞TLR4的表达。结果：TLR4在外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞均有表达,以单核细胞表达为主;HLA-B27阳性和阴性AS患者外周血3种细胞TLR4的阳性表达率均明显高于对照组（P〈0．001）,但两者之间并无显著差异。结论：TLR4主要表达于外周血单核细胞,但AS患者外周血3种细胞表达均上调,这种上调与HLA-B27阳性与否无关,提示TLR4信号通路的异常与AS的发病相关。     

酵母样真菌对抗真菌药物耐药性研究进展

在临床上,真菌感染率的上升,提高了抗真菌药物的使用率,随之而来耐药菌株也不断增多,给临床的治疗带来一定的困难[1-2].本文简要综述酵母样真菌对抗真菌药物耐药性方面的研究进展.     

酵母样真菌对抗真菌药物耐药性研究进展

自上世纪八十年代以来,感染性疾病中,真菌感染在免疫受损的群体发病率在较大提高,其原因与HIV感染、癌症患者放疗化疗、器官和骨髓移植、广谱抗生素的滥用、激素的应用以及静脉插管和血液透析等介入性操作增加等因素有关[1-4]。随耐药菌株也不断增多,给临床的治疗带来一定困难[5,6]。本文简要综述酵母样真菌对抗真菌药物耐药性方面研究进展。1酵母样真菌感染流行情况在过去20年里,酵母样真菌引起的全身性感染呈上升趋势。在美国医院获得血流(blood stream)感染中,念珠菌排在第四位。据国外报道每年念珠菌引起的人群发病率为2/10万~10/10万…     

丝状真菌常规药物敏感试验及其质量控制

美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)于1998年推出了丝状真菌肉汤稀释法抗真菌药物敏感性试验参考方法M38-P。该方法包括常量和微量肉汤稀释法,适用于曲霉菌、镰刀菌、波氏假阿利霉菌、根霉菌及孢子丝菌等丝状真菌。2002年NCCLS对该方法又进行了修订,即M38-A[1]。现对丝状真菌常规药物敏感试验及其质量控制简要介绍如下。1抗真菌药物1.1来源直接购买厂家生产的纯药物粉剂,不能使用药店或其他临床制剂;药物粉剂按厂家说明储存,或存于-20℃甚至更低温度的干燥器(最好是真空干燥器)中。1.2贮存液的配制与贮存抗真菌药物贮存液浓度至少应为…