产P-V杀白细胞素金黄色葡萄球菌肺炎诊断与治疗

产Panton-Valentine杀白细胞素(Panton-Valentine Leukocidin,PVL)金黄色葡萄球菌近年来在全球范围广泛流行,并引起严重感染性疾病.PVL与一种以健康年轾人为主要感染人群的高发病率、高病死率坏死性肺炎密切相关,日渐受到广泛关注.本文就PVL的生物学特性、致病性,PVL相关的坏死性肺炎的诊断与治疗等作一综述.     

多形核粒细胞在金黄色葡萄球菌杀白细胞素相关肺炎性损伤中的作用

目的 探讨多形核粒细胞(PMN)在金黄色葡萄球菌Panton Valentine杀白细胞素(PVL)介导的肺炎性损伤中的作用.方法 取15只新西兰大白兔均分为3组,构建肺炎性损伤模型.对照组使用PBS灌肺,粒细胞正常兔直接用重组PVL灌肺(rPVL组),粒细胞减少症兔先用长春新碱(VCR)处理,再用rPVL灌肺(VCR+rPVL组).造模后9h,计数外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中PMN,同时检测BALF上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量、肺通透指数(LPI),BALF中PMN凋亡率、坏死率、活性氧自由基(ROS)释放量.取肺组织检测肺湿干比,并进行病理学检查.组间比较采用t检验.结果 rPVL组外周血PMN为(2.69±0.34)×106/mL,显著低于对照组的(3.63±0.38)×106/mL(t=4.12,P＜0.05).对照组、rPVL组和VCR+rPVL组BALF中PMN分别为(0.57±0.01)×106/mL、(3.01±0.02)×106/mL和(0.10±0.02)×106/mL,rPVL组显著高于对照组(t=254.39,P＜0.05).rPVL组兔LDH、LPI和肺湿重/干重比均显著高于对照组,但后者与VCR+rPVL组比较,差异无统计学意义.rPVL组BALF中PMN晚期凋亡率和坏死率分别为( 18.98±1.04)％、(63.56±3.53)％,对照组分别为(1.03±0.17)％、(0.95± 0.33)％(t=38.24,39.48;均P＜0.05),VCR+rPVL组凋亡率和坏死率分别为(1.17=0.24)％、(1.1 3±0.17)％.rPVL组、对照组和VCR+rPVL组ROS分别为1.56±0.39、0.41±0.03和0.39±0.02,rPVL组明显升高(t=6.58,P＜0.05).rPVL组肺组织有弥漫性炎性细胞浸润、出血、水肿,VCR+rPVL组仅见支气管周围与肺泡间隔极少量炎性细胞浸润.结论 rPVL可引起粒细胞正常兔肺炎性损伤,但对粒细胞减少症兔肺损伤极小.PVL引起肺炎性损伤可能是依赖PMN的招募和聚集,继而坏死和(或)激活,释放细胞毒素颗粒内容物和(或)活性氧代谢产物等.     

NF-κB信号通路蛋白和细胞因子在金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素相关肺炎症性损伤中的作用

目的 探讨NF-κB信号通路蛋白和细胞因子在金黄色葡萄球菌PV杀白细胞毒素(PVL)介导的肺炎症性损伤中的变化和作用.方法 取30只新西兰大白兔随机分为2组,每组各15只.rPVL组用重组PVL灌入,正常对照组使用PBS灌人.造模后,于3、6、9h处死兔,每个时间段5只,取肺组织做病理学检查;ELISA方法检测肺组织匀浆IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α蛋白含量;免疫组织化学染色检测肺组织中NF-κB p65蛋白.结果 rPVL组兔肺组织病理检查显示有弥漫性炎性细胞浸润、出血、水肿等肺损伤表现;肺组织匀浆中IL-6、IL-8、TNF-α含量随感染时间延长逐渐升高,IL-10含量于9h开始升高;NF-κB p65蛋白活化强度随感染时间延长逐渐增强.结论 NF-κB信号通路蛋白激活及细胞因子大量释放是PVL相关肺损伤重要的发病机制之一,下调肺内NF-κB激活细胞数量有望成为治疗PVL相关肺损伤的途径.     

PDTC对PV-杀白细胞素(PVL)诱导THP-1巨噬细胞NF-κB活化及炎性因子表达的影响

目的 探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对PV-杀白细胞素(panton-valentine Ieucocidin,PVL)诱导THP-1巨噬细胞NF-κB及炎性因子表达的影响.方法 实验分3组,PBS对照组、rPVL刺激组和PDTC处理组,在加入rPVL刺激前60 min,给予100 μmol/L PDTC预处理THP-1巨噬细胞.采用免疫组化检测NF-κB的移位,Western blot检测细胞胞质IκB蛋白和胞核NF-κB蛋白表达,ELISA法检测细胞上清IL-8和IL-6蛋白的表达,RT-PCR法检测IL-8和IL-6 mRNA水平表达.结果 PDTC处理组NF-κB阳性细胞明显减少,核蛋白表达降低,胞质IκB蛋白降解减少;IL-8和IL-6mRNA表达明显下调,蛋白分泌量分别由12.96 ng/ml和6.55 ng/ml降低到6.78 ng/ml和3.88ng/ml,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PDTC可能通过抑制NF-κB的活性,从而降低II-8和IL-6的表达,对PVL引起的炎性损伤具有一定的保护作用.     

重组PV-杀白细胞素LukF-PV蛋白多克隆抗体的制备及鉴定

目的制备重组金黄色葡萄球菌PV-杀白细胞素LukF-PV蛋白多克隆抗体并鉴定。方法纯化获得重组蛋白LukF-PV,免疫新西兰白兔,收集多抗血清,ELISA法测定抗体滴度,Western blotting法鉴定免疫活性。结果成功免疫新西兰白兔获得多抗血清,ELISA测定其效价为1∶103,Western blotting鉴定其能识别重组蛋白和金葡菌PVL蛋白。结论成功制备出重组金黄色葡萄球菌PV-杀白细胞素LukF-PV蛋白多克隆抗体,并进行鉴定,为建立产杀白细胞素的金黄色葡萄球菌的快速、廉价的免疫学检测方法奠定基础。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染的基因分型及耐药性研究

金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,SA)是医学上重要的致病菌,在医院环境中广泛分布、致病力强,可引起皮肤黏膜及软组织的脓肿、中耳炎、关节炎、肺炎等临床常见的感染~([1-3]),也可以引起骨髓炎、心内膜炎、脑膜炎和菌血症等严重感染~([4]).     

41例梅毒患者脑脊液检测结果分析

目的分析梅毒患者脑脊液的实验室检查结果,探讨脑脊液检查在神经梅毒诊断中的价值。方法回顾性分析本院2015年11月～2016年10月收治的41例梅毒患者脑脊液的甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验(TPPA),以及常规、生化和免疫球蛋白IgG检查的结果。结果确诊神经梅毒13例,神经梅毒疑似4例,排除神经梅毒24例。41例梅毒患者脑脊液检查中,TRUST阳性9例;TPPA阳性17例;白细胞升高(10×10~6/L)3例(3/13);蛋白异常(0.6 g/L)7例(7/13),IgG升高(34 mg/L)11例(11/13);葡萄糖和氯化物基本正常;神经梅毒组与非神经梅毒组比较,脑脊液检查相关指标的差异有统计学意义。结论神经梅毒发病隐匿,症状无特异性,易造成误诊或漏诊,对疑似病例应尽早做脑脊液相关检查,可为神经梅毒的早期诊断和治疗提供重要依据。     

10例布鲁氏菌病临床及实验室特征分析

目的总结分析布鲁氏菌病的临床及实验室特征,提高非疫区医生及检验人员对该病的认识。方法回顾分析我院2015年～2018年收治的10例布鲁氏菌病患者临床资料、流行病学特点及实验室检查结果。结果本资料中布鲁氏菌病患者发病季节主要在3月～8月,中年男性为主,其中70%患者有明确病畜接触史。实验室检查WBC正常或减低,80%患者C-反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)升高;所有患者均行血培养检查,血培养平均报阳时间为3.8天,经VITEK2 Compact全自动细菌鉴定仪鉴定为布鲁氏菌。结论布鲁氏菌病临床表现及实验室检查缺乏特异性,非疫区医务人员均应提高对该病的认识,对不明原因长期发热或关节肌肉疼痛经常规治疗无效时,应考虑到布鲁氏菌病,及早进行血培养检查,并及时与实验室沟通,避免漏检误检。     

金黄葡萄球菌杀白细胞素(PVL)对THP-1巨噬细胞IL-8、IL-6表达的影响

目的 研究金黄葡萄球菌杀白细胞素( panton-valentine leucocidin,PVL)对THP-1巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路及IL-8、IL-6的表达影响,探讨PVL相关肺组织损伤的致病机制.方法 实验前用100nmol/L佛波酯(PMA)孵育THP-1细胞48...