TINIA检测HbA_(1c)的性能评价及和IE-HPLC在HbE患者中的应用比较

目的评价免疫抑制比浊法(TINIA)检测糖化血红蛋白(HbA1c)的分析性能,与离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)检测HbA1c进行比对和偏倚评估,并评估血红蛋白(Hb)变异体E(HbE)对TINIA和IE-HPLC的影响。方法参考美国临床与实验室标准化协会(CLSI)发布的方法学评价系列文件(EP文件)及有关文献,对TINIA检测HbA1c的精密度、正确度、分析测量范围、分析干扰以及生物参考区间进行评价和验证,对TINIA与IE-HPLC检测Hb结构正常的血液样本和含HbE的血液样本进行对比分析和偏倚评估,分析患者平均血糖的相关性。结果 TINIA检测HbA1c的批内精密度2.08%,总不精密度2.94%;在HbA1c浓度为4.4%~18.3%范围内,理论值与实测均值呈线性相关(r=0.999 4);Hb、游离胆红素(FBiL)、结合胆红素(CBiL)、乳糜(CH)浓度分别为9.9~49.6μmol/L、65.6~328.0μmol/L、65.6~328.0μmol/L和3 000~12 000 FTU时,差异百分比均5%;厂商提供的参考区间(4.8%~5.9%)适用于临床实验室。对于Hb结构正常的血液样本,TINIA和IEHPLC的HbA1c检测结果差异无统计学意义(P0.05),两种方法的相关性良好(r2=0.999 2)。对于HbE浓度在5.4%~54.7%范围内的血液样本,TINIA的平均偏倚为-4.1%~1.9%,均5%,几乎不受HbE的干扰,HbA1c检测结果与平均血糖的相关性较好(r=0.998 8);当HbE6.4%时IE-HPLC检测HbA1c的实测值与理论值平均偏倚为5.7%~278.7%,差异百分比均5%,测定结果与预期理论结果有明显差异;两种方法检测结果差异有统计学意义(P0.01)。结论 TINIA检测HbA1c的分析性能符合临床测定的性能要求,不受HbE的干扰。当HbE6.4%时,IE-HPLC法检测HbA1c会受干扰,出现假性增高的情况。     

床旁检验血糖仪与生化分析仪血糖测定结果比对分析

目的对中山医院床旁检验（POCT）血糖仪与全自动生化分析仪血糖测定结果进行比对分析和偏倚评估,以保证血糖仪检测结果的一致性。方法参照《便携式葡萄糖仪血液葡萄糖测定指南》,采集肝素钠抗凝静脉血10份,血糖水平分布在3.20～25.81mmol/L。在POCT血糖仪和生化分析仪上重复测定3次,以生化仪为靶仪器,计算相对偏倚。结果 42台血糖仪中的38台与生化分析仪测定值相对偏倚在1%～13%,符合要求。结论通过对中山医院POCT血糖仪与生化分析仪血糖测定结果的比对和偏倚评估,评价血糖仪检测的准确性,以更好地规范医院床旁血糖仪的使用。     

E-test检测念珠菌对5种抗真菌药物敏感性试验

目的：评价E-test检测念珠菌和酵母菌对5种抗真菌药物敏感性的临床应用价值。方法：以白念珠菌ATCC90028为标准质控菌株，用E-test方法与NCCLS M27-A方法同时检测137株临床分离酵母菌对5-氟胞嘧啶、氟康唑、两性霉素B、伊曲康唑、酮康唑5种药物敏感性，观察两所测得结果符合率。结果：5-氟胞嘧啶和两性霉素B敏感性较高，MIC和MIC50值小，与M27-A方法测得结果的总符合率均为94．2％；氟康唑、伊曲康唑和酮康唑的MIC和MIC50值最大，出现一定耐药性，总符合率分别为83．0％、74．5％和79．6％。结论：E-test法检测念珠菌对5种抗真菌药物敏感性与NCCLSM27-A参考方法符合率较高，操作简单，结果可靠。     

应用CLSI EP5-A2文件评价生化检测系统的精密度性能

目的应用CLSIEP5-A2文件对生化检测系统检测的精密度性能进行评价,以确定其是否满足临床的需要。方法在全自动生化分析仪上,根据CLSIEP5-A2文件,用稳定的高低值实验样品对采用速率法和终点法检测的项目进行精密度试验,对其批内标准差(S批内)、批间标准差(S批间)、天间标准差(S天间)和总不精密度(S总)进行评价。结果检测系统检测常规生化项目的批内标准差为美国的临床实验室室间质量评估允许误差的1/4,天间标准差应为该允许误差的1/3,且小于厂商声明的精密度性能指标,两者差异无统计学意义(P0.05)。说明由实验估计的总不精密度均可接受。结论精密度既是临床检验的方法评价,也是检测系统性能评价的重要指标之一。CLSIEP5-A2精密度性能评价方法能够较为严密地反映出自动生化分析仪的长期使用性能是否能符合日常常规工作的质量要求。     

四种方法检测糖化血红蛋白的干扰性能评价

摘要：目的：探讨亲和层析法、高效液相色谱法（HPLC）、免疫比浊法和酶法检测糖化血红蛋白A1c（HbA1c）对游离胆红素（F-Bil）、结合胆红素（C-Bil）、血红蛋白（Hb）和乳糜微粒（CM）的抗干扰能力。 方法：收集EDTA-K₂抗凝新鲜血,制备HbA1c 10.4%和6.2%的高、低浓度标本,对4种方法检测HbA1c进行干扰实验。 结果：4种干扰物对亲和层析法、HPLC法检测HbA1c无干扰。CM≥15 000 FTU时,免疫比浊法测定HbA1c有干扰。F-Bil、C-Bil≥121.3 μmol/L时,酶法检测高浓度HbA1c有干扰;F-Bil≥196.8 μmol/L、C-Bil≥121.3 μmol/L时,酶法检测低浓度HbA1c有干扰。 结论：酶法检测HbA1c抗胆红素干扰能力有待改进,应剔除黄疸标本。免疫比浊法则应避免高CM标本。     

检验专业知识在仪器维修方面的应用

目的探讨检验人员如何在生化仪器维修中运用专业知识,协助维修工程师对故障进行快速诊断。方法检验人员与维修工程师共同评估故障类型,分析仪器的灯能量状态,分析生化项目的反应曲线,合理设计精密度试验等对故障进行评估,综合分析故障原因。结果故障得到快速诊断,维修效率得到明显提高。结论掌握并运用检验专业知识能缩短仪器故障的诊断时间,有效提高维修效率。     

不同方法检测缺铁性贫血患者糖化血红蛋白A1c的一致性

目的观察不同方法检测缺铁性贫血(IDA)患者糖化血红蛋白A1c(HbA1c)的一致性。方法参照美国国家糖化血红蛋白标准化计划(NGSP)认证Ⅰ级实验室要求,以通过NGSPⅠ级实验室认证的VariantⅡ检测系统为参考系统,以分别代表离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)、酶法、免疫比浊法和亲和层析高效液相色谱法(AC-HPLC)的VariantⅡTurbo、Modular P、Leadman、Primus Ultra2检测系统为实验系统,用20份健康体检者和20例糖尿病(DM)患者的HbA1c浓度范围为4.2%~14.6%的样品进行比对;再以通过比对的4个检测系统和VariantⅡ检测系统检测20例IDA患者和20例IDA合并DM患者样品并对检测系统间的数据进行直线回归分析。结果 5个检测系统检测20例IDA患者和20例IDA合并DM患者样品,直线回归分析斜率范围为0.973 0~1.023 1,r2范围为0.995 5~0.998 1,偏差的95%CI的最大范围为-0.48%~0.48%、百分偏差的最大范围为-5.62%~5.95%。结论 IDA患者HbA1c水平用不同检测方法可获得一致的检测结果。     

化学发光免疫法检测AFP的空白限、检出限和定量检测限的建立与评价

目的 建立并评价化学发光免疫法检测甲胎蛋白（AFP）的空白限（LoB）、检出限（LoD）和定量检测限（LoQ）。 方法 参考CLSI EP17-A文件,将AFP空白样品和系列低浓度样品在Bayer Centaur 240化学发光免疫检测系统上进行检测,依据数据的分布规律,采用相应的统计学方法,确定血清AFP的LoB、LoD和LoQ,同时用传统方法建立AFP的检测低限(LLD)、生物检测限(BLD)和功能灵敏度(FS)。 结果 用EP17-A方案建立的LoB为0.80 ng/ml,LoD为2.60 ng/ml,LoQ为3.30 ng/ml;应用常规方法建立的LLD为1.00 ng/ml,BLD为2.20 ng/ml,FS为2.20 ng/ml。 结论 应用两种方法建立的LoB和LLD均低于仪器说明书声明的灵敏度性能,Bayer Centaur 240化学发光免疫系统检测AFP的分析灵敏度得到验证确认;实验室在验证仪器声明的LoB时,应同时建立检测系统的LoD和LoQ,以便为临床提供更为可靠的检验结果。两种评价方案均具有实用性,国内实验室可视具体情况选择不同的评价方案。     

Westgard方法决定图在检测系统分析性能评价中的应用

目的探讨Westgard方法决定图在检测系统分析性能评价中的应用。方法按NCCLS的文件要求对检测系统检测常规18个生化项目的不精密度和不准确度试验进行测定,采用Westgard方法决定图判断拜耳检测系统分析性能的可接受性。结果除GGT外,检测系统检测17个生化常规项目的总不精密度均小于1/4CLIA’88 TEa(允许总误差),偏倚均小于1/2CLIA’88 TEa(允许总误差),分析性能均优秀。重新改进检测系统和方法后,GGT分析性能亦达优秀。结论采用Westgard方法决定图可直接判断检测系统的分析性能,判断结果清晰直观,适合临床实验室对检测系统分析性能进行评价。