丙肝病毒核心总抗原定量检测的临床应用

目的 探讨定量检测丙型肝炎病毒核心总抗原（total HCV-cAg,tHCV-cAg）在丙型肝炎诊断中的作用及与病毒载量的相关性.方法 随机选取广州军区武汉总医院2010年10月-2013年3月丙肝患者血清标本66例,分别采用化学发光法检测血清tHCV cAg,酶联免疫法（ELISA）检测血清丙型肝炎游离核心抗原（free HCV-cAg,fHCV-cAg）及丙型肝炎抗体（hepatitis C virus antibody,HCV-Ab）,实时荧光定量PCR方法检测血清HCV-RNA,全自动生化分析仪检测血清谷氨酸氨基转移酶（ALT）.比较HCV-RNA,tHCV-cAg及fHCV-cAg阳性率差异,同时分析tHCV-cAg与HCV-RNA及ALT相关性,探讨tHCV-cAg联合检测HCV-Ab与HCV-RNA检测符合率.结果 66例丙型肝炎患者血清中,tHCV-eAg阳性率与HCV-RNA阳性率差异无统计学意义（χ^2=0.165,P＞0.05）;tHCV-cAg量与HCV-RNA呈正相关：logHCV Ag=0.81 log HCV RNA-1.31（γ=0.83,P＜0.05）.tHCV-cAg阳性率与fHCV cAg阳性率差异有统计学意义（χ^2 =12.53,P＜0.05）.HCV-cAg阳性组ALT值异常率与HCV-eAg阴性组ALT值异常率差异有统计学意义（P＜0.05,χ^2=17.47）.tHCV-cAg联合检测HCV-Ab符合率与HCV-RNA检测达100.00％.结论 化学发光法定量检测血清tHCV-cAg阳性率显著高于fHCV-cAg,与HCV RNA阳性符合率达96.08％ （49/51）,是丙型肝炎早期诊断的特异性指标.tHCV-cAg和HCV-RNA呈正相关性,与肝功能损害相关,是反映病毒的复制指标.tHCV-cAg联合检测HCV-Ab可减低丙型肝炎的漏诊率.     

雌激素膜受体-α信号通路与乳腺癌的相关性

雌激素受体α和β是一类转录因子,产生多种生理功能,雌激素受体α和β调控靶基因转录是配体依赖性的,然而,近来研究表明雌激素受体α还存在另外一条信号途径,也称作非基因组或膜启动途径,能够快速地被雌激素激活,这种雌激素受体α位于细胞膜,因此也称作膜雌激素受体α,已经报道膜雌激素受体α与多种肿瘤的发生相关,本文阐述了近年来雌激素受体α的研究成果以及与乳腺癌的相关性.     

过氧化物酶体增殖物激活受体δ激动剂在肾小管上皮细胞炎性反应中的作用

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)有3种异构体:PPARα、PPARδ和PPARγ.作为转录因子的PPARs,通过调节特定的目的基因的表达,影响脂代谢、糖代谢稳态、细胞分化、免疫反应、炎性反应和肿瘤等[1-2].PPARα激动剂(贝特类)和PPARγ激动剂(噻唑烷二酮)作为降脂药物和胰岛素增敏剂已经在临床上广泛应用,而且被证明具有肾脏保护作用[3-4].而PPARδ激动剂对肾脏作用的研究才刚刚起步,我们拟研究PPARδ激动剂L165041在肾小管上皮细胞炎性反应中的作用,为PPARδ激动剂在肾脏疾病中的应用提供理论基础.     

刺五加多糖对H2O2诱导的大鼠海马神经元凋亡的保护作用

目的研究刺五加多糖（ASPS）对H2O2诱导的海马神经元凋亡的影响及其机制。方法采用H2O2诱导大鼠海马神经元凋亡。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记法检测细胞凋亡率、免疫组化法检测caspase-3蛋白的表达、逆转录PCR法检测caspase-3 mRNA的表达。结果H2O2作用后,海马神经元凋亡率、caspase-3蛋白和mRNA表达水平均显著增高（P〈0.05）;给予ASPS干预后,均显著下降（P〈0.05）;而且,随ASPS剂量增加,作用效果显著增强（P〈0.05）。结论ASPS具有抑制氧化应激损伤诱导神经细胞凋亡作用,其机制与下调caspase-3 mRNA的表达有关。     

转位紧密黏附素受体细胞骨架偶联蛋白基因克隆、表达、抗体制备及应用

目的:克隆转位紧密黏附素受体细胞骨架偶联蛋白(TccP)基因,表达纯化TccP,制备其多克隆抗体并研究该抗体在EHEC O157:H7黏附宿主细胞模型中的应用.方法:从EHEC O157:H7 Sakai菌株基因组中克隆得到tccP基因,构建重组表达质粒pET28a-TccP.将此质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后用异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.经纯化分离后,免疫新西兰大白兔,制备其多克隆抗体,并用ELISA法和Western blot法对其进行鉴定.使用兔抗TccP多克隆抗体对EHEC O57:H7黏附宿主细胞模型中的TccP分子进行定位研究.结果:获得了TccP cDNA,与GenBank报道的序列一致,并成功构建了高效原核表达质粒pET28a-TccP;Western blot结果表明,经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了相对分子质量(Mr)约37000的目的蛋白.表达产物N端氨基酸序列测序结果与GenBank公布的基因序列推定的氨基酸序列完全一致.所制备的兔抗TccP多克隆抗体经Westem blot法测定可与Mr37000目的蛋白发生特异性结合反应;免疫荧光检测发现TccP聚集在EHEC O157:H7 黏附处细胞膜的下方.结论:成功构建了pET28a-TccP载体,获得了高纯度的重组TccP及其特异性多克隆抗体.     

乙型肝炎病毒外膜大蛋白与病毒复制及肝脏受损的相关性

目的 探讨乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒外膜大蛋白(hepatitis B virus large surface protein,LHBs)与病毒复制及肝脏受损程度的相关性.方法 随机选取武汉总医院2011年3月～6月乙肝患者血清标本192例,分别采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测LHBs,乙型肝炎病毒前S1抗原(PreS1-Ag),化学发光方法定量检测乙型肝炎病毒血清学模式,实时荧光定量PCR方法检测血清HBV-DNA,全自动生化分析仪检测血清谷氨酸氨基转移酶(ALT).按乙型肝炎病毒e抗原阴阳性不同分组,比较LHBs,HBV-DNA及PreS1-Ag阳性率差异,同时分析LHBs含量与HBsAg,HBV-DNA及ALT水平的相关性.结果 HBeAg阳性乙肝患者血清中,LHBs的阳性率与HBV-DNA阳性率差异无统计学意义(x2=0.32,P＞0.05),LHBs的阳性率与PreS1-Ag阳性率差异有统计学意义(x2=23.44,P＜0.05);HBeAg阴性乙肝患者血清中,LHBs的阳性率与HBV-DNA和PreS1阳性率差异均有统计学意义(x2=11.73,28.55,P＜0.05);LHBs含量与HBV-DNA拷贝数和表面抗原浓度呈正相关性(r=0.905,0.801,P＜0.05);阳性组间LHBs含量与ALT指数无相关性.结论 乙肝患者血清中LHBs的表达与HBV-DNA拷贝数、乙肝表面抗原浓度呈正相关,较PreS1-Ag更能反映乙肝患者病毒复制状况,尤其对HBeAg阴性患者抗病毒治疗及预后具有重要的指导意义,但不适用于判断肝细胞的受损程度.     

环境样品中病原性副溶血性弧菌高效检出法

〔目的〕为了提高环境样品中病原性副溶血性弧菌的检出率。〔方法〕采用PCR法、免疫磁珠法和神奈川现象培养基三者结合使用。〔结果〕分别从一份海水和一份海泥中检出了产生TDH ,神奈川现象阳性的副溶血性弧菌 ,血清型为O3 :K6。该血清型与同期发生的副溶血性弧菌食物中毒患者检出率最高的副溶血性弧菌血清型相同。经SfiⅠ ,NotⅠ限制性内切酶处理后 ,脉冲场凝胶电泳比较 ,一份海水与一名患者分离菌株、一份海泥与两名患者分离菌株的条带相同 ,表明为同一克隆派生而来。同时也说明食物中毒的发生与污染了TDH阳性O3:K6副溶血性弧菌的海水有关。〔结论〕该方法解决了用一般细菌培养分离方法很难从引起食物中毒的环境样品中检出病原性副溶血性弧菌的困扰 ,也为研究TDH阳性副溶血性弧菌在环境中的分布及由其引起的食物中毒的预防提供了重要依据。     

胰岛素抵抗改善剂

糖尿病中，尤其是非胰岛素依赖型糖尿病的病理特征是胰腺β细胞的胰岛素分泌不足或肝脏、骨骼肌、脂肪组织等胰岛素靶器官对胰岛素抵抗，即所谓胰岛素抵抗性。为改善胰岛素抵抗性而开发的胰岛素抵抗改善药物，已经有一部分作为治疗糖尿病的新药在临床开始使用。已发现它们...     

甲状腺功能异常孕妇的管理

前言妊娠时胎盘成为体内一大内分泌器官。因其有分泌各种激素的作用,孕妇的内分泌及代谢状态变化很大。对孕期甲状腺疾病的诊治须具备专门的知识,特别在探求流、早产的原因以及考虑子宫内生长迟缓(IUGR)、畸形与妊娠高血压综合征(妊高征)可能并发甲状腺功能亢进(甲亢)或低下(甲低)时治疗用药不可不细心注意对胎儿的影响。对孕妇甲状腺功能的评价甲状腺功能异常患者的妊娠率为0.1～0.3%,其中Basedow氏病(突眼性甲状腺肿)占61%,桥本氏病占12%,无症状性甲低占27%;流产率甲亢占26%、甲低占21%(对照组13%);早产率甲亢     

DNA甲基化在肿瘤生成中的作用机制

在许多人类肿瘤中都观察到DNA甲基化模式的改变。因此研究DNA甲基化在肿瘤生成中的作用具有重要意义。本文主要介绍几种DNA甲基化在肿瘤生成中的可能作用机制。包括：(1)癌细胞中的C→T变异信号;(2)肿瘤的DNA低甲基化;(3)肿瘤抑制基因的高甲基化;(4)染色体不稳的诱导。