血浆外泌体miR-452作为胃癌诊断的生物标志物

目的筛选胃癌血浆外泌体中差异表达的miRNA,分析其对胃癌诊断的敏感性与特异性及与胃癌患者的疾病特点之间的相关性。方法收集南京医科大学第一附属医院消化内科病理确诊为胃癌的住院患者与消化内科及体检中心的无癌健康对照人群的血液样本,离心后试剂盒抽提血浆外泌体及其RNA,通过透射电子显微镜观察、蛋白质印迹分析(Western blotting)鉴定标志蛋白及纳米粒径分析(nanoparticle tracking analysis, NTA)对血浆外泌体进行鉴定,定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)鉴定与胃癌发病相关的miRNA。结果共纳入胃癌患者80例和健康对照80名。成功对2例血浆外泌体(GC1和NC1)进行鉴定以证实其相关特性。在初始筛选阶段,对12例胃癌和12名健康对照者的血浆外泌体RNA进行qRT-PCR验证并依据其各自的2~(-△Ct)值,分析受试者的诊断ROC曲线下面积(AUC)。与健康对照者相比,胃癌的血浆外泌体miR-452-5p表达量显著升高(P=0.002),miR-452-5p的AUC值为0.798(95%CI:0.552～0.883)。而后纳入新的68对样本对筛选结果进一步验证,miR-452-5p的表达趋势与初始筛选一致,且诊断AUC值为0.733(95%CI:0.647～0.818)。分析已验证的miR-452-5p表达水平与胃癌病理特征无相关性(P0.05)。结论血浆外泌miR-452-5p可能为检测胃癌的新型潜在生物标志物,然而其对疾病的病理特性的影响仍需更大样本量的实验进一步研究。     

HBV-DNA实时荧光定量PCR检测试剂盒性能验证

目的基于ISO15189:2012要求,对一种国产HBV-DNA实时荧光定量聚合酶链反应检测试剂盒的性能参数进行验证,以评价其是否可应用于临床检测。方法依据《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件对试剂盒的正确度、精密度、检测下限、线性范围、特异度和抗干扰能力进行性能验证。结果试剂盒正确度符合要求(靶值对数值±0.4)。低值和高值的批内精密度CV为4%、0.65%,标准差(s)为0.19、0.04;低值和高值的中间精密度CV为4.75%、1.33%,s为0.17、0.09。HBV-DNA定量的检测下限定为100IU/mL。线性范围为1.00×102~5.00×108 IU/mL。特异度符合要求。血红蛋白浓度不大于28g/dL、总胆红素浓度不大于30mg/dL、三酰甘油浓度不大于3 200mg/dL,对检测结果没有影响(靶值对数值±0.4)。结论试剂盒的性能参数符合厂家声明,可以应用于临床检测工作。     

Twist基因逆转录病毒载体的构建及其诱导正常乳腺上皮细胞发生上皮间质转化

目的 构建Twist基因逆转录病毒载体,研究其对人正常乳腺上皮细胞MCF10A的影响.方法 酶切pcDNA3/myc-Twist获得myc-Twist,克隆到逆转录病毒载体pBABE-puro中,构建重组质粒pB AB E-myc-Twist.通过酶切、测序鉴定Twist基因正确后,在体外将质粒pBABE-myc-Twist和其对照分别与包装质粒pAmpho共同转染人胚肾上皮细胞系293T细胞,进行逆转录病毒的包装,并感染人正常乳腺MCF10A上皮细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选,获得成功转入Twist的MCF10A-Twist细胞和MCF10A-Vector对照细胞.通过RT-PCR和Western blot法验证Twist细胞在MCF10A-Twist和MCF10A-Vector细胞内的表达.免疫荧光技术和Western blot法检测细胞内上皮间质转化(EMT)标志蛋白的表达.Transwell(R)法检测细胞的迁移和侵袭能力.结果 重组逆转录病毒载体质粒pBABE-myc-Twist经酶切和测序鉴定构建正确;Twist基因被逆转录病毒成功导入MCF10A细胞,并在靶细胞内稳定表达,RT-PCR检测到Twist mRNA在MCF10A-Twist细胞中表达,Western blot法检测发现myc-Twist蛋白在MCF10A-Twist细胞中表达;免疫荧光和Western blot法检测显示在MCF10A-Twist细胞中E-cadherin表达显著下调、vimentin表达明显上调;与MCF10A-Vector细胞相比,Transwell(R)法检测发现MCF10A-Twist细胞迁移和侵袭能力明显增加(P＜0.01).结论 Twist诱导MCF10A细胞发生EMT转化,并促进其迁移和侵袭.     

经括约肌间瘘管结扎术治疗肛瘘的临床研究进展

经括约肌间瘘结扎术(LIFT)是治疗肛瘘的微创术式之一,受到广泛关注,但文献报道的治愈率各不相同。本文通过整理和总结近年来LIFT 治疗肛瘘的国内外文献,发现LIFT 最适用于经括约肌型肛瘘,最大的优点是不损伤括约肌,但内口的不处理可能是导致复发率较高的重要因素之一。LIFT 是临床上治疗肛瘘值得推广的术式,但还需要大样本的随机对照试验研究进行验证。     

早期呼吸功能训练对肺癌根治术术后患者肺功能及生活质量的影响

目的 探讨早期呼吸功能训练对肺癌根治术术后患者肺功能及生活质量的影响.方法 按随机数字表法将110例肺癌根治术术后患者分为观察组和对照组,各55例,对照组患者术后给予常规护理干预,观察组患者在此基础上给予呼吸功能锻炼.干预前和干预3个月后,比较两组患者的肺功能指标[第一秒用力呼吸容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC]、血气分析指标(血氧饱和度、血氧分压)、生活质量;干预后,比较两组患者的并发症发生情况.结果 干预后,两组患者FEV1水平、FVC水平、FEV1/FVC、血氧饱和度和血氧分压均高于本组干预前(P﹤0.05),且观察组患者FEV1水平、FVC水平、FEV1/FVC、血氧饱和度和血氧分压均高于对照组(P﹤0.05).干预后,两组患者简明健康状况调查问卷(SF-36)各维度评分和总分均高于本组干预前(P﹤0.05),且观察组患者SF-36量表各维度评分和总分均高于对照组(P﹤0.05).干预后3个月,观察组患者的并发症总发生率为9.09％,低于对照组的23.64％(P﹤0.05).结论 早期呼吸功能训练可明显改善肺癌根治术术后患者的肺功能及生活质量,降低并发症发生率.     

利拉鲁肽联合延续性护理对老年慢性心力衰竭伴糖尿病患者心功能及生活质量的影响

目的观察利拉鲁肽联合延续性护理对老年慢性心力衰竭(CHF)伴糖尿病患者心功能的影响,探讨CHF伴糖尿病患者院外治疗策略。方法选择2017年1—12月就诊于河北医科大学第一医院的老年CHF伴糖尿病患者120例,随机分为对照组、利拉鲁肽组和利拉鲁肽护理组,3组分别有37例、37例和39例完成研究。对照组维持原治疗方案,利拉鲁肽组给予利拉鲁肽干预,利拉鲁肽护理组给予利拉鲁肽联合延续性护理干预,观察12个月。分别于干预前及干预3,6,12个月后测定糖化血红蛋白(HbA1c)、左室射血分数(LVEF)、B型利钠肽(BNP)、左心室舒张末期内径(LVEDd)、6 min步行试验、明尼苏达心力衰竭生活质量量表评分。结果干预后,利拉鲁肽组和利拉鲁肽护理组LVEDd、LVEF、6 min步行试验、BNP、HbA1c和生活质量评分均逐渐改善(P均<0.05),利拉鲁肽护理组LVEDd、LVEF、6 min步行试验、BNP、HbA1c、生活质量评分和利拉鲁肽组LVEF、6 min步行试验、HbA1c、生活质量评分改善持续至实验结束(P均<0.05),利拉鲁肽组LVEDd和BNP改善持续至6个月时(P均<0.05)。干预3个月后,利拉鲁肽组BNP、LVEF和利拉鲁肽护理组BNP、LVEF、HbA1c、生活质量评分改善情况均明显优于对照组(P均<0.05),利拉鲁肽护理组BNP、LVEF和生活质量评分改善情况均明显优于利拉鲁肽组(P均<0.05);干预6个月和12个月后,利拉鲁肽组和利拉鲁肽护理组LVEDd、BNP、LVEF、6 min步行试验、HbA1c、生活质量评分改善情况均优于对照组(P均<0.05);干预6个月后利拉鲁肽护理组BNP、LVEF和生活质量评分改善情况均优于利拉鲁肽组(P均<0.05),12个月后利拉鲁肽护理组LVEDd、BNP、LVEF、HbA1c和生活质量评分改善情况均优于利拉鲁肽组(P均<0.05)。结论利拉鲁肽联合延续性护理治疗老年CHF伴糖尿病患者,可更好地改善心功能和控制血糖平稳,并可改善患者生活质量,可作为老年CHF伴糖尿病患者优选院外治疗及护理策略。     

俯卧位定点压迫止血法在经皮肾穿刺活检术中的应用

目的：探讨俯卧位定点压迫止血法在经皮肾穿刺活检术中的有效性。方法将352例经皮肾穿刺活检术患者随机分为试验组与对照组,在传统护理基础上试验组175例患者术后采用俯卧位定点压迫止血法,对照组177例患者采用腹带包扎止血法,比较两组患者术后并发症发生率。结果试验组急性尿潴留和腰痛发生率低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,但两组患者的胃肠痉挛、肉眼血尿、肾周血肿和低血压比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论俯卧位定点压迫止血法在经皮肾穿刺活检术中可减少急性尿潴留和腰痛的发生率,减轻患者痛苦,值得临床推广。     

阴茎癌行部分切除术患者性功能下降与焦虑、抑郁的关系

目的探究阴茎部分切除患者性功能下降与焦虑、抑郁的关系。方法2008年12月至2011年12月行阴茎部分切除的阴茎鳞状细胞癌患者共46例,通过国际勃起功能指数调查问卷（IIEF-15）、焦虑和抑郁自评量表（sAs／sDs）分别在术前及术后3、6、9、12个月评估患者性功能、焦虑和抑郁情况,进一步分析性功能的下降与焦虑、抑郁的关系。结果患者术后勃起功能、性高潮、性欲、性生活满意度和总体满意度较术前均显著下降,焦虑及抑郁的程度较术前显著上升,而且患者术后性功能的下降与焦虑、抑郁呈负相关。结论阴茎部分切除患者术后性功能的下降与焦虑、抑郁症状的加重呈显著相关。     

口腔鳞状细胞癌患者血清IL-8的表达及临床意义

目的:观察免疫趋化因子白细胞介素8(IL-8)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者血清中的表达,探讨其与OSCC临床病理因素的相关性。方法:应用酶联免疫反应(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)测定27例处于不同临床分期的OSCC患者和10例健康体检者血清中的IL-8水平。检测结果以x±s表示,应用SPSS 13.0软件包对数据进行t检验。结果:OSCC肿瘤组患者血清IL-8水平显著高于对照组(P<0.01),临床Ⅲ、Ⅳ期OSCC患者血清IL-8水平显著高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.01);有颈淋巴结转移的OSCC患者,血清IL-8水平显著高于无转移者(P<0.01)。结论:血清IL-8水平与口腔鳞状细胞癌的病理分级、临床分期及淋巴结转移等密切相关,是一种具有应用潜力的OSCC临床检测指标。