CD19+CD24hiCD38hi B细胞比例预测肝移植术后急性细胞性排斥反应发生的临床研究

目的分析肝移植术后受者外周血CD19⁺CD24^hiCD38^hi B细胞占单个核细胞比例变化情况及其与急性细胞性排斥反应(ACR)之间的关系。 方法回顾性分析2013年12月至2015年12月在浙江大学医学院附属第一医院接受心脏死亡器官捐献肝移植的80例成人受者临床资料，根据术后是否发生ACR，将受者分为ACR组(25例)和非ACR组(55例)。术前、术后各个时间点抽取参加研究者静脉血并分离外周血单个核细胞，加入异硫氰酸荧光素-单克隆鼠抗人CD19抗体、藻红蛋白-单克隆鼠抗人CD24抗体和别藻蓝蛋白-单克隆鼠抗人CD38抗体，流式细胞仪检测各组CD19⁺CD24^hiCD38^hi B细胞百分比。采用t检验和单因素方差分析比较正态分布计量资料，采用χ²检验比较计数资料，采用Kaplan-Meier法绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)。P<0.05为差异有统计学意义。 结果ACR组、非ACR组受者术前外周血平均CD19⁺CD24^hiCD38^hi B细胞比例分别为(3.13±0.91)%、(3.49±0.83)%，差异无统计学意义(t＝1.636，P>0.05)。ACR组术后发生ACR前外周血平均CD19⁺CD24^hiCD38^hi B细胞比例为(1.87±0.70)%。非ACR组受者术后3个月、6个月和1年外周血平均CD19⁺CD24^hiCD38^hi B细胞比例分别为(1.64±0.52)%、(1.63±0.56)%和(2.04±1.24)%，术后3、6个月平均值均低于术前和术后1年，差异均有统计学意义(P均<0.05)。ACR组受者发生ACR时外周血平均CD19⁺CD24^hiCD38^hi B细胞比例为(0.8±0.5)%，低于发生ACR前的平均水平(t＝5.752，P<0.05)，且低于非ACR组术后3个月、6个月和1年的平均水平(P<0.05)。ACR组受者接受抗排斥反应治疗后，CD19⁺CD24^hiCD38^hi B细胞比例也逐渐增加，ACR发生后7 d为(0.84±0.08)%，与ACR发生时相比差异无统计学意义(P>0.05)；而发生30 d后达(1.65±0.18)%，与ACR发生时相比差异有统计学意义(P<0.05)。当截断值为1.015%时，CD19⁺CD24^hiCD38^hi B细胞比例预测ACR发生的敏感度和特异度分别为0.786和0.702，ROC曲线下面积为0.775(95%CI: 0.671~0.879，P<0.05)。 结论CD19⁺CD24^hiCD38^hi B细胞比例下降与肝移植术后ACR反应发生有关，并可作为预测ACR发生的细胞标志物。     

中等强度有氧运动对中老年男性原发性高血压患者24 h动态血压、生活质量和糖脂代谢的影响分析

目的探讨中等强度有氧运动对中老年男性原发性高血压患者24 h动态血压、生活质量和糖脂代谢的影响。方法选取2018年6月至2019年6月本院收治的中老年男性原发性高血压患者122例为研究对象。依据随机数表法将入选患者分为观察组和对照组,每组各61例。两组患者均采取常规降压药物治疗,观察组患者在此基础上进行中等强度有氧运动。两组患者疗程均为12周。比较两组患者干预前后24 h舒张压和收缩压变化、生活质量改善情况、糖脂代谢指标变化。结果两组患者干预前24 h舒张压和收缩压、SF-36量表4个维度评分比较差异均无统计学意义(均P> 0.05)。两组患者干预后24 h舒张压和收缩压均显著低于本组干预前(均P <0.05),SF-36量表4个维度评分均显著高于本组干预前(均P <0.05);观察组患者干预后24 h舒张压和收缩压均显著低于对照组(均P <0.05),SF-36量表各维度评分均显著高于对照组(均P <0.05)。两组患者干预前后空腹血糖、糖化血红蛋白、餐后2 h血糖、高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯水平组间和组内比较差异均无统计学意义(均P> 0.05)。结论中等强度有氧运动可降低中老年男性原发性高血压患者血压,改善患者生活质量,但对糖脂代谢无明显影响。     

灰毡毛忍冬LmC3H1基因的克隆及表达模式与绿原酸含量相关性分析

目的:以灰毡毛忍冬为材料,克隆对-香豆酸3-羟化酶(LmC3H1)基因,进行生物信息学和表达模式分析,结合绿原酸含量,研究推测灰毡毛忍冬LmC3H1基因的功能。方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和RACE技术克隆LmC3H1基因的全长c DNA序列,对该序列进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和HPLC分别测定灰毡毛忍冬茎、叶及不同花期花中LmC3H1的相对表达量及绿原酸含量。结果:克隆得LmC3H1(Gen Bank:MN177695)基因,开放阅读框(ORF)长度为1 533 bp,编码510个氨基酸,推测其分子式为C_(2618)H_(4134)N_(718)O_(727)S_(22),相对分子质量为58 005.32,等电点8.92,为亲水性蛋白,定位于叶绿体中,具有跨膜区域LLLIPAVLFLISLVYPLI,含有细胞色素P450的保守结构域CYTOCHROME_P450(422-433 aa);Real-time PCR结果显示,LmC3H1在灰毡毛忍冬茎、叶及不同花期花有不同程度的表达,其中在花发育阶段,白色花蕾期相对表达量最高,花蕾初期及白色开花期次之;白色花蕾期花与茎、叶比,花的相对表达量最高,叶的最低;HPLC结果显示,从绿白色花蕾期到金黄色开花期绿原酸含量呈上升趋势,金黄色开花期含量最高,不同器官中,花中绿原酸最高,茎最低。结论:克隆得到灰毡毛忍冬LmC3H1基因,推测LmC3H1可能参与灰毡毛忍冬花绿原酸的生物合成。该研究为进一步研究该基因的功能及探究灰毡毛忍冬绿原酸生物合成和调节机制提供了依据,同时为遗传改良灰毡毛忍冬品质奠定了基础。     

姜黄素调控MicroRNA-1246及对膀胱癌T24细胞的放疗增敏机制探究

目的:研究在膀胱癌化疗中使用姜黄素的增敏功能原理。方法:在T24细胞经过姜黄素及放射处理后,探讨分析其细胞活力(细胞增殖试验试剂盒)、microRNA表达(miRNA芯片测序)、集落形成、凋亡(AnnexinV-F)分析、miR-1246及p53 mRNA及蛋白质(Westernblot)表达、ITC/7-AAD流式细胞计数(ITC/7-AAD)。结果:通过测试,发现17个异常microRNA表达,细胞在经过姜黄素处理后,T24细胞活力相较于常规组明显下降,并出现浓度依赖性的现象。在T24细胞中,miR-1246相较于人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1细胞)表达明显较高。姜黄素的浓度较高时,T24细胞miR-1246的表达会受其影响并明显下降。研究组使用浓度为20μg/mL的姜黄素,并结合放疗处理的方式,与常规组相比,研究组在控制miR-1246的表达、集落形成及细胞活力方面,效果更为显著,T24细胞比例会因转染antagomiR-1246而增加,细胞死亡现象一般发生于转染antagomiR-NC细胞时期。结论:膀胱癌细胞中,姜黄素和放射治疗都可促进microRNA-1246表达下调,在对肿瘤的治疗中可以使姜黄素及放疗结合,共同产生抗肿瘤作用。     

益气逐瘀方对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡及miR-24/Bim通路的影响

目的研究益气逐瘀方(参元丹)对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡及miR-24/Bim通路的影响。方法分离并培养乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞缺氧模型,Lipofectamine2000转染miR-24 mimic/inhibitor至心肌细胞,实验分为正常组、缺氧组、参元丹组、参元丹+miR-24 mimic组、参元丹+miR-24 inhibitor组,治疗组予参元丹含药血清干预。比色法检测心肌细胞培养基上清液LDH、CPK活性,MTT法检测心肌细胞存活率,Annexin V/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡,qRT-PCR检测心肌细胞miR-24、Bim mRNA表达。结果与低氧组相比,参元丹组、参元丹+miR-24 mimic组、参元丹+miR-24 inhibitor组均能显著降低细胞培养基上清液LDH、CPK活性(P<0.05),提高心肌细胞存活率(P<0.05),降低心肌细胞凋亡(P<0.05),升高心肌细胞miR-24 mRNA表达(P<0.05),降低Bim mRNA表达(P<0.05);治疗组之间比较,参元丹+miR-24 mimic组作用更显著(P<0.05)。结论益气逐瘀方参元丹能够减轻缺氧诱导乳鼠心肌细胞损伤及细胞凋亡,其作用机制可能与其上调miR-24表达,同时抑制其靶基因Bim mRNA表达有关。     

滋阴活血汤治疗早期糖尿病肾病临床研究

目的:观察滋阴活血汤治疗早期糖尿病肾病的临床疗效。方法:选取130例早期糖尿病肾病患者,随机分为对照组和观察组,各65例。对照组给予降糖等西医对症治疗,观察组在对照组基础上给予滋阴活血汤,两组疗程均为4周。观察两组治疗前后血液流变学变化,采用全自动生化分析仪进行检测;核因子(nuclear factor,NF)-κB变化,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定;24小时尿蛋白变化,采用放射免疫法测定;两组治疗前后症状总积分变化。结果:治疗后,观察组治疗后全血黏度、红细胞压积比、纤维蛋白原水平均明显低于对照组(P0.05);观察组治疗后NF-κB及24小时尿蛋白水平均低于对照组(P0.05);观察组治疗后症状总积分明显低于对照组(P0.01);对照组有效率为81.5%,观察组为93.8%,组间比较,差异有统计学意义(χ~2=4.561,P0.05)。两组治疗中未见严重不良反应。结论:滋阴活血汤治疗早期糖尿病肾病疗效确切,安全;能有效改善患者血液流变学,降低NF-κB及24小时尿蛋白水平。     

地黄叶总苷胶囊联合低剂量雷公藤多苷治疗肾移植术后蛋白尿疗效观察

目的观察地黄叶总苷胶囊联合低剂量雷公藤多苷治疗肾移植术后蛋白尿的疗效。方法将55例接受肾移植并于术后出现蛋白尿患者随机分为2组,对照组27例常规应用免疫抑制剂治疗,并给予雷公藤多甙片0. 5 mg/(kg·d)口服,3次/d,连续服用8周;观察组28例在对照组治疗方案基础上加服地黄叶总苷胶囊,0. 4 g(2粒)/次,2次/d,连续服用8周。观察2组治疗效果、药物不良反应,并随访治疗12周后的尿常规、肝功能、肾功能、24 h尿蛋白定量。结果观察组的治疗总有效率明显高于对照组(P 0. 05),2组药物不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0. 05); 2组治疗12周后的24 h尿蛋白定量均较治疗前显著降低(P均0. 05),且观察组明显低于对照组(P 0. 05),但2组尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平与治疗前比较差异均无统计学意义(P均 0. 05)。结论地黄叶总苷胶囊联合低剂量雷公藤多苷治疗肾移植术后蛋白尿的疗效要明显优于单用雷公藤多苷治疗,且用药不良反应未显著增加,安全性高,两药联合可以作为肾移植术后蛋白尿的治疗方案之一。     

胆固醇24S-羟化酶基因rs754203多态性与阿尔茨海默病发病风险的Meta分析

目的系统评价胆固醇24S-羟化酶(CYP46A1)基因rs754203多态性与阿尔茨海默病(AD)发病风险的关联强度。方法计算机检索PubMed、中国知网、万方数据库及维普数据库,检索时限从建库至2017年12月。搜集CYP46A1基因rs754203多态性与AD发病风险相关性的病例对照研究(RCT)。应用STATA11.0进行数据分析,应用比值比(OR)及其95%可信区间(CI)表示其关联强度。结果共纳入26组研究数据,累计病例组4 956例,对照组4 994例。Meta分析结果显示:去除4个对照组基因型不符合Hardy-Weinberg平衡后,等位基因模型、显性模型、隐性模型的合并OR值及95%CI分别是0.984(0.886～1.092)、0.947(0.820～1.094)、1.125(0.963～1.315),差异无统计学意义。按人群种族进行亚组分析后结果亦无明显改变。结论尚不能认为CYP46A1基因rs754203多态性与AD发病风险有关联。