CT-1对脐血间充质干细胞神经分化作用

目的探讨心肌营养素1(CT-1)在诱导脐血间充质干细胞(hUCB-MSCs)向神经细胞分化中的作用。方法培养hUCB-MSCs,流式细胞术检测表面标志物CD34、CD29、CD44及CD105;将携带CT-1的腺病毒(Adv-CT-1)感染hUCB-MSCs,在不同时间点用免疫荧光染色检测CT-1表达率,摸索最佳感染复数(MOI);将细胞分为4组:(1)对照组;(2)神经诱导剂组(NIM);(3) CT-1组(Adv-EGFP-CT-1+NIM);(4)空病毒组(Adv-EGFP+NIM)。于6 h和4 d检测各组神经相关蛋白标志物(nestin、NeuN、GFAP)表达。结果 hUCB-MSCs高表达CD29、CD44、CD105,不表达CD34; MOI最佳转染复数为100PFU/细胞。诱导后6 h,CT-1组呈现类神经细胞样形态改变,Nestin阳性率最高(86. 82%±4. 29%),与其他3组相比,差异有统计学意义(P <0. 05);至4 d时,各组Nestin表达明显减少;诱导后6 h,CT-1组NeuN、GFAP均有少量表达(14. 26%±2. 20%、16. 96%±4. 41%),随后逐渐升高,4 d时阳性率分别达(48. 33%±2. 53%)、(65. 83%±5. 17%); CT-1组阳性率均高于其他各组(P <0. 05)。结论CT-1可促进hUCB-MSCs向神经细胞分化。     

TLR9在不同胎龄新生儿脐血中的表达变化

目的 通过观察早产儿不同胎龄Toll样受体9（TLR9）的表达，探讨早产儿免疫功能低下的机制。方法 采集2010年7月至2014年6月在上海市嘉定区妇幼保健院产科出生的活产新生儿的脐血229份，按胎龄分为4组，28~31周组，31~34周组，34~37周组，≥37周组，采用流式细胞术和实时荧光定量PCR方法，分别检测其TLR9的蛋白和mRNA表达情况，了解其与胎龄之间的关系，并分析mRNA和蛋白表达间的相关性。结果 TLR9阳性细胞率在28~31周组，31~34周组，34~37周组，≥37周组分别为（15.93±6.23）%，（11.63±6.70）%，（13.66±6.88）%，（20.51±12.06）%；其在胎龄28~31周较高，至31~34周逐渐下降至最低，两组差异有统计学意义（P<0.05）；34~37周后TLR9阳性细胞率表达逐渐升高，至≥37周达最高，两胎龄组比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。31~37周间新生儿脐血TLR9阳性细胞率与胎龄呈正相关（r=0.273，P=0.006）。TLR9 mRNA表达在28~31周组，31~34周组，34~37周组，≥37周组分别为（4.95±3.44）%，（8.89±8.49）%，（13.91±10.92）%，（7.19±7.11）%；其在28~36周逐渐升高，与胎龄呈正相关（r=0.355，P< 0.001）。≥37周TLR9 mRNA表达量下降，该值虽高于28~31周，但差异无统计学意义（P>0.05）。相关性分析表明，同胎龄时期同样本新生儿的TLR9 mRNA和TLR9阳性细胞率之间存在负相关（r=-0.227，P=0.011）。结论 TLR9阳性细胞率和TLR9 mRNA表达在不同胎龄组新生儿间有差异，TLR9阳性细胞率表达在31~37周间随着胎龄的增加而增加，TLR9 mRNA在28~36周间随着胎龄的增加而增加。     

胎儿脐血流检测在产科中的临床应用

胎儿脐血流检测仪集超声多普勒技术、计算机技术、频谱分析技术于一体，能无创检测胎儿脐动脉血流速度谱，从而给出一组描述脐动脉血流的动力学状态的客观指标，为判别胎儿发育是否正常提供依据，为产科早期胎儿监护提供了新的手段。它的应用已明显减少了新生儿窒息和围产儿的死亡率。该文就近年来胎儿脐血流检测在产科中的临床应用作一综述。     

脐血移植治疗37例儿童恶性血液病的临床研究-单中心经验

目的 探讨脐血造血干细胞移植（UCBT）治疗儿童恶性血液病的疗效。方法 回顾性分析接受UCBT 的37 例恶性血液病患儿的临床资料，包括急性淋巴细胞性白血病14 例，急性髓细胞性白血病9 例，幼年粒单细胞白血病5 例，慢性粒细胞白血病和骨髓增生异常综合征各3 例，急性混合型白血病2 例，淋巴肉瘤性白血病1 例。其中34 例非血缘相关，3 例血缘相关。HLA 配型6/6 相合5 例，5/6 相合12 例，4/6 相合11 例，3/6 相合9 例。移植中位年龄5.7 岁，中位体重20 kg。结果 中性粒细胞和血小板植入中位天数分别是12 d 和25 d，植入率分别为95% 和78%。中性粒细胞植入率与CD34+ 细胞数呈正相关（P=0.011）。血小板植入率与CD34+ 细胞数和有核细胞数均有关（分别P=0.001、0.014）。急性移植物抗宿主病（GVHD）的发生率为49%，慢性GVHD 为11%。随访中位时间54 个月，5 年移植相关病死率、总生存率和无病生存率分别为27%、57%和41%。结论 脐血移植是快速获得的造血干细胞来源之一，为恶性疾病患儿争取了治疗时间。     

缺氧缺血性脑病新生儿脂联素、胰岛素样生长因子-1的变化

目的探讨缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、脂联素(APN)水平的变化。方法选择足月HIE新生儿52例(重度HIE组15例,中度HIE组20例,轻度HIE组17例),测定脐血及生后3~5 d(HIE急性期)、10~14 d(HIE恢复期)的血清IGF-1、APN水平;另选同期出生的20例足月健康新生儿作为对照组。结果轻、中、重度HIE组及对照组四组间脐血及生后3~5 d时APN、IGF-1水平的差异有统计学意义(P均0.01),均随HIE程度加重而下降,两两比较差异有统计学意义(P均0.05);HIE恢复期新生儿APN、IGF-1水平显著增加,但APN水平中度HIE组和重度HIE组仍低于对照组,差异有统计学意义(P均0.05);重度HIE组IGF-1仍低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);HIE患儿脐血、急性期血清IGF-1、APN水平呈显著正相关(r=0.53、0.61,P均0.01)。结论 HIE患儿血清IGF-1、APN水平降低与HIE的病理生理过程密切相关,可作为病情程度的判断指标之一,对临床诊断及预后的判断具有指导意义。     

反相酶联免疫斑点法检测脐血B细胞免疫球蛋白分泌细胞的数量

以羊抗人ＩｇＧ－Ｆ（ａｂ’２）抗体作固相色免疫吸附剂，以硝酸纤维素膜为载体，借助于ＨＲＰ－亲和素建立了检测分泌免疫球蛋白分的细胞数的反相酶联免疫斑点法     

脐血造血干/祖细胞体外扩增及移植动物模型分析

目的　探讨脐血造血干 /祖细胞体外扩增和体内重建造血的潜能。方法　利用造血干 /祖细胞培养、体外扩增、移植动物模型等技术 ,研究不同比密ficoll分离液分离的脐血造血干 /祖细胞的造血活性。结果　比密 1.0 6 4 g/ml分离液分离的 10 5个脐血MNC中 ,CFU GM集落数为 373± 2 89,BFU E为 12 1± 70。在G3(GM CSF和IL 3融合蛋白 )、IL 6、TPO(thrombopoietin)作用下 ,1.0 6 4 g/ml分离液分离的脐血造血干 /祖细胞在体外扩增 14d ,CFU GM扩增 5 2 .2倍。给经 8.5Gy致死剂量照射的小鼠输注 1.0 6 4 g/ml分离液分离的脐血造血干 /祖细胞 ,体内产生的脾结节 (CFU S)是输注 1.0 77g/ml分离液分离细胞的 2 .2倍。结论　比密 1.0 6 4 g/ml分离液分离的脐血造血干 /祖细胞 ,在体外具有较高的增殖、持续造血的能力及较强的体内造血重建潜能     

脐动静脉血清中G-CSF、GM-CSF含量差异的探讨

一般认为 ,脐血中不但含有大量的造血干细胞 ,也含有丰富的造血细胞因子 ,我们分别从脐动脉、静脉中取血 ,测定两者中粒细胞集落刺激因子 (Ｇ ＣＳＦ)、粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (ＧＭ ＣＳＦ)含量的差异 ,以间接推测胎盘在脐血造血细胞生长因子产生中的作用。1　材料和方法1 1　脐血来源和制备　脐血标本来源于我院产科妊娠36 7ｗ～ 39 7ｗ ,年龄 (2 3～ 31) ｙ　健康产妇顺产分娩的胎儿 ,胎儿娩出断脐后 ,在胎盘未娩出前用无菌干躁注射器于胎盘端脐动静脉各采血 5ｍｌ,4℃冰箱保存 ,2 4ｈ内 ,用普通离心机 30 0 0ｒ/ｍｉｎ ,离心 15…