lncRNA CYTOR靶向调控miR-503/CCNE1信号轴促进上皮性卵巢癌细胞增殖北大核心

目的:探讨细胞骨架调节剂(lncRNA cytoskeleton regulator,CYTOR)是否通过靶向调控miR-503来促进细胞周期蛋白E1(cyclin E1,CCNE1)影响上皮性卵巢癌增殖。方法:实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测CYTOR在不同临床分期、病理分级和有无淋巴结转移患者人上皮性卵巢癌组织、癌旁组织和正常组织以及不同卵巢癌细胞中的表达;starBase数据库(网址:http://starbase.sysu.edu.cn/)预测分析CYTOR和miR-503以及miR-503与CCNE1之间的关系,同时荧光素酶实验进行验证;RT-qPCR和免疫荧光分别检测miR-503与CCNE1在人上皮性卵巢癌组织、癌旁组织和正常组织以及不同卵巢癌细胞中的表达;RNA转染技术在A2780中细胞分别沉默CYTOR、过表达miR-503和沉默CCNE1表达,CCK-8检测各组细胞增殖能力变化;RT-qPCR和免疫荧光检测沉默CYTOR后miR-503和CCNE1的表达以及过表达miR-503后CCNE1的表达。结果:CYTOR和CCNE1在上皮性卵巢癌组织中表达增加,同时在临床分期III-IV期、病理分级G_(3)级、淋巴结转移阳性患者肿瘤组织中表达同样显著增加且导致卵巢癌患者术后预后较差;通过数据库分析CYTOR可直接靶向抑制miR-503,而miR-503可直接靶向抑制CCNE1表达,双荧光素酶实验结果与之相同;CYTOR和CCNE1促进上皮性卵巢癌增殖,而miR-503抑制上皮性卵巢癌增殖作用。结论:lncRNA CYTOR通过调控miR-503/CCNE1轴促进上皮性卵巢癌的增殖。     

lncRNA PITPNA-AS1靶向miR-92a-3p/TCF21对卵巢癌OVCAR-3细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA PITPNA-AS1在卵巢癌中的作用及其可能的分子机制。方法 采用荧光实时定量聚合酶链式反应(qPCR)技术检测卵巢癌组织和对应的癌旁组织、卵巢癌细胞系和正常卵巢上皮细胞系中PITPNA-AS1的表达水平。将PITPNA-AS1表达最少的细胞系分为对照组和实验组，分别转染阴性对照质粒或PITPNA-AS1质粒。细胞计数实验(CCK-8)法和Transwell法检测细胞的增殖活性和侵袭能力。生物信息学方法预测和双荧光素酶活性报告基因实验验证PITPNA-AS1作用的分子机制。qPCR和Western blot检测PITPNA-AS1相互作用的基因表达。结果 PITPNA-AS1在卵巢癌组织中表达低于癌旁组织(P<0.01)。PITPNA-AS1在卵巢癌细胞系中的表达水平均低于正常卵巢上皮细胞(P<0.05),OVCAR-3细胞表达最少(P<0.01)。与对照组比较，过表达PITPNA-AS1能抑制OVCAR-3细胞的增殖活力(P<0.05)和侵袭能力(P<0.01)。PITPNA-AS1与miR-92a-3p存在靶向关系(P<...     

OXT通过miR-196b-3p/ASPP2信号通路调节卵巢癌细胞生长

目的探讨催产素(oxytocin,OXT)对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法人卵巢癌细胞系SKOV3和A2780细胞来源于美国模式培养物保藏所(ATCC)。OXT和OXT受体(oxytocin receptor,OXTR)拮抗剂Atosiban刺激卵巢癌细胞,改变细胞中miR-196b-3p的水平,使用MTT法、ELISA试验、Western blot、生物信息学工具及荧光素酶报告基因实验等研究以上处理对卵巢癌细胞增殖与凋亡的作用和机制。结果 OXT刺激SKOV3细胞OXTR激活(F=28.842,P<0.05),增殖活性降低(F=12.988,P<0.05),Caspase3活性增加(F=26.676,P<0.05);Ki67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及p53凋亡刺激蛋白抑制剂(inhibitor of apoptosis-stimulating of p53 protein,iASPP)表达下调,p53凋亡刺激蛋白(apoptosis-stimulating of p53 protein,ASPP)1(ASPP1)及2(ASPP2)表达上调;但Atosiban部分逆转OXT的效果。OXT刺激卵巢癌细胞miR-196b-3p水平减少(A2780:F=76.406,P<0.05;SKOV3:F=45.874,P<0.05)。miR-196b-3p-mimic转染联合OXT刺激,导致细胞增殖活性增加(F=9.232,P<0.05),Caspase3活性降低(F=36.350,P<0.05),同时ASPP2表达降低(F=83.013,P<0.05)。而miR-196b-3p-inhibitor转染联合OXT刺激,ASPP2表达增加(F=83.013,P<0.05)。生物信息学工具预测联合荧光素酶报告基因实验确认ASPP2是miR-196b-3p的靶基因。结论 OXT介导的OXTR激活通过调节miR-196b-3p/ASPP2信号通路调节卵巢癌细胞生长。     

“阳化气，阴成形”：卵巢癌的中医证治

卵巢癌属于妇科恶性肿瘤之一,其发病率逐年上升趋势,属中医的"癥瘕"范畴。秉承《素问》"阳化气,阴成形"之旨来探讨卵巢癌的病机及治疗,认为"阳化气"不足,"阴成形"太过为卵巢癌发病的一个重要原因,并由此提出温补阳气的卵巢癌治疗原则,指出该原则应贯穿整个卵巢癌治疗的始终。     

母系表达基因3对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响机制研究

目的探究长链非编码RNA母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)对卵巢癌细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达和侵袭、迁移能力的影响。方法荧光定量聚合酶链反应检测卵巢上皮细胞和卵巢癌细胞MEG3表达情况。通过慢病毒转染携带MEG3全长序列的载体和空白载体于SKOV3人卵巢癌细胞中,分别作为实验组细胞和对照组细胞,通过Transwell侵袭实验检测两组细胞的侵袭能力,通过Transwell迁移实验检测两组细胞的迁移能力,通过蛋白质印迹法检测两组细胞MMP-2和MMP-9的表达情况。结果人卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3和A2780中MEG3的表达显著低于人卵巢上皮细胞IOSE80(均P<0.05)。通过慢病毒转染外源性上调SKOV3细胞MEG3的表达,实验组细胞MEG3表达显著高于对照组(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示实验组穿过基质胶的细胞数显著少于对照组(P<0.05);Transwell迁移实验结果显示实验组迁入下室的细胞数显著少于对照组(P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示实验组细胞MMP-2和MMP-9表达水平均显著低于对照组(均P<0.05)。结论 MEG3低表达于人卵巢癌细胞系,并可下调MMP-2和MMP-9的表达,抑制卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。     

免疫治疗在卵巢癌中的应用研究进展

卵巢癌的临床早期症状不明显，筛查手段有限，就诊时常处于晚期阶段，5年生存率仅30%~45%，严重威胁着女性健康。免疫治疗尤其是免疫检查点抑制剂治疗因其持久的抗肿瘤效应已被批准用于晚期或复发性的多种类型癌症的治疗。目前免疫治疗的一些研究进展为卵巢癌患者的临床管理提供了新的机遇与挑战。