瘦素对哮喘大鼠肺组织氧化应激及细胞凋亡的影响北大核心CSCD

目的:探究瘦素对哮喘大鼠肺组织氧化应激及细胞凋亡的影响。方法:将50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、瘦素组(10μg/kg)、瘦素拮抗剂组(3μg/kg)和阳性对照组(布地奈德,1 mg/只),10只/组。除正常对照组外,其余各组大鼠均采用卵清蛋白(OVA)致敏并用雾化吸入法诱导建立大鼠支气管哮喘模型;各组大鼠从第1次哮喘激发开始(造模后第4周),每次致敏前1 h给予相应药物,各组均4周,1次/2 d。各组大鼠于末次给药后,取支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测BALF中炎症因子IL-6、TNF-α含量;动物肺功能测定仪测定大鼠吸气阻力(Ri)、呼气阻力(Re)、肺通气顺应性(Cldyn)变化;取大鼠支气管肺组织,HE染色观察组织病理损伤情况;TUNEL染色检测肺组织细胞凋亡情况;试剂盒检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;Western blot检测肺组织中Kelch样环氧氯丙烷样相关蛋白1(Keap1)、核转录因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶(HMOX-1)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)相对表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠呼吸急促,肺组织可见支气管壁炎症细胞浸润、杯状细胞增生、管腔变窄等病理损伤,Ri、Re、BALF中IL-6及TNF-α含量、肺组织MDA含量、凋亡细胞比例均升高(P<0.05),Cldyn、肺组织SOD活性、Keap1、Nrf2、HMOX-1及Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组相比,瘦素组大鼠呼吸加快,节律不齐程度增加,肺组织病理损伤更重,Ri、Re、BALF中IL-6及TNF-α含量、肺组织MDA含量、凋亡细胞比例均升高(P<0.05),Cldyn、肺组织SOD活性、Keap1、Nrf2、HMOX-1及Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。与瘦素组相比,瘦素拮抗剂组及阳性药物组大鼠呼吸急促程度及肺组织损伤均明显缓解,Ri、Re、BALF中IL-6及TNF-α含量、肺组织MDA含量、凋亡细胞比例均降低(P<0.05),Cldyn、肺组织SOD活性、Keap1、Nrf2、HMOX-1及Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。瘦素拮抗剂组与阳性药物组相比,上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:瘦素可抑制Nrf2-Keap1通路激活,降低机体抗氧化应激和抗凋亡作用,进而加重哮喘进程。     

异牡荆素对非小细胞性肺癌细胞自我更新和凋亡的影响

目的研究异牡荆素(ISO)对非小细胞性肺癌(NSCLC)细胞的影响和潜在的机制。方法将A549和H1650细胞分别分为空白组、低剂量实验组(4μmol·L^-1 ISO)和高剂量实验组(16μmol·L^-1 ISO)。用噻唑蓝法检测NSCLC细胞活性,用肿瘤球形成实验检测NSCLC细胞的细胞球形成率,用Western blot法检测NSCLC细胞凋亡、自我更新、无翅型MMTV整合位点家族/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路相关蛋白的表达水平。结果与空白组比较,低、高剂量实验组中A549和H1650细胞在24,48和72 h的细胞活性均显著降低。低、高剂量实验组和空白组中A549细胞的细胞球形成率分别为(4.18±0.45)%,(2.01±0.67)%和(6.02±0.57)%,切割的半胱氨酸蛋白酶-3相对表达量分别为0.24±0.08,1.25±0.13和0.06±0.07,SRY相关高迁移率族盒蛋白-2相对表达量分别为0.49±0.04,0.25±0.03和1.00±0.09,Kruppel样因子4相对表达量分别为0.68±0.04,0.44±0.03和1.01±0.06,Wnt1相对表达量分别为0.63±0.06,0.28±0.04和1.00±0.06,β-catenin相对表达量分别为0.41±0.05,0.22±0.03和1.01±0.09;与空白组比较,低、高剂量实验组中A549细胞的上述指标的差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。上述3组中H1650细胞的上述指标也呈现一致的现象。结论ISO可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路来抑制NSCLC细胞活性和自我更新,并促进其凋亡。     

没食子酸对小鼠骨髓细胞的辐射防护作用

目的探讨没食子酸(gallic acid, GA)对小鼠骨髓细胞的辐射防护作用。方法将健康雄性ICR小鼠随机分为生理盐水对照组、GA对照组、4个X线照射组和4个GA保护组,每组10只。X线照射组和生理盐水对照组给予0.01 mL/g生理盐水灌胃,GA对照组和GA保护组给予200 mg/kg的GA(20 mg/mL)灌胃14 d,第15 d给予4个X线照射组和4个GA保护组小鼠全身一次性X线照射,吸收剂量分别为1.0、2.0、3.0和4.0 Gy,生理盐水对照组和GA对照组不给予照射。照射后检测全血过氧化氢酶(catalase, CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)和骨髓嗜多染红细胞微核(micronucleus frequency of polychromatic erythrocyte, MN-PCE)率,并用流式细胞仪检测骨髓细胞周期、早期凋亡率和晚期凋亡率。结果 1.0、2.0、3.0和4.0 Gy GA保护组小鼠血清中CAT活性分别为2.13、1.74、1.49和1.15 U/mL,与...     

环状RNA Lrp6调控过氧化氢诱导的H9c2心肌细胞凋亡

目的：探究环状RNA Lrp6(circLrp6)对过氧化氢(H₂O₂)诱导的H9c2心肌细胞凋亡的影响。方法：通过Sanger测序和RNase R酶切验证circLrp6的环状结构；细胞荧光原位杂交分析circLrp6的亚细胞定位；通过RT-qPCR检测H₂O₂处理的H9c2细胞和缺血再灌注损伤的小鼠心脏组织中circLrp6的差异表达水平；采用TUNEL染色检测circLrp6是否影响H₂O₂诱导的心肌细胞凋亡水平；通过生物信息学的方法预测与circLrp6相互结合的下游靶点及其结合位点。结果：circLrp6具有环状结构，定位于细胞核，它在H₂O₂处理后的H9c2心肌细胞和缺血再灌注的心脏组织中表达水平下调(P<0.05)，过表达circLrp6对H₂O₂处理的心肌细胞具有保护作用，表现为TUNEL染色阳性率下降(P<0.05)。另外，circLrp6...     

四氢嘧啶对人皮肤成纤维细胞衰老的影响

目的 探究四氢嘧啶(ectoine)对人皮肤成纤维细胞(HSFs)是否具有减缓衰老的功效及其具体机制。方法 采用不同浓度四氢嘧啶作用于HSFs 24 h, MTT法检测细胞活性，β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察细胞衰老情况，流式细胞术检测细胞调亡和活性氧(ROS)的水平，qPCR检测p16、p21、p53 mRNA的表达水平。结果 MTT结果显示，与对照组相比，各四氢嘧啶处理组对细胞无毒性作用，随着四氢嘧啶浓度增加，HSFs细胞凋亡率、ROS水平以及p16、p21、p53 mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论 四氢嘧啶可通过降低细胞凋亡率、抑制ROS活性和减少p16、p21、p53 mRNA的表达来减缓HSFs衰老，这将为今后开发以四氢嘧啶作为主要成分针对HSFs的抗衰老产品提供一定的理论依据。     

舒芬太尼通过AWPPH对宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响

目的探讨舒芬太尼对宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响机制。方法采用MTT法、流式细胞仪、Transwell小室检测不同浓度(0.01、0.02、0.04μg/ml)的舒芬太尼对宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力的影响。采用qRT-PCR检测不同浓度的舒芬太尼对宫颈癌细胞中长链非编码(LncRNA)AWPPH表达水平的影响。利用宫颈癌SiHa细胞为研究对象,实验分组:si-NC组、si-AWPPH组、舒芬太尼0.04+pcDNA3.1组、舒芬太尼0.04+pcDNA3.1-AWPPH组。检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力的变化。结果与con组比较,不同浓度的舒芬太尼作用于SiHa细胞后,SiHa细胞增殖抑制率和凋亡率升高,迁移和侵袭数减少,AWPPH表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-NC组比较,si-AWPPH组SiHa细胞增殖抑制率和凋亡率均升高,迁移及侵袭数均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);AWPPH过表达可明显逆转舒芬太尼对SiHa细胞的作用。结论舒芬太尼可能通过下调AWPPH抑制宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭,诱导细胞凋亡。     

雷公藤柱层析中段和末段组分的急性毒性实验

目的:比较雷公藤柱层析中段和末段组分对小鼠急性毒性和大鼠急性肝损伤的影响,评价中段和末段组分的毒性强弱和毒性物质基础,初步探讨中段和末段组分中成分与毒性的关系。方法:HPLC法测定中段和末段组分中6个有效成分(毒性成分)的含量。采用经典的急性毒性实验方法,Bliss法计算半数致死量(LD_(50))。SD大鼠单次灌胃中段和末段组分,观察急性肝损伤情况。给药后48 h眼眶采血,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活力,肝脏HE染色,光镜下观察肝组织形态学改变,原位末端转移酶标记技术(TUNEL染色法)检测中段和末段组分对肝细胞凋亡的影响。结果:中段和末段组分中所测成分的含量差异较大,LD_(50)分别为297.551、558.578 mg·kg~(-1)。大鼠灌胃后造成不同程度的急性肝损伤,与正常对照组比较,中段组分的高、低剂量组和末段组分的高剂量组均能明显升高大鼠血清中AST和ALT活性(P0.01),明显诱导大鼠肝细胞凋亡(P0.01)。结论:雷公藤柱层析中段组分毒性强于末段组分,毒性物质基础以二萜、生物碱类为主,毒性主要表现为急性肝损伤,毒性成分与毒性存在量效关系。     

OXT通过miR-196b-3p/ASPP2信号通路调节卵巢癌细胞生长

目的探讨催产素(oxytocin,OXT)对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法人卵巢癌细胞系SKOV3和A2780细胞来源于美国模式培养物保藏所(ATCC)。OXT和OXT受体(oxytocin receptor,OXTR)拮抗剂Atosiban刺激卵巢癌细胞,改变细胞中miR-196b-3p的水平,使用MTT法、ELISA试验、Western blot、生物信息学工具及荧光素酶报告基因实验等研究以上处理对卵巢癌细胞增殖与凋亡的作用和机制。结果 OXT刺激SKOV3细胞OXTR激活(F=28.842,P<0.05),增殖活性降低(F=12.988,P<0.05),Caspase3活性增加(F=26.676,P<0.05);Ki67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及p53凋亡刺激蛋白抑制剂(inhibitor of apoptosis-stimulating of p53 protein,iASPP)表达下调,p53凋亡刺激蛋白(apoptosis-stimulating of p53 protein,ASPP)1(ASPP1)及2(ASPP2)表达上调;但Atosiban部分逆转OXT的效果。OXT刺激卵巢癌细胞miR-196b-3p水平减少(A2780:F=76.406,P<0.05;SKOV3:F=45.874,P<0.05)。miR-196b-3p-mimic转染联合OXT刺激,导致细胞增殖活性增加(F=9.232,P<0.05),Caspase3活性降低(F=36.350,P<0.05),同时ASPP2表达降低(F=83.013,P<0.05)。而miR-196b-3p-inhibitor转染联合OXT刺激,ASPP2表达增加(F=83.013,P<0.05)。生物信息学工具预测联合荧光素酶报告基因实验确认ASPP2是miR-196b-3p的靶基因。结论 OXT介导的OXTR激活通过调节miR-196b-3p/ASPP2信号通路调节卵巢癌细胞生长。