妊娠期糖尿病患者胎盘中PPARγ的表达和作用的研究进展

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)是一组多基因遗传所致的异质性疾病,其发病机制涉及到糖代谢机制的每一个环节.过氧化物酶体增殖物激活受体γ(per-oxisome proliferater activated receptorγ,PPARγ)是生物体重要的代谢转录因子和脂肪生成的关键因子,在糖脂代谢中发挥着重要的调控作用,其激动剂(噻唑烷二酮类药物)广泛应用于糖尿病的治疗,但目前关于PPARγ在GDM中的研究尚少.本文将对PPARγ在GDM患者的胎盘中的表达和作用进行全面的综述,并简要提及近来的一些有关GDM患者其他组织细胞中PPARγ的表达和作用的研究,以期为PPARγ作为治疗GDM的潜在靶点的临床研究奠定理论基础.     

巨噬细胞移动抑制因子抑制剂对妊娠晚期大鼠急性坏死性胰腺炎胰腺及胎盘损伤的保护作用及量效关系

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)抑制剂ISO-1腹腔注射给药对妊娠晚期大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠胰腺和胎盘的保护作用及其量效关系.方法 SPF级妊娠晚期SD大鼠30只,随机(随机数字法)分为5组(n=6):假手术组(SO组)、ANP组、ISO-1预处理低剂量组(1.75 mg/kg,T1组)、中剂量组(3.5 mg/kg,T2组)和高剂量组(7.0 mg/kg,T3组).胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠制备ANP模型.预处理组于造模前30 min经腹腔按低、中、高剂量注射溶解IOS-1的10％DMSO(2 mL/kg)溶液,SO组、ANP组于造模前30 min经腹腔注射10％ DMSO(2 ml/kg),术后6 h处死大鼠.测定大鼠血清中AMY、LIP、ALT及AST水平,光镜下观察大鼠胰腺、胎盘的组织病理变化.多个样本均数比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验.结果 ANP组AMY、LIP、ALT和AST的水平(U/L)分别为(7 101.4±1 032.3)、(2 939.0±638.8)、(240.3±50.3)和(472.6 ±27.5),高于SO组的(2 268.7±293.8)、(681.1±109.9)、(56.4±15.3)和(110.9±15.5),差异具有统计学意义(P＜0.05);T1组AMY、LIP、ALT、AST的水平(U/L)为(4 349.5±439.5)、(1 968.9±515.2)、(155.0±41.8)和(373.7 ±64.9),低于ANP组,差异具有统计学意义(P＜0.05);T2组AMY、LIP、ALT、AST的水平(U/L)为(3 459.7±459.2)、(1 268.6±367.8)、(110.5±20.6)和(281.8±66.8),低于T1组,差异具有统计学意义(P＜0.05);T3组AMY、LIP、ALT、AST的水平(U/L)为(3 288.4±583.7)、(1198.1 ±328.5)、(100.6±13.2)和(272.9±66.5),同T2组比较差异无统计学意义(P＞0.05).ANP组胰腺、胎盘的病理评分分别为(12.3±1.5)分和(6.3±0.8)分,高于SO组(4.7±1.2)分和(0.5±0.5)分,差异具有统计学意义(P＜0.05);T1组胰腺、胎盘病理评分为(10.5±1.6)分和(5.1±0.7)分,低于ANP组,差异具有统计学意义(P＜0.05);TT2组胰腺、胎盘病理评分为(8.3±1.0)分和(3.0±0.6)分,低于T1组,差异具有统计学意义(P＜0.05);T3组胰腺、胎盘病理评分为(8.0±1.4)分和(2.8±0.8)分,同T2组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 腹腔给予MIF抑制剂ISO-1对妊娠晚期大鼠A NP大鼠胰腺及胎盘具有保护作用,T2组(3.5 mg/kg)为改善妊娠晚期ANP大鼠胰腺及胎盘损伤安全、有效的最佳剂量.     

TNF-α、NF-κBp65、PAI-1在妊娠期糖尿病孕妇血清和胎盘组织中的表达及其意义

[目的]探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)、人核转录因子p65 (NF-κBp65)及纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)在妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)孕妇血清及胎盘组织中的表达及其临床意义.[方法]选取2014年2月至2015年5月在本院定期产检并且住院分娩的GDM孕妇47例作为观察组,另外选取同期分娩的正常孕妇47例为对照组,比较两组孕妇血清和胎盘组织中TNF-α、NF-κBp65和PAI-1的表达水平,并分析其临床意义.[结果]与对照组比较,观察组孕妇血清的TNF-α和PAI-1表达水平明显较高,差异具有统计学意义(P均＜0.001),但两组孕妇血清的NF-κBp65水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);观察组孕妇胎盘组织中的TNF-α、NF-κBp65和PAI-1的阳性率显著高于对照组,其差异均有统计学意义(P＜0.05).[结论]GDM孕妇胎盘组织中TNF-α、NF-κBp65和PAI-1水平明显升高,而血清中的TNF-α和PAI-1也明显较高,推测炎症因子TNF-α、NF-κBp65和PAI-1可能参与了GDM的发生与发展.     

IL-10、TNF-α及SOCS3在妊娠期肝内胆汁淤积症母胎界面的变化

目的 探讨白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及细胞因子信号转导抑制子3(SOCS3)在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)母胎界面的变化.方法 选取新疆医科大学第五附属医院2013年10月至2016年10月ICP孕妇43例作为观察组,选择同期产检的健康孕妇47例作为对照组.采用Envision免疫组化法测定两组孕妇胎盘组织中IL-10、TNF-α的表达水平,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和蛋白免疫印迹法(Western-blot)测定两组孕妇胎盘组织中SOCS3的表达水平.结果观察组IL-10的表达明显低于对照组,差异具有统计学意义(Z=-2.578,P<0.05),TNF-α的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(Z=-4.421,P<0.05);观察组的孕妇胎盘组织中SOCS3表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义(Z=-2.325,P<0.05);两组患者SOCS3的OD值比较差异有统计学意义(t=565.702,P<0.05).结论 ICP患者的母胎界面TNF-α表达增加,IL-10表达降低,胎盘组织中SOCS3参与了ICP的发病.     

胎盘血管梯度造影及三维重建在产科教学中的应用

目的 通过梯度造影和CT扫描后三维重建的方法为学生提供胎盘血管的直观展示,加强学生对正常妊娠和病理妊娠胎盘结构的理解,以期取得更好的教学效果.方法 将含有10％和50％非离子型碘造影剂的灌注液分别用美兰和伊红染色后,对脐静脉、脐动脉进行灌注,完成后对胎盘进行CT扫描、三维重建.结果 结合胎盘灌注的大体图像,将胎盘血管树直观地展示给学生,同时结合三维模型展示双(多)胎妊娠胎盘血管吻合,帮助学生深入理解胎盘结构与病理妊娠的关系.结论 应用胎盘血管梯度造影及三维重建技术在产科教学中可以取得更好的教学效果.     

妊娠期高血压疾病胎盘组织中白血病抑制因子与基质金属蛋白酶-9表达水平与子痫前期病情的关系研究

目的 探讨妊娠期高血压疾病(HDCP)孕妇胎盘组织中白血病抑制因子(LIF)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平与子痫前期病情的关系.方法 选取2013年3月—2017年2月陕西省榆林市第二医院收治的HDCP子痫前期患者76例,按照疾病严重程度分为轻度子痫前期组与重度子痫前期组,每组38例,选取同期36例正常孕妇作为对照组,比较分析3组胎盘组织中LIF与MMP-9表达水平与子痫前期病情的关系.结果 轻度子痫前期组与重度子痫前期组LIF与MMP-9阳性表达率均低于对照组,且重度子痫前期组低于轻度子痫前期组,差异有统计学意义(P<0.05).重度子痫前期组LIF与MMP-9表达水平呈正相关(r=0.413,P=0.031).结论 正常孕妇与HDCP子痫前期患者的胎盘组织中均有LIF与MMP-9的表达,子痫前期患者LIF与MMP-9的表达水平明显下降,且与病情严重程度有关.     

人胎盘间充质干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞的研究

目的：探索人胎盘间充质干细胞（MSCs）分化为胰岛素分泌细胞的诱导条件。方法从胎盘组织中获取MSCs，采用激活素A、表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等多种细胞因子诱导胎盘MSCs向胰岛素分泌细胞分化。利用免疫细胞化学染色、Western Blot及动物实验，对诱导后的细胞进行鉴定。结果经诱导后的细胞具备胰岛β细胞的部分特征，能表达胰十二指肠同源盒-1（PDX-1）、胰岛素和C肽，对糖尿病小鼠具有降糖作用。结论人胎盘MSCs经多种细胞因子诱导后可分化为胰岛素分泌细胞。     

重度子痫前期PIBF的表达及其与免疫耐受失衡的关系

目的：探讨重度子痫前期胎盘及外周血孕酮诱导封闭因子（PIBF）表达情况及其与免疫耐受失衡的关系。方法选取2012年1月~12月期间早发型重度子痫前期（EOPE）25例，晚发型重度子痫前期（LOPE）22例，对照组25例，收集产前外周血与产后胎盘。用免疫组织化学（SABC法）检测胎盘PIBF的表达及定位，ELISA试剂盒检测血清PIBF水平，流式细胞仪检测外周血中Th1和Th2细胞百分率，计算Th1/Th2比值。结果胎盘PIBF表达于蜕膜组织、合体滋养层细胞和部分绒毛滋养层细胞。血清PIBF水平在EOPE组为213.58±44.93 ng/ml，LOPE组为243.00±61.19 ng/ml，对照组为273.91±48.57 ng/ml。三组间血清PIBF含量、Th1/Th2比值和胎盘PIBF-IOD值差异均有统计学意义（P<0.05）。EOPE组和对照组相比，血清PIBF降低、胎盘PIBF表达量（PIBF-IOD）减少、外周血Th1/Th2比值增高（P<0.05）。重度子痫前期孕妇血清PIBF与胎盘PIBF-IOD呈正相关关系，与外周血Th1/Th2呈负相关关系（P<0.05）。但只有EOPE组血清PIBF与24h尿蛋白定量呈负相关关系（P<0.05）。结论 PIBF介导的免疫耐受失衡可能参与重度子痫前期发病机制。PIBF是妊娠诱发淋巴细胞分泌的免疫调节抑制因子及重度子痫前期的保护因素，有望成为新的治疗靶点。     

低分子肝素及轴突导向因子-1对人胎盘微血管内皮细胞生物学功能的影响

目的 研究低分子肝素及轴突导向因子-1(Netrin-1)对人胎盘微血管内皮细胞(microvascular endothelial cells,MECs)生物学功能的影响.方法 选取正常早孕(8～10周)绒毛,通过Percoll梯度离心法提取人胎盘微血管内皮细胞进行原代培养,将细胞分为6组,其中5组培养液中加入不同浓度低分子肝素(low molecular weight heparin,LMWH)(终浓度为0.01 U/ml、0.1 U/ml、1U/ml、10 U/ml、100 U/ml),未加低分子肝素的作为对照组.通过实时荧光定量-PCR和Western-Blot分别检测不同组别Netrin-1基因mRNA及蛋白表达情况;CCK-8检测不同组别细胞增殖率的变化;筛选出细胞增殖率最高组别进行流式细胞检测凋亡水平及细胞周期的变化;利用Transwell细胞迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化.结果 培养24 h 0.1U/ml、1U/ml组Netrin-1 mRNA及蛋白表达高于对照组(P＜0.05);10 U/ml、100 U/ml组Netrin-1 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但蛋白表达低对照组(P＜0.05);培养48 h 0.1U/ml、1 U/ml、10 U/ml组Netrin-1 mRNA及蛋白表达均高于对照组;培养24 h 0.1 U/ml组MECs增值率高于对照组,100U/ml组细胞增值低于对照组;培养48 h 0.1U/ml、1U/ml、10 U/ml组细胞增值率高于对照组;0.1U/ml组培养24、48hS期细胞比例及细胞迁移数目高于对照组;0.1U/ml组培养24 h晚期细胞凋亡低于对照组(P＜0.05),各组细胞侵袭实验比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 适当浓度的低分子肝素可以促进人胎盘MECs的增殖,降低凋亡,迁移能力增高,这一变化可能与低分子肝素促进Netrin-1基因表达有关.     

长链脂肪酸氧化酶在妊娠中期子痫前期样母鼠和胎鼠组织中的表达

目的 探讨长链脂肪酸氧化酶LCHAD在妊娠中期子痫前期样改变母鼠和胎鼠组织中的蛋白表达及分布.方法 将C57BL/6J孕鼠于孕1id皮下注射一氧化氮合酶抑制剂建立子痫前期样模型,同时设立注射生理盐水的正常妊娠对照组,模型鉴定成功后,于孕14 d进行标本取材.采用免疫组化方法检测母鼠及胎鼠组织中LCHAD蛋白的分布和表达状况.结果 孕14 d实验组平均动脉压(115.6±3.3)mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)和尿蛋白(97.0±4.3)μg·g体质量-1·24h-1较对照组平均动脉压(96.2±4.9)mmHg和尿蛋白(60.8 ±4.9) μg·g体质量-1·24 h-1显著升高(P＜0.05).在两组动物中均可见到母鼠肝、肾、心、胎盘组织中LCHAD蛋白呈阳性表达,实验组母体肝、胎盘LCHAD的IA值强度较对照组明显降低(P＜0.05).胎鼠的肝、肾、心、肺和神经视网膜组织中,两组均有LCHAD表达,但IA值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠中期LCHAD蛋白在母鼠和胎鼠重要器官均广泛表达分布,在妊娠期LCHAD与母体能量代谢、胎盘的发育及胎儿生长发育有关;子痫前期样改变时母体肝脏和胎盘的LCHAD表达存在异常.