维甲酸诱导后CK13基因在鼻咽癌中的表达研究

目的探讨维甲酸(retinoic acids,RA)对鼻咽癌细胞株HNE1生长及表型的作用,同时观察维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1后细胞角蛋白基因13(cytokeratin 13,CK13)表达情况。方法应用细胞培养的方法观察维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1细胞的生长状况,利用Northern杂交技术分析维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1后CK13基因的表达。结果维甲酸能显著抑制鼻咽癌细胞的生长,抑制的强度取决于维甲酸的浓度和诱导持续时间,当维甲酸的浓度为1×10-4 M/L时,前4天下降约50％,第5天开始细胞停止增殖,细胞数逐渐减少,细胞逐渐老化死亡。维甲酸处理后的鼻咽癌细胞从典型的多边形变成扁平、细长,类似纤维细胞的形态。维甲酸诱导后的鼻咽癌细胞中CK13基因的表达明显上调,且与维甲酸的浓度有关。结论维甲酸能促进鼻咽癌细胞的分化,可能是通过上调CK13基因的表达而实现的。     

A cDNA located on chromosome 7q32 shows loss of expression in epithelial cell line of nasopharyngeal carcinoma

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鼻咽恶性淋巴瘤43例误诊分析

目的 分析鼻咽恶性淋巴瘤的误诊原因，探讨减少误诊的措施。方法对我院1990至2002年间住院治疗的120例鼻咽恶性淋巴瘤病人进行回顾性分析。结果120例鼻咽恶性淋巴瘤中有43例误诊，误诊率高达35.8％。结论鼻咽恶性淋巴瘤易发生临床误诊和病理误诊，全面掌握鼻咽恶性淋巴瘤的临床表现特点、重视鼻咽的检查和活检、注意影像学检查、结合实验室检查及免疫组化等是减少鼻咽恶性淋巴瘤误诊的有效措施。     

经鼻内镜鼻腔-鼻窦-翼腭窝-颞下窝手术入路的应用解剖学研究

目的通过对鼻腔-鼻窦-翼腭窝(pterygomaxillaryfossa,PMF)-颞下窝(infratemporalfossa,ITF)手术入路的相关结构进行解剖,为手术入路提供解剖学基础。方法对6例12侧成人尸头标本按中线锯开后进行解剖,并完全模拟该手术入路,对相关解剖标志进行了观察、拍摄和测量。结果翼腭窝-颞下窝区结构复杂,有重要的神经和血管经过。圆孔外口距正中矢状面距离为(19.18±1.48)mm,与后鼻孔上缘的距离为(19.81±1.52)mm,距鼻小柱根部为(77.31±5.13)mm。卵圆孔到鼻小柱根部为(86.40±3.76)mm。结论经鼻内镜鼻腔-鼻窦-翼腭窝-颞下窝手术入路能够简单和迅速地到达翼腭窝和颞下窝,可较好地显露翼腭窝及部分颞下窝区的结构。经鼻内镜入路进入PMF时术野的深度限制为70mm左右,注意保护位于蝶窦外侧壁的翼管神经、上颌神经及颈内动脉(internalcarotidartery,ICA),进入ITF时,术野的深度限制为80mm左右。     

3MA抑制自噬降低头颈鳞癌细胞放疗抵抗性的实验研究

目的探讨6-氨基-3-甲基嘌呤(3MA)对头颈鳞癌细胞放疗抵抗性的影响。方法蛋白印迹法（Western blotting）检测CNE2、6 10B及其放疗抵抗细胞CNE2 Rs、6 10BRs中LC3B蛋白的表达；3MA作用于CNE2 Rs及TU686细胞后LC3B蛋白的表达；克隆集落形成实验检测3MA对头颈鳞癌细胞的放疗抵抗能力及生存分数的改变；细胞免疫荧光法检测3MA对放疗致DNA双链损伤相关指标γ H2AX焦点数量的改变。结果LC3B蛋白在放疗抵抗细胞较亲本细胞中表达增加；3MA能有效抑制自噬膜蛋白LC3B的表达；3MA抑制自噬后CNE2 Rs及TU686细胞克隆集落形成能力减弱，生存分数降低；3MA抑制自噬后CNE2 Rs及TU686细胞放疗组中γ H2AX焦点数量较对照组显著增加。结论3MA抑制自噬后可能影响放疗后DNA双链损伤修复，进而降低头颈鳞癌细胞的放疗抵抗性。     

嗓音训练联合拳击动作治疗青春期假声的疗效观察

目的观察嗓音训练配合拳击动作治疗青春期假声的临床疗效。方法收集2016年1月—2019年6月在中南大学湘雅医院耳鼻咽喉头颈科就诊的青春期假声患者21例，均为男性患者，年龄16~35岁，病程1~20年。所有患者均表现为青春变声期或变声期后说话时音调偏高或用假声，杂音明显，偶有声嘶及破音，其中19例患者喉镜下表现为声带闭合欠佳。对患者采用嗓音训练联合拳击动作的矫治治疗，根据即时效果反馈，语训1~4次不等，每次1~2 h，以上过程均由专业语训师对患者进行指导及追踪。治疗前后采用动态喉镜及嗓音分析系统记录患者的喉镜下表现及嗓音声学参数，并进行对比分析，评估治疗效果。结果21例青春期假声患者发声基频（F0）较训练前均下降明显，其中18例患者基频恢复至成年男性正常水平，嗓音障碍指数(DSI)较前明显改善，最长发音时间(MPT)较前明显延长，差异具有统计学意义（P＜0.05）； 19例声带闭合不全的青春期假声患者经治疗后声带闭合良好。结论嗓音训练配合拳击动作治疗青春期假声效果显著，有一定的临床应用价值。     

AP1反应元件的确定及在细胞角蛋白13基因表达调控中的作用

目的 确定细胞角蛋白13（cytokeratin 13,CK13)基因5'旁侧－nt，199－－nt.192碱基CTGAATCA反应元件的类型及其在CK13基因表达调控中的作用。方法 采用报告基因分析的,构建CK13基因5'旁侧513bp全片段，－nt.207- nt.63与氯霉素乙酰转移酶报告基因增强子载体的重组体，并采用PCR定点诱变技术，构建与－nt.207 nt.63同样长短，但-nt.197和T、G分别定点诱变为A，T的氯霉素乙酰转移酶报告基因增强子载体的重组体，通过脂质体介导的转染技术导入HeLa细胞，检测各重组体报告基因的瞬间表达，确定CK13基因5'旁侧－nt.199--nt.192碱基CTGAATCA在CK13基因表达调控中的作用；并采用凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验验证CK13基因5'旁侧中CTGAATCA反应元件的类型。结果 凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验证实CK13基因5'旁侧中CTGAATCA反应元件的类型。结果 凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验证实CK13基因5'旁侧－nt.199--nt.192碱基CTGAATCA反应元件是AP1反应元件，它促进CK13基因的表达。结论 CK13基因5'旁侧起始密码上游－nt.199--nt.192的碱基CTGAATCA是AP1反应元件，而不是cAMP反应元件，它可增强CK13基因5'旁侧的转录活性。     

鼻咽癌组织库及其信息管理系统的建立

鼻咽癌好发于我国南方,是一种相对独特的肿瘤.研究显示,不同地区鼻咽癌的遗传和发病机制各不相同.要研究和探讨鼻咽癌的发病及遗传机制、筛选其早期诊断或预后相关的标志物、探寻其个体化治疗方案等,必须有充足的、合格的组织样本及其完整的临床资料;同时保护我国现存的、有限的疾病资源是每一个医务工作者的责任和义务[1-2].为此,我们收集并建立了规范化、标准化的鼻咽癌组织标本库及其信息管理系统.     

50例蝶窦病变的临床分析

目的探讨蝶窦病变的临床特点、治疗效果和误诊情况,以提高诊断率。方法将南华大学附属第二医院2001—2009年间收治的50例蝶窦病变进行分析总结。结果蝶窦病变以囊肿为最多见,其次为真菌、恶性肿瘤,恶性肿瘤主要为转移性鼻咽癌;临床表现有头痛(78%)、视力改变(50%)、颅神经麻痹(24%)、回吸性涕血或鼻出血(32%)。结论蝶窦病变应常规行鼻内镜检查,鼻内镜手术是治疗蝶窦病变的优选术式。     

MTDH促进头颈鳞癌细胞放疗抵抗的实验研究

目的探讨星形胶质细胞上调基因1（astrocyte elevated gene 1,AEG 1,又称MTDH）对头颈部鳞状细胞癌（简称头颈鳞癌）放疗抵抗的影响。方法Western blotting检测放射线照射后头颈鳞癌细胞MTDH蛋白表达的改变。通过脂质体转染的MTDH cDNA和慢病毒介导的MTDH shRNA,分别在不同头颈鳞癌细胞中过表达和抑制MTDH,平板集落形成实验检测头颈鳞癌细胞放疗抵抗能力的改变,细胞免疫荧光染色检测DNA双链损伤指标γH2AX的表达。结果MTDH在头颈鳞癌细胞中的表达随着放射性照射剂量的增加和时间的延长逐渐升高。在CNE 2细胞中过表达MTDH,其体外集落形成能力增强;相反,在Tu686细胞中抑制MTDH的表达,其体外集落形成能力减弱。同时,细胞免疫荧光显示Tu686细胞在MTDH抑制后,其DNA双链损伤指标γH2AX的表达增加,表明DNA双链损伤修复过程受阻。结论MTDH能促进头颈鳞癌细胞放疗抵抗的形成,与其对DNA双链损伤修复的调控作用相关。