人釉原蛋白编码区基因真核表达载体PsecTaq2A-AMG的构建

目的　构建人釉原蛋白(AMG)编码区基因真核表达载体PsecTaq2A-AMG。方法　采用PCR技术体外扩增AMG完整分泌肽编码区。将扩增产物与PsecTaq2A分别用BamHI和Xhol I行双酶切,将获取的AMG目的基因片段连接到双酶切后的PsecTaq2A,构建重组质粒PsecTaq2A-AMG,并对重组质粒进行鉴定。结果　①PCR扩增产物经1·5%琼脂糖凝胶电泳,可见大小约519 bp的特异性条带,与预期结果一致。②重组克隆PsecTaq2A-AMG酶谱分析与预期结果一致,序列测定结果与GenBank中的人釉原蛋白序列完全一致。结论　用此方法可成功构建AMG 编码区基因真核表达载体PsecTaq2A-AMG。     

白细胞介素-6基因-174G/C、-572 C/G多态性与慢性牙周炎的相关性

目的 研究白细胞介素-6(IL-6)基因-174G/C、-572C/G多态性与慢性牙周炎的关系.方法 采用病例对照实验设计,应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性基因分析方法,比较195例慢性牙周炎患者和164例健康者IL-6基因-174、-572位点基因型和等位基因分布特点.结果 IL-6基因-174位点GG、GC基因型检出率为99.4%、0.6%,无CC基因型,两种基因型和G、C等位基因频率在组间分布差异无显著性;IL-6基因-572位点CC、GC、GG基因型检出率分别为66.9%、30.6%、2.5%,C、G等位基因检出率为81.9%、18.1%,三种基因型和C、G等位基因频率在组间分布差异无显著性(P>0.05).结论 IL-6基因-174位点在中国汉族人群中变异率低,-572位点的多态性与慢性牙周炎的易感性无关.     

慢性牙周炎治疗前后龈沟液中PGE2、IL-6、IL-8的变化

目的检测慢性牙周炎患牙龈沟液(GCF)中PGE2、IL-6、IL-8在治疗前后的浓度,探讨评价牙周治疗效果的指标.方法选择20例牙周炎患牙,用超声波治疗仪进行龈下刮治,检查治疗前、治疗后4周龈沟出血指数(SBI),并收集治疗前后的GCF,用ELISA检测其中PGE2、IL-6、IL-8的浓度.结果治疗前后SBI分别为2.87±0.52和1.32±0.28,P＜0.01;PGE2 浓度为254.86±123.60和157.78±129.06 (ng/ml),P＜0.05;而IL-6、IL-8的浓度没有显著性差异.结论经过彻底的牙周治疗后,GCF中PGE2浓度明显降低,IL-6、IL-8降低没有统计学意义,提示作为牙周治疗效果评价的指标,PGE2较IL-6、IL-8等更为敏感.     

RNA干扰诱导型一氧化氮合酶基因抑制舌鳞癌细胞血管内皮生长因子表达的实验研究

目的探讨诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）基因对舌鳞癌细胞株Tca8113细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达调控情况。方法以RNA干扰技术将含有iNOS基因的特异性（short hairpin RNA，shRNA）片断的质粒表达载体转染入Tca8113细胞中，RT-PCR和Western blot法分别检测iNOS、VEGF的mRNA、蛋白表达改变情况。结果Tca8113细胞的iNOS对VEGF基因的PCR产物，在转染后24、48h实验组和对照组之间比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；iNOS基因的蛋白产物在转染后36、48h差异均有统计学意义（P〈0．05）。VEGF基因的蛋白产物在转染后48h差异有统计学意义（P〈0．05）。结论以RNA干扰技术沉默Tca8113细胞中iNOS基因，可以降低细胞中VEGF的表达水平，iNOS基因可能成为肿瘤防治的新靶点。     

托槽在数字化牙颌模型上位置与间接粘结转移后实际位置的一致性研究

目的 本研究比较托槽在数字化牙颌模型上的位置与转移至初始石膏模型上的位置的差异,以期为数字化托槽间接粘结位置的一致性提供实验依据.方法 选取在含牙根的数字化牙颌模型上进行托槽定位的15个数字化模型,通过间接粘结转移托盘将托槽转移至初始石膏模型上,用OrthoRx软件工具测量每个托槽在数字化牙颌模型上的位置与初始石膏模型上位置的线距差.结果 所有牙位托槽在数字化牙颌模型上的位置与初始石膏模型上位置的线距差值均小于检验值0.20 mm,与检验值差异有统计学意义(P<0.05).结论 托槽在数字化牙颌模型上的位置与初始石膏模型上位置具有一致性.     

Tie-2在人脐静脉内皮细胞中的表达及意义

目的 探讨酪氨酸激酶受体-2(tyrosine kinase with immunoglobulin-like and epidemal growth factor homology domains,Tie-2)基因在人脐静脉内皮细胞株ECV304中的表达,为进一步研究Tie-2在肿瘤血管生成中的作用提供实验基础.方法 传代人脐静脉内皮细胞进行培养和形态学观察,采用免疫组化(SABC法、DAB显色)对人脐静脉内皮细胞株ECV304中的Tie-2基因的蛋白表达情况进行检测.结果 相差显微镜下,培养的活细胞具有单层"卵石样"排列的典型特征,SABC法检测到Tie-2蛋白在人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞膜、细胞浆和核膜中均呈深棕色颗粒.结论 Tie-2在ECV304细胞株中呈强阳性表达.     

子宫内铅暴露对仔鼠牙齿萌出和釉质发育的影响

目的观察母鼠妊娠期间不同剂量铅暴露对仔鼠牙齿萌出情况和釉质发育的影响。方法27只怀孕SD大鼠随机分为铅暴露高剂量组、低剂量组和对照组,每组9只。铅暴露组饮用去离子水中加入醋酸铅进行染毒[以铅(Pb2+)含量计算高剂量组200mg/L、低剂量组50mg/L],对照组饮用去离子水。染毒自大鼠孕第1天持续至自然分娩。仔鼠出生后第26天在下切牙龈乳头水平进行第1次标记,并于出生后第36天在同一牙龈乳头水平行二次标记。第2次标记当日取全血测定血铅并处死仔鼠。测定切牙铅含量,应用立体显微镜观察牙齿形态并测量切牙两次标记间距离,应用电子探针测定切牙釉质钙、磷含量并计算比值。结果高、低剂量铅暴露仔鼠组血铅较对照仔鼠组增高,差异有统计学意义(P<0.01);高、低剂量铅暴露仔鼠组齿铅[(77.3±6.3)、(27.8±4.5)μg/g]与对照仔鼠组[(6.6±0.8)μg/g]相比,差异有统计学意义(P<0.01)。铅暴露仔鼠组切牙较小,牙尖磨耗明显并多见舌侧髓腔暴露,高铅剂量组更为明显。高、低剂量铅暴露仔鼠组切牙萌出速率[(0.25±0.08)、(0.30±0.09)mm/d]与对照仔鼠组[(0.39±0.09)mm/d]比较,铅暴露组萌出较为缓慢,三组间差异有统计学意义(P<0.01)。仔鼠釉质钙/磷比分析显示,随铅染毒剂量的增加,钙/磷比(1.68±0.54、1.37±0.47)降低,     

白细胞介素-1B基因+3954C/T多态性与慢性牙周炎的相关性研究

目的 研究白细胞介素-1B(IL-1B)基因+3954C/T多态性与慢性牙周炎的关系.方法 采用病例对照实验设计,应用聚合酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性基因分析方法 ,比较173例慢性牙周炎患者和168例牙周健康者IL-1B基因+3954位点基因型和等位基因分布特点.结果 IL-1B基因+3954位点CC、CT基因型检出率为96.5%和3.5%,无TT基因型,两种基因型和C、T等位基因频率在组间分布差异无统计学意义(P>0.05).结论 IL-1B基因+3954位点在中国汉族人群中变异率低,+3954位点的多态性与慢性牙周炎的易感性无关.     

血链球菌和牙龈卟啉单胞菌在SPF大鼠口腔中的相互作用

目的：研究从ＳＰＦ大鼠口腔中分离的内源性血链球菌是否可以阻止或减少牙周可疑致病菌牙龈卟啉单胞菌Ｐ．ｇ３８１在口腔的生长和定植。方法：选用１０只ＳＰＦ大鼠分作２组,强力霉素口腔清扫７ｄ以后分别接种内源性血链球菌和Ｐ．ｇ３８１,二者均获稳定定植,接着选用３０只ＳＰＦ大鼠经强力霉素口腔清扫后随机分作Ａ￣Ｆ６组,其中Ａ、Ｂ两组 接种Ｐ．ｇ３８１５ｄ,Ｃ,Ｅ两组先接咎血链球菌５ｄ,然后Ａ组再接种血链球菌５ｄ