免疫磁珠法纯化B淋巴细胞的研究

应用ＣＤ１９单克隆抗体包被的多聚苯乙烯磁珠（特异性结合），并用磁珠收集仪（ＭＰＣ－１）收集细胞，纯化Ｂ淋巴细胞２６例，得到高纯度的Ｂ淋巴细胞，并可获得较高的细胞回收率，应用ａｎｔｉ－μ激活对比，证明本方法得到的Ｂ淋巴细胞，可保持未激活状态。     

高苯丙氨酸对神经元Rho GTPases基因体外表达的研究

采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法,观察高苯丙氨酸对神经元Rho GTPases主要家族成员Racl、Cdc42、RhoA mRNA体外表达的影响,并进一步研究脑源性神经营养因子(BDNF)对它们的作用,探寻高苯丙氨酸导致神经损伤的可能机制及BDNF在体外对神经损伤的保护机制。     

关于《变态反应性疾病患儿乳胶变应原反应性及抗原交叉性的研究》一文的问题及答复

您好!拜读您的论著《变态反应性疾病患儿乳胶变应原反应性及抗原交叉性的研究》(见中华儿科杂志,2004(4)：271-274,编者注)有几点不同意见,与您商榷如下。     

静脉免疫球蛋白对新生儿脐带血淋巴细胞免疫抑制机制的研究

目的从脐带血单个核细胞(CBMC)和CD3^ T淋巴细胞膜表面CD25、CD45RA、CD45RO分子表达的角度,探讨静脉免疫球蛋白(IVIG)对新生儿免疫功能的抑制机制。方法利用IVIG和植物血凝素(PHA)不同组合对CBMC或CD3^ T淋巴细胞进行刺激培养,再利用四色免疫荧光抗体标记-流式细胞技术检测细胞表面CD25、CD45RA、CD45RO分子的表达情况。结果IVIG可以抑制PHA诱导的CBMC的活化,表现为CD25分子表达的明显抑制;并且随着CD25分子表达的抑制,CD4^ 细胞表面的CD45RO分子的表达也被抑制,阻止了CBMC中的CD4^ CD45RA^ 细胞向CD4^ CD45RO^ 细胞转换。IVIG也可以抑制PHA诱导的脐带血CD3^ T淋巴细胞CD25分子和CD45RO分子的表达,但这种抑制程度远远不如对CBMC作用明显。结论IVIG可以抑制脐带血T淋巴细胞的活化过程,这种抑制作用除了与IVIG对T淋巴细胞的直接作用外,还可能通过了其他免疫细胞或免疫分子的间接介导。IVIG对CD4^ CD45RO^ T淋巴细胞的抑制作用可能是IVIG抑制B淋巴细胞免疫球蛋白释放的重要机制之一。新生儿期应用IVIG有可能使免疫功能低下加重。     

串联质谱技术在遗传性代谢病高危儿童筛查中的初步应用

目的　开展遗传性代谢病高危儿童筛查检测。方法　临床疑诊遗传性代谢病儿童 10 4例 ,男 77例 ,女 2 7例 ,年龄 (4 8± 4 2 )岁。手指采血 ,滴于专用采血滤纸上。干血滤纸片与含已知量的氨基酸、酰基肉碱同位素内标一起 ,经甲醇萃取 ,盐酸正丁醇衍生后 ,用串联质谱仪分析血片中氨基酸谱和酰基肉碱谱及其浓度。结果　在 10 4例标本中 ,检出阳性标本 10例 (9 6 % ) ,其中酪氨酸血症1例 ,同型胱氨酸血症 1例 ,高鸟氨酸血症 1例 ,甲基丙二酸血症 2例 ,丙酸血症 1例 ,3 羟基 3 甲基戊二酸裂解酶缺乏症 1例 ,中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症 2例 ,酰基肉碱转移酶Ⅱ缺乏症 1例。结论串联质谱技术可检测 30余种遗传性代谢病 ,包括氨基酸代谢紊乱、有机酸代谢紊乱和脂肪酸代谢紊乱性疾病 ,高危遗传性代谢病患儿的筛查有重要价值     

21羟化酶缺乏症患者最终身高影响因素探讨

先天性肾上腺皮质增生症(CAH)是一组由于肾上腺皮质激素合成酶缺乏导致的疾病,其中21羟化酶缺乏症(21-OHD)患者占90％以上,疾病所致的矮身材是该病治疗中较为关注的问题之一。为此我们回顾分析了1978-2001年在我院儿科内分泌专科随访的38例21-OHD患者最终身高(FH),并分析临床分型、性别、诊断早晚、城乡分布、父母身高和服药依从性等因素与靶身高(TH)的关系。     

21-羟化酶缺乏症患者CYP21基因点突变研究

目的 了解CYP21基因编码区的常见突变谱和突变热点,并分析基因型和表现型的关系。方法 对来自51个家庭的52例21-羟化酶缺乏症患者的全长CYP21基因分两个片断进行特异性聚合酶链反应(PCR)扩增,在此基础上进行相应的巢式PCR扩增,再根据突变的特点分别采用限制性片段长度多态性(RFLP)和扩增产生酶切位点(ACRS)的方法,检测6种突变：P30L、12g(内含子2的nt656a／c→g剪切突变)、E3△8nt(外显子3第111～113密码子的8bp缺失)、I172N、V281L和Q318X。结果 在102个等位基因中,除了27个等位基因外都能够确定基因型。最常见的突变为12g,其发生频率为31％,其次为I172N(23％),Q318x(14％),V281L(9％),P30L(3％),E3△8nt(2％),其中有2个以上复合突变的等位基因占6％。失盐型患者最常见的突变为12g(45．7％)和Q318X(26％)。单纯型最常见的突变为I172N(40．7％)和12g(18．5％)。结论 本组52例患者中,73％的等位基因突变为上述6种突变,以12g和I172N为突变热点,2种突变占54％。上述结果为进一步的遗传咨询和产前诊断服务提供了有用的信息。     

儿科患者入院时营养状况评价

目的调查评价儿科住院患者的营养状况，了解其营养不良的患病率。方法上海交通大学医学院附属新华医院、附属上海儿童医学中心及附属儿童医院共2274例患儿入院时进行体格测量，以世界卫生组织儿童生长量表为参考标准，根据Z值评分法，分别计算年龄别身高Z值（height for age Z-score，HAZ）、年龄别体重Z值（weight for age Z-score，WAZ）和身高别体重Z值（weight for height Z-score，WHZ），评价住院儿科患者的营养状况。结果患儿营养不良的发生率分别为：生长迟缓（HAZ〈-2）7．1％，低体重（WAZ〈-2）5．5％，消瘦（WHZ〈-2）5．2％；营养风险的发生率分别为：生长迟缓（-2≤HAZ〈-1）13．5％，低体重（-2≤WAZ〈-1）16．8％，消瘦（-2≤WHZ〈-1）16．3％。先天性心脏病患儿生长迟缓、低体重和消瘦的发生率均较高；泌尿外科和骨科患儿生长迟缓的发生率较高。结论住院患儿具有较高的营养不良及营养风险发生率，有必要对全体儿科住院患者进行常规营养状况筛查。