重组腺相关病毒介导的血红素加氧酶1基因和绿色荧光蛋白基因在肝移植大鼠肝脏中的表达

目的 构建提纯重组腺相关病毒介导的血红素加氧酶1基因(HO-1)和绿色荧光蛋白基因(GFP),并探讨其在肝移植大鼠肝脏中的表达情况.方法 克隆大鼠HO-1,构建重组腺相关病毒-HO-1(rAAV-HO-1)载体,酶切鉴定并进行测序,氯化钙共沉淀法与辅助质粒Virus helper、AAV-cap-rep转染包装细胞,应用肝素层析柱法纯化浓缩病毒,实时荧光定量PCR测定病毒滴度.应用二套管法建立Wistar→Wistar大鼠原位肝移植模型.将提纯的重组腺相关病毒-GFP(rAAV-GFP)在供肝冷保存阶段经门静脉靶向转染并孵育2 h后行大鼠原位肝移植,分别于术后1、3个月处死大鼠取材,冰冻切片荧光显微镜下观察不同组织GFP的表达情况及转染效率.结果 rAAV-HO-1重组子经酶切电泳检测表明插入片段大小正确,测序结果与Genbank一致.rAAV-GFP靶向转染供肝1、3个月冰冻切片荧光显微镜下观察,移植肝GFP表达效率均＞80%,且在心、肺、脾、肾、肠等组织中未见报告基因的表达.结论 成功构建并提纯了携带HO-1、GFP基因的高滴度的腺相关病毒,验证了腺相关病毒介导的GFP在肝移植大鼠肝脏中稳定高效的表达.     

p44/p42激酶磷酸化在丹参注射液定向诱导成肌细胞分化为

背景：睫状神经因子通过细胞表面的受体可以使成肌细胞去分化而转变为多能性干细胞，而p44/p42激酶可以进一步激活睫状神经因子下游基因的表达，与细胞去分化密切相关。 目的：观察丹参注射液诱导成肌细胞分化成神经元的细胞模型中p42/p44激酶磷酸化的情况。 设计、时间及地点：细胞分子水平实验，于2008-03/06在辽宁医学院附属第二医院口腔科学实验室完成。 材料：清洁级新生1周SD大鼠1只，由辽宁医学院实验动物中心提供。丹参注射液为四川三精升和制药有限公司产品，批号080717，主要成分为丹参。睫状神经营养因子为Sigma产品。 方法：体外分离培养大鼠成肌细胞，传至第5代接种于6孔板内，诱导组使用50μg/L睫状神经因子预诱导72 h，再更换含复方丹参注射液的无血清DMEM培养基诱导10 h；对照组使用不含复方丹参注射液的无血清DMEM培养基处理。取诱导后的成肌细胞，加入p44/p42激酶抑制剂PD98059进行干预处理。 主要观察指标：Western blotting法检测诱导后成肌细胞蛋白标记物MyoD，Myf5的表达，神经元蛋白标记物酪氨酸羟化酶、神经丝的表达，以及p44/p42激酶在成肌细胞蛋白标记物下调过程中的作用。 结果：与未诱导的对照组比较，培养的成肌细胞经睫状神经因子预诱导、再加入丹参注射液诱导的过程中，成肌细胞蛋白标记物MyoD，Myf5的表达均明显下调；而诱导后期神经元特异蛋白标记物酪氨酸羟化酶、神经丝的表达增高。丹参诱导后成肌细胞p44/p42激酶发生磷酸化，同时MyoD和Myf5的表达量下调；在p44/p42激酶抑制剂PD98059存在情况下，p44/p42激酶磷酸化及MyoD，Myf5表达量下调均被抑制。 结论：经睫状神经因子预诱导后逐渐去分化的成肌细胞，在丹参注射液的诱导下能够成功分化为表达神经元特异蛋白标记物的神经元样细胞，p44/p42激酶通过磷酸化参与了成肌细胞的再分化过程。     

陕西省三带喙库蚊对常用杀虫剂的敏感性

目的了解陕西省三带喙库蚊对常用杀虫剂的敏感性。方法用浸渍法测定8种杀虫剂对5个地区三带喙库蚊的LC50。结果DDT、敌敌畏、氯菊酯、溴氰菊酯和双硫磷等5种杀虫剂汉滨区三带喙库蚊敏感性最高;氯氰菊酯和高效氯氰菊酯南郑县三带喙库蚊敏感性最高;残杀威陇县三带喙库蚊敏感性最高。结论敏感性测定结果可作为基础数据用于资料积累;连续开展敏感性监测,了解蚊虫抗药性趋势,有利于指导蚊虫防制。     

HO-1系统与肝移植保护

原位肝移植(OLT)是治疗终末期肝疾病的有效方法.尽管器官保存及免疫抑制药物取得了极大进步,但供肝获取过程中遭受的缺血再灌注损伤(IRI)不仅诱发移植物术后早期无功能,还加速急、慢性排斥反应发生,影响远期效果,当供肝为老年供肝或脂肪肝时尤显突出[1,2].     

青年人急性胰腺炎62例临床分析

对近3a来本院收治的40y以下的青年急性胰腺炎患者62例与同期住院的176例非青年患者进行临床分析。发现青年人急性胰腺炎患者女性多于男性，饮食不当所致者明显高于其他病因；均有腹痛，但反跳痛、腹肌紧张、黄疸、神志变化的发生率较低，发热程度以低、中度热为主；血清总胆红素（TBIL）、丙氨酸转氨酶（ALT）及血糖升高的发生率明显低于对照组．检测尿淀粉酶（Am）的阳性率明显高于对照组；超声表现以胰腺体积增大、回声低为主；重症者少，并发症少，恢复快，预后较好。     

巴马地区长寿老年人心血管疾病的危险因素调查

广西壮族自治区巴马地区是世界第五长寿之乡.这里的生活环境相对封闭,长寿老年人特殊的生活环境和遗传背景,为人类长寿遗传和老年人相关疾病的研究提供了重要的资源.既往的调查结果显示,巴马长寿者总体健康状况良好,高血压、冠心病的发病率低.随着人们的生活水平和生活方式的变化,我国心血管疾病发病率和病死率逐年增加[1].为了解长寿老年人心血管疾病相关危险因素,我们于2005年10月至2007年6月对世居巴马地区的长寿老年人进行了调查,现将结果报道如下.     

会阴侧切的产妇不使用抗生素的临床观察

会阴侧切的产妇使用抗生素预防感染比较常见,2006年2月份以来,我院对无妊娠合并症与并发症、无阴道炎、羊水重度污染、产后出血、滞产、产钳助产、子宫腔内操作的会阴侧切的产妇不再使用抗生素预防感染,未发现不良后果,现在报道如下.     

河南省艾滋病患者服药依从性及影响因素调查

目的 探讨艾滋病患者抗病毒治疗服药依从性及影响因素。方法 采用分层随机抽样的方法,对河南省5个艾滋病防治示范县/市的796名抗病毒治疗患者进行调查,并对相关影响因素进行Logistic回归分析。结果 调查结果显示,有704（88.4%）人服药依从性好;单因素分析显示,不同收入水平（χ2 = 7.674,P = 0.022）、确诊年限（χ2 = 5.203,P = 0.023）、社会支持程度（t = 2.870,P = 0.004;t = 2.500,P = 0.013;t = 2.337,P = 0.020）等对患者服药依从性的影响具有统计学意义;Logistic回归分析显示,影响患者服药依从性的主要因素是:确诊年限（P = 0.006,OR = 0.401）、收入水平（P = 0.003,OR = 0.364）、客观支持（P＜0.001,OR = 1.180）、主观支持（P = 0.002,OR = 1.075）、支持的利用度（P = 0.005,OR = 1.163）。结论 河南省艾滋病患者服药依从性仍需进一步提高,在今后的抗病毒治疗中,应进一步提高患者的社会支持水平以提高其服药依从性。     

医院市场竞争策略与打造核心竞争力

中国加入WTO以后,市场全球化的浪潮席卷了我国绝大多数行业.医疗卫生行业也面临着体制改革,竞争对手多样性的冲击,使得同行业之间竞争愈发激烈.在实际经营管理中,越来越多的医疗卫生机构以消费者欲望和竞争者地位为逻辑基础开展营销、宣传活动.医院在市场上也需攻守进退,根据环境的变化、自身的实力采取不同的竞争策略.针对医院当前存在的竞争威胁,有前瞻性地制定相应的竞争战略,综合运用总成本领先战略、差异性优势战略和目标集中战略打造核心竞争力,加强医疗环境、技术水平、服务态度、服务价格等方面的建设和管理工作,让医院始终保持持续、快速、健康发展态势,在激烈的市场竞争中不断扩大市场占有份额,把医院做大做强.