狼疮方含药血清对人近端肾小管上皮细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达及CD40、RANTES的影响

目的观察狼疮方含药血清对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及干扰素(INFγ)和肿瘤坏死因子(TNFα)诱导的白细胞分化抗原40(CD40)、受激活调节的正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)表达的影响,探讨该复方体外抗炎效应及其可能机制.方法制备狼疮方含药大鼠血清;HK-2细胞株体外培养,分组如下(1)培养基对照组;(2)正常鼠血清对照组;(3)狼疮方含药血清组;(4)IFNγ TNFα刺激组;(3)刺激 10%狼疮方血清组;(4)刺激 10%正常鼠血清对照组.采用免疫印迹(Westem-blot)检测PPARγ蛋白表达,半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测CD40 mRNA、RANTES mRNA表达水平.结果(1)正常HK-2细胞基础量表达PPARγ;10%狼疮方含药血清作用下,PPARγ蛋白表达呈现时间依赖性先增高后降低的趋势.(2)正常HK-2细胞基础水平表达CD40、RANTES.IFNγ TNFα刺激后,CD40和RANTES表达显著升高;10%狼疮方含药血清可显著抑制IFNT TNFα诱导的CD40和RANTES表达;正常鼠对照血清对CD40和RANTES表达无明显影响.结论狼疮方含药血清可能通过激活PPARγ途径抑制人近端肾小管上皮细胞CD40和RANTES表达,从而发挥抗炎效应.     

Rosiglitazone down-regulates lipopolysaccharide-induced expression of CD40 and intercellular adhesion molecule 1 in rat peritoneal mesothelial cells through a NF-κB dependent mechanism

Objective To investigate the effect and mechanism by which PPARγ ligand, rosiglitasone, regulates the expression of CD40 and intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1) in the rat peritoneal mesothelial cells (RPMCs) induced by lipopolysaccharide (LPS). Methods RPMCs were harvested from Sprague-Dawley rat peritoneal cavity and maintained under defined in vitro conditions. The cells were randomly divided into groups as follows: medium, LPS (5 mg/L), LPS (5 mg/L)+BAY11-7085(5 μmol/L, NF-κB inhibitor), rosiglitazone (10 μmol/L or 20 μmol/L, peroxisome proliferator-activated receptor γ activator), LPS (5 mg/L)+rosiglitazone (10 μmol/L)+GW9662 (3 μmol/L, peroxisome proliferator-aetivatcd receptor γ antagonist), and LPS (5 mg/L)+vehicle (DMSO 0.2 ml/L). The expressions of CD40 and ICAM-1 RNA in RPMCs were examined by RT-PCR after 3 hour treatment, and the protein expressions of CD40, ICAM-1, p-NF-κB p65 and p-IκBα were examined by Western blot or immunofluorescence after 24 hour treatment. Results Following treatment with LPS, both the expressions of CD40 and ICAM-1 protein in RPMCs were up-regulated significantly (P<0.05), and the phosphoralation of p65 was increased greatly (1.10±0.17 vs 0.55±0.06, P<0.05). BAY11-7085 (5 μmol/L) significantly decreased the protein expression of p-p65 (0.22±0.11 vs 1.10±0.17, P<0.01), CD40 (0.34±0.02 vs 0.50±0.06, P<0.05) and ICAM-1 (0.35±0.16 vs 0.74±0.03, P<0.05). Pretreated with rosiglitazone for 3 h then added with LPS for 1 h, the levels of p-p65, CD40 and ICAM-1 in RPMCs were significantly decreased compared with those of LPS group (0.77±0.08 vs 0.90±0.10, P相似文献   

甲状旁腺激素、钙离子在庆大霉素肾毒性中的作用

高钙饮食减轻庆大霉素(gentamicin,GM)肾毒性,一般认为是由于钙离子(Ca~(2 ))竞争抑制GM与肾小管细胞膜结合。但摄入高钙又能抑制体内甲状旁腺激素(PTH)的分泌和活性。PTH能影响肾皮质酸性磷脂代谢,增加刷状缘GM受体数目和近曲小管细胞Ca~(2 )内流。本实验设计在于了解PTH和Ca~(2 )在GM     

视网膜静脉阻塞治疗新进展

膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)是一种眼底静脉阻塞引起的眼底血管疾病,累及黄斑者可严重影响视力.1877年,Leber首次报道了这一疾病,并描述了其眼底病变,其发病率仅次于糖尿病视网膜病变,在眼底血管疾病中占第2位.现将RVO治疗方法综述如下.     

两种盖玻片对激光共聚焦显微镜成像效果的影响

目的：探讨两种盖玻片制备的细胞爬片对激光共聚焦扫描显微镜（Confocal laser scanning microscopy,CLSM）采集免疫荧光图像效果的影响。方法：以适用于CLSM的专用盖玻片（A片）和组织病理学通用的普通盖玻片（B片）制备肾小管上皮细胞NRK52E的细胞爬片,分别进行胞浆蛋白转录激活因子3（STAT3）,胞膜蛋白上皮型钙黏附蛋白（E—cadherin）及细胞骨架蛋白纤维状肌动蛋白（F—actin）的免疫荧光染色,在CLSM下以相同设置采集荧光图像并观察结果的异同。结果：CLSM图像显示,A片中胞浆蛋白STAT3弥散分布于胞浆,胞膜蛋白E-cadherin沿细胞连接处连续线状分布,细胞骨架蛋白F-actin向细胞表面伸出毛刺状突起的丝状伪足,均真实反映了蛋白的全部分布;而B片中胞浆蛋白STAT3弥散分布于胞浆,胞膜蛋白E—cadherin在细胞连接处呈不连续的点、短线状分布,细胞骨架蛋白F-actin未显示向细胞表面伸出的丝状伪足,不能完全真实反映蛋白的全部分布。结论：普通组织病理盖玻片用于CLSM的荧光图像观察,有时会使研究工作者在分析荧光图像时得出错误的结论,因此要选择适合CLSM的免疫荧光专用盖玻片,使实验条件趋于标准化。     

重性抑郁障碍患病率的性别差异

目的了解重性抑郁障碍的患病率及其性别差异。方法采用多阶段分层整群抽样方法随机抽取≥18周岁的人群10073名,以改编后的一般健康问卷12项（GHQ-12）为筛选工具,以美国精神障碍诊断与统计手册-第4版（DSM-IV）轴I障碍定式临床检查病人版（SCID-I/P）为调查的诊断工具。功能状况评价采用大体功能评定量表（GAF）。结果重性抑郁障碍的终生患病率为41.90‰（95‰CI：37.77‰～46.04‰）,时点患病率为26.38‰（95‰CI：23.08‰～29.69‰）。女性终生及时点患病率均明显高于男性（P〈0.01）,农村女性的终生和时点患病率均明显高于农村男性（P〈0.01）。女性30岁以上患病率较高。重性抑郁障碍与其他精神障碍共病比率男性56.10%,女性55.95%,两性间差异无统计学意义（P〉0.05）。心理、社会和职业功能受损程度重度发生率男性为68.29%,女性48.81%,男性高于女性（P〈0.05）。结论重性抑郁障碍是一种患病率较高的精神障碍,女性,特别是农村女性的患病率高,男性心理、社会及职业功能损伤程度的重度发生率高于女性。     

玻璃体积血的病因分析近况

玻璃体积血是最常见的玻璃体病变,是外伤、眼病或全身出血性疾病导致视力障碍的一种常见病症。可造成屈光间质混浊,不仅造成视力障碍,妨碍眼底检查,还对眼其他组织产生严重破坏作用,引起其它并发症,如玻璃体液化、机化、后脱离,继发血细胞性青光眼等。由于玻璃体内无血管,玻璃体内的积血通常来自视网膜或脉络膜的破损的血管或新生血管。所以其代谢极其缓慢,造成积血后吸收十分困难,致盲率甚高。     

血管紧张素Ⅱ诱导Toll样受体4在腹膜间皮细胞的表达及其对脂多糖诱导CD40表达的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对原代培养大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）Toll样受体4（TLR4）表达的影响及其在脂多糖（LPS）诱导的核转录因子κB （NF-κB）活化及CD40表达中的作用。 方法 分离及培养RPMC。用不同浓度AngⅡ（10－9、10－8、10－7、10－6 mol/L）刺激细胞及用10-7 mol/L AngⅡ刺激细胞不同时间（mRNA为1、2、4、8、12、24、48 h和蛋白为6、12、24、36、48 h），观察血管紧张素1型受体（AT1R）阻滞剂洛沙坦（10－5 mol/L）和血管紧张素2型受体（AT2R）阻滞剂PD123177（10-5 mol/L）对AngⅡ诱导TLR4表达的影响。将细胞随机分为下列4组：对照组、AngⅡ (10－7 mol/L)组、LPS(1 mg/L)组、AngⅡ (10－7 mol/L)+LPS(1 mg/L)组，观察AngⅡ对LPS诱导的NF-κB激活和CD40表达的影响。RT-PCR检测TLR4、CD40 mRNA表达；Western印迹检测TLR4、IκBα、磷酸化IκBα（p-IκBα）、NF-κB p65、磷酸化NF-κB（p-p65）蛋白表达；免疫荧光检测细胞NF-κB p65亚单位的表达及分布。 结果 (1)10－9、10－8、10－7、10－6 mol/L AngⅡ作用RPMC 12 h，TLR4 mRNA表达分别增加70.5%、89.5%、102.9%和121.9%；作用24 h TLR4蛋白表达分别增加12.1%、27.7%、51.2%和41.6%。AngⅡ（10－7 mol/L）作用RPMC不同时间，TLR4 mRNA表达高峰为8 h和12 h（P < 0.01），蛋白表达高峰为12 h和24 h（P < 0.01）。(2)洛沙坦阻断后，AngⅡ诱导的TLR4表达与未阻断组比较，下调33.5%（P < 0.05）。PD123177对AngⅡ诱导的TLR4表达无显著影响（P > 0.05）。(3) 与正常对照组比较，LPS作用60 min p-IκBα/IκBα、p-p65/p65表达分别上调362.6%（P < 0.01）和67.4%（P < 0.05）；作用4 h CD40 mRNA表达上调299.9%（P < 0.01）；与LPS组比较，AngⅡ预刺激24 h加LPS作用60 min，p-IκBα/IκBα、p-p65/p65表达分别上调49.1%（P < 0.01）和29.3%（P < 0.05）；作用4 h CD40 mRNA表达上调56.8%（P < 0.01）。(4)免疫荧光结果显示正常对照组与AngⅡ组细胞中，p65信号定位于细胞胞质；LPS作用60 min，p65信号从胞质进入胞核；AngⅡ+LPS组NF-κB p65胞核信号显著增强。 结论 AngⅡ呈浓度、时间依赖性诱导RPMC TLR4表达，并显著增强LPS诱导NF-κB激活及CD40的表达。提示腹膜组织局部产生的AngⅡ可能对LPS诱导的腹膜组织炎性反应具有放大作用。     

一种提高尿红细胞形态应用的新方法

目的 :为了提高尿红细胞形态检查的应用价值 ,寻找一种简便而又有效的判定方法。方法 :用普通光学显微镜观察了 68例各类型的肾小球性疾病病人和 83例非肾小球性疾病病人的血尿标本 ,并用畸形、畸 /环形、环形、正形四种方式进行判定其形态。结果 :用畸形、畸 /环形诊断肾小球性血尿的敏感性和特异性分别为 77.5%和 94.7%、1 3.8%和 59.4% ;用正形、环形诊断肾小球性血尿的敏感性和特异性分别为 :59.2 %和 95.9%、2 5%和 76.9%。结论 :该法能最大限度地区别肾小球性与非肾小球性血尿 ,又能给检查者以明确的判定方法和临床应用的明朗指征 ,是一种简便而又有效的方法     

Par-3蛋白在转化生长因子?茁1介导的大鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的 观察转化生长因子（TGF)β1诱导的正常大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK52E）转分化（EMT）过程中细胞极性蛋白Par-3的表达及上调Par-3蛋白表达对TGF-β1诱导NRK52E细胞转分化进程的影响。 方法 应用TGF-β1 (10 μg/L)刺激NRK52E细胞，采用RT-PCR、Western印迹和免疫荧光方法分别检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Par-3 mRNA和蛋白的表达；应用Lipofectmine 2000将pKH3-HA-Par-3质粒瞬时转染NEK52E细胞，采用Western印迹观察上调表达Par-3对上述指标的影响。 结果 TGF-β1刺激后，NRK52E细胞α-SMA蛋白和mRNA水平上调，E-cadherin蛋白和mRNA的表达下调；Par-3蛋白表达呈时间依赖模式下调，72 h TGF-β1刺激组与对照组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。但Par-3 mRNA水平在各时间点差异均无统计学意义（P > 0.05）。脂质体转染外源性质粒pKH3-HA-Par-3上调表达Par-3可显著抑制TGF-β1诱导NRK52E细胞α-SMA蛋白的上调表达；逆转E-cadherin蛋白的下调表达。 结论 在TGF-β1诱导NRK52E细胞转分化进程中细胞极性Par-3蛋白表达下调，基因转染上调表达Par-3可部分减轻EMT的程度，提示Par-3蛋白在TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化和肾脏纤维化中可发挥保护性作用。