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目的研究白杨素提高肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导肝癌细胞HepG2凋亡的能力,并对其分子机制进行初步探讨。方法白杨素以不同浓度(10、20、40μmol/L)单独或联合TNF-α(10 ng/mL)处理HepG2细胞后,于普通及荧光倒置显微镜下观察细胞形态变化,获得细胞死亡的定性资料;流式细胞术检测sub-G1峰,分析峰值变化规律,获得细胞死亡的定量资料;并以Western blotting方法检测凋亡标志蛋白caspase-3、caspase-8和PARP原蛋白和相应的裂解产物的变化情况及凋亡抑制蛋白Bcl-xL、cIAPs、xIAP、cFLIP的时间-效应变化规律。结果 形态学观察可发现白杨素联合TNF-α处理HepG2细胞后,与对照组比较细胞出现明显的死亡数量增加,而单独白杨素组、TNF-α组与对照组比较则未观察到明显的细胞减少(P0.05);流式细胞术分析sub-G1的定量资料也支持这一结果,联合处理组sub-G1值随着白杨素剂量增加而增大,最高达到(27.84±0.54)%,与对照组比较有显著差异(P0.05),Hochest 33342荧光染色在联合处理组可观察到明显的核固缩细胞增加;Western blotting检测到凋亡标志蛋白caspase-3、caspase-8和PARP原蛋白减少、相应的活化裂解片段出现;全caspase酶抑制剂z-VAD-fmk可有效抑制联合处理组HepG2细胞死亡、sub-G1峰消失比值减少,阻止凋亡标志蛋白caspase-3、caspase-8和PARP的活化降解;TNF-α引起的凋亡抑制蛋白cFLIP-1表达量增加,随联合处理时间延长而明显下调,与对照组比较有明显差异,Bcl-xL、xIAP等其他凋亡抑制蛋白没有明显改变。结论白杨素能够有效提高TNF-α诱导HepG2细胞凋亡的能力,NF-κB调节的凋亡抑制蛋白cFLIP-1表达减少是其重要的分子机制。 相似文献
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两种方法评价化妆品皮肤刺激反应的结果分析 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨多次皮肤刺激实验和组织病理实验评价化妆品对皮肤刺激性的差异。方法 对 97种化妆品分别进行家兔多次皮肤刺激实验和皮肤组织病理学实验 ,比较了皮肤刺激性的超标率 ,并从中随机选择 7种化妆品比较其肉眼观察的皮肤刺激反应积分和病理反应积分的差异。结果 通过多次皮肤刺激实验和组织病理学实验获得的 97种化妆品皮肤刺激性超标率分别为 6 .2 %和 13.4% ,差异无显著性。 7种化妆品的皮肤刺激反应积分显著低于相应的组织病理学积分 (Wilcoxon test T+=2 7,P<0 .0 5 ) ,7种化妆品皮肤刺激实验均合格 ,而组织病理学实验发现一种化妆品具有明显皮肤刺激性 (积分值为 4.2 5 )。结论 皮肤组织病理学实验能更早、更准确地反映化妆品引起的轻度皮肤损伤 ,应与皮肤刺激实验结合起来评价化妆品对皮肤的刺激性 相似文献
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何国群 《国外医学:卫生学分册》2005,32(4):248-252
由于传统的皮肤变态反应试验系统主观性较强和不利于动物福利,各国相继开展了以小鼠实验、体外细胞和器官培养、计算机系统为基础的替代方法的研究,并对这些方法的预测能力进行了评估分析。 相似文献
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红细胞溶血试验作为眼刺激性替代方法的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨红细胞溶血试验在化妆品原料和产品眼刺激性检测中的适用性。方法选择已知动物实验眼刺激性分级的23种化学品原料和12个洗发、护发类化妆品产品作为受试物,确定受试物引起绵羊红细胞50%发生溶血时的受试物浓度(LC50值)和血红蛋白变性指数(DI,%),计算L/D值(LC50/DI),以L/D值作为评价标准,进行眼刺激性分级。将红细胞溶血试验刺激性分级结果与动物实验结果进行分级一致性比较,初步分析体外试验的适用性。结果红细胞溶血试验对23种化妆品原料的分级结果与动物实验的分级一致性系数为0.582,而当化妆品原料不包括酸、碱及难溶于水的物质时,一致性系数为0.803。红细胞溶血试验对化妆品的分级结果与动物实验结果具有等级相关性(γ=1.000,P0.001)及分级一致性(κ=0.733,P0.001)。结论与Draize试验比较,红细胞溶血试验具有较好的预测能力,除了酸类、碱类以及难溶性受试物,作为严重眼刺激性化妆品原料和产品评价的筛选方法具有良好的应用价值。 相似文献
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为了解净水器的卫生质量问题,我们对40个三种类型家用净水器进行微生物学方面检测,现将结果报告如下:1材料与方法1.1样品来源样品来源于广东省内的各生产厂家,按随机抽样原则进行抽样。1.2样品的种类按净水器所使用的净水介质分类A:吸附型活性碳净水器;B:活性碳、中空纤维组成的净水器;C:反渗透型(RO型)净水器。1.3实验步骤1.3.1将净水器直接接于实验用水水龙头,用实验用水冲洗至说明书要求,在初始使用状态下采水样检则(即静放0小时水样)。1.3.2净水器进水后常温静放24小时后采水样检测。实验过程中所用的容器管道… 相似文献