高效液相色谱──电化学检测法测定大鼠牙髓中5─羟色胺

用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）—电化学检测法对大鼠牙髓中的５—羟色胺（５—ＨＴ）进行了测定。实验采用简单的预处理方法，平均回收率达９８％以上，精密度较高，５—ＨＴ在０．１２５～２ｎｇ范围内与峰高呈线性关系，相关系数为０．９９８７。正常大鼠牙髓，炎症３ｈ及炎症２４ｈ牙髓中的５—ＨＴ含量分别为４１．８８ｐｇ／ｍｇ、９３．６４ｐｇ／ｍｇ和３２．７５ｐｇ／ｍｇ左右，提示５—ＨＴ在大鼠牙髓炎早期有一定作用。     

细胞凋亡抑制基因bcl-2和survivin在血管瘤不同时期的表达

目的:探讨血管瘤自然消退过程与细胞凋亡的关系.方法:收集血管瘤及血管畸形标本63例,均经病理证实;所有患者均未经过激素或其他药物治疗.其中血管瘤44例,按照组织学特征将其分为增殖期23例,退化期21例;血管畸形19例.每例标本采用SABC法免疫组化,检测bcl-2、survivin 2种细胞凋亡抑制基因的蛋白表达,同时以8例正常皮肤组织作为对照.采用SPSS11.0软件包行×列表卡方检验.结果:血管瘤增殖期和退化期的bcl-2表达不同,具有显著性差异(P＜0.01);而survivin的表达无显著性差异(P＞0.05).结论:Bcl-2在血管瘤增殖期血管内皮细胞的高表达与退化期表达有显著性差异.提示该基因可能在血管瘤增殖期抑制内皮细胞凋亡方面发挥作用;而survivin在血管瘤增殖期内皮细胞的高表达,与退化期表达无显著性差异,提示该基因与血管瘤的自然消退关系不大.     

二甲双胍对非酒精性脂肪性肝病细胞模型内质网应激与自噬的影响

目的观察二甲双胍对游离脂肪酸(FFA)诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)HepG2细胞模型内质网应激(ERS)及自噬的影响。方法 2020年7—11月于武汉大学人民医院消化系统疾病湖北省重点实验室进行实验。分别用0(空白对照)、10、20、40、80 mmol/L的二甲双胍处理HepG2细胞24 h,评估二甲双胍对细胞活力的影响。取对数生长期HepG细胞分为对照组(BSA组)、模型组(FFA组)、二甲双胍低浓度组(Met L组)、二甲双胍高浓度组(Met H组)4组,FFA、Met L、Met H组利用FFA处理HepG2细胞24 h建造NAFLD细胞模型,Met L、Met H组分别加入1 mmol/L和10 mmol/L二甲双胍干预其过程。Western-blot法分别检测HepG2细胞ERS相关蛋白磷酸化PERK(p-PERK)、ATF4及自噬相关蛋白p62、LC3表达水平的变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测ATF4 mRNA表达。结果二甲双胍可剂量依赖性地降低HepG2细胞活力(F/P=1 759.000/0.000)。与BSA组比较,FFA组内p-PERK、p62、ATF4蛋白和mRNA表达水平增高(t/P=3.273/0.029、16.190/0.000、47.290/0.000、13.730/0.000),LC3Ⅱ/Ⅰ比值下降(t/P=17.980/0.000);与FFA组比较,Met L组和Met H组p-PERK、p62、ATF4蛋白和mRNA表达水平降低(F/P=70.310/0.000、106.700/0.000、995.600/0.000、66.960/0.000),LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高(F/P=166.400/0.000),且与Met L组比较,Met H组上述指标变化更明显(P<0.05),但p62水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论二甲双胍可降低FFA诱导的NAFLD细胞模型ERS水平并提高细胞自噬水平。     

主动呼吸控制结合光学体表监测在左侧乳腺癌深吸气屏气放疗呼吸训练中的应用

目的探讨左侧乳腺癌深吸气屏气(Deep Inspiration Breath-Hold,DIBH)放疗中使用主动呼吸控制(Active Breathing Coordinator,ABC)下光学体表监测DIBH的可行性以及幅度变化范围,比较两种呼吸状态下剂量学差异。方法15例左侧乳腺癌保乳术后拟行全乳放疗患者,使用ABC设备控制病人吸气量,同时使用光学体表监测设备监测病人体表呼吸幅度变化。分别在自由呼吸(Free Breathing,FB)以及最大吸气量的80%状态采集CT图像,使用Pinnacle计划系统分别在两套图像上计划设计,对CT图像上两种状态双肺体积差值与ABC吸气量阈值配对t检验。计算光学体表DIBH幅度与最大吸气幅度比值;DIBH幅度与FB幅度比值;DIBH使用ABC控制显示吸气量无变化的情况下,光学体表幅度下降超过3 mm的百分比,比较两种呼吸状态下剂量学差异。结果15例患者FB与DIBH的CT影像上双肺体积差值与ABC吸气量阈值无明显差异(P>0.05)。80%最大吸气量幅度平均为12.1 mm,95%CI为(11.4~14.1)mm。80%最大吸气量幅度与最大吸气幅度比值为0.78±0.12,80%最大吸气量幅度与FB幅度比值为3.24±1.08。DIBH使用ABC控制显示吸气量无变化的情况下,光学体表幅度下降超过3 mm,占比10.8%。DIBH与FB相比,心脏平均剂量、V₁₀、V₂₀、左肺平均剂量、全肺V₂₀均显著减低(P<0.001)。结论在左侧乳腺癌保乳术后放疗呼吸训练中,使用光学体表监测设备实现高质量DIBH是有效的。     

产黑普氏菌破坏上皮屏障紧密连接在口腔扁平苔藓发病机制中的作用

目的探索产黑普氏菌（Prevotella melaninogenica, Pm）侵入口腔扁平苔藓（oral lichen planus, OLP）病损组织的可能机制。方法收集OLP患者病损组织和正常黏膜组织,应用免疫组织化学染色检测闭锁小带蛋白-1（zonula occludin-1, ZO-1）和连接黏附分子-1（junctional adhesion molecule-1, JAM-1）的表达。将Pm与人口腔角质形成细胞（human oral keratinocytes, HOK）共培养,通过Transwell小室实验检测荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖4KD（FITC-dextran 4KD, FD4）的渗透量,观察Pm对HOK上皮屏障功能的影响,并采用qPCR检测ZO-1和JAM-1的表达改变。结果OLP患者病损组织中ZO-1、JAM-1的表达显著低于正常组织（P<0.01,P<0.0001）。FD4的渗透量随Pm浓度增加而增加（P<0.05）。Pm与HOK细胞共培养后,ZO-1、JAM-1表达均显著减少（P<0.005;P<0.05）,并随着Pm浓度增加或时间延长而降低。结论Pm可能通过抑制紧密连接蛋白ZO-1、JAM-1的表达而破坏OLP上皮组织屏障,从而侵入上皮组织导致慢性炎症,在口腔扁平苔藓发生发展中起到重要作用。     

针刺联合经颅微电流刺激治疗147例失眠症患者的临床观察

目的观察针刺联合经颅微电流刺激疗法治疗失眠症的临床疗效,观察非药物疗法对患者睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、睡眠障碍及日间功能障碍的影响。方法将2012年10月至2015年6月河北医科大学第一医院147例失眠症患者采用随机数字表法分为两组,联合组74例针刺百会、神庭、四神聪、印堂、神门、太冲、行间、阴陵泉、内关、大陵透劳宫等穴疏肝健脾养心,联合经颅微电流刺激疗法,两种方法均为每日1次;与西药组对照,西药组73例口服艾司唑仑1mg,睡前1次,两组均治疗30d。各组治疗前后评定匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评定量表,并评定各组总疗效。结果治疗1个月后,联合组痊愈9例,显效23例,有效26例,无效16例,有效率达78.4%,愈显率43.2%。西药组痊愈12例,显效24例,有效22例,无效15例,有效率79.5%,愈显率49.3%。治疗后PSQI量表分值比较,联合组(7.18±2.61)分,西药组(7.34±3.05)分,两组比较差异无显著性(P>0.05)。从PSQI评分比较,联合组对睡眠质量及日间功能障碍情况的改善明显优于西药组。结论针刺联合经颅微电流刺激治疗失眠症有较好疗效,与艾司唑仑疗效相当。针刺配合经颅微电流刺激疗法可能对改善睡眠质量及日间功能方面更具优势。     

癫痫持续状态大鼠内质网应激预适应对海马神经元保护作用的实验研究

目的 探讨2-脱氧葡萄糖诱导内质网应激预适应对癫痫持续状态大鼠海马神经元的保护作用及其可能机制。方法 采用2-脱氧葡萄糖连续腹腔注射诱导内质网应激,并在此基础上制备氯化锂-匹罗卡品癫痫持续状态大鼠模型。Nissl染色观察癫痫持续状态后海马神经元损伤情况、计数海马CA1和CA3区存活神经元数目;免疫组织化学检测海马CA3区内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和X盒结合蛋白1（XBP-1）表达变化。结果 与癫痫持续状态组相比,癫痫持续状态后第7天时内质网应激预适应组大鼠海马存活神经元数目增加,以CA1区显著（t=5.353,P=0.000）。癫痫持续状态组大鼠发作后6 h,海马CA3区GRP78和XBP-1表达水平升高且高于对照组（均P=0.000）,于发作第2天达峰值水平（均P=0.000）;内质网应激预适应组大鼠发作前海马CA3区GRP78和XBP-1表达即高于对照组（均P=0.000）,GRP78在发作后24 h和2 d时维持在峰值水平（均P=0.000）,XBP-1在发作后24 h达峰值水平（P=0.000）;内质网应激预适应组大鼠海马CA3区GRP78和XBP-1表达在癫痫持续状态前,以及癫痫持续状态后6、12、24 h均高于癫痫持续状态组（均P=0.000）,至第2和7天时与癫痫持续状态组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 经2-脱氧葡萄糖诱导的内质网应激预适应对癫痫持续状态大鼠海马神经元具有保护作用,而XBP-1-GRP78信号转导通路的活化可能是其机制之一。     

乳晕入路内镜下甲状腺切除术操作空间建立的研究

目的探讨在乳晕人路内镜下甲状腺切除术中建立操作空间的解剖平面。方法2012年6—12月45例行乳晕人路内镜下甲状腺切除术,注水针顶住胸骨柄在胸大肌浅筋膜的深面注射膨胀液,经胸骨上间隙进入颈深筋膜浅层后方建立操作空间。结果45例手术操作成功,分离操作空间的时间平均为6．8min（4～12min）。无神经及甲状旁腺损伤;无一例术后要求药物止痛;无皮肤灼伤、皮下瘀斑、皮下积液、颈部皮肤麻木;2例皮下脂肪液化经换药术后2周内治愈。术后颈部皮瓣水肿表现为胸骨上凹消失（38例）或隆起（7例）,1个月后均恢复正常,43例随访6～12个月,平均7．3月,诉颈部和胸壁皮肤绷紧感分别有24例和3例,在术后3～6个月内消失。结论在乳晕人路内镜下甲状腺切除术中,经胸大肌浅筋膜深面进入颈深筋膜浅层后方的方法建立操作空间简单、快速、暴露好,术后疼痛轻,皮肤并发症少。     

HSD3B1基因突变对去势抵抗型前列腺癌发生的影响

目的:评估HSD3B1基因1245位点突变在去势抵抗型前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)发生中的作用。方法:回顾性分析2004年1月~2011年1月在我院行睾丸切除术的103例前列腺癌患者临床资料,其中HSD3B1基因1245位点突变18例。依据位点突变结果,将103例患者分为突变组及正常对照组,分别比较两组的PSA下降一半时间、CRPC形成率、CRPC形成时间、死亡率及生存时间等。结果:两组术前指标无异质性。突变组在CRPC形成率方面较对照组高,差异有统计学意义;但在PSA下降一半时间、CRPC形成时间、死亡率及生存时间等方面差异无统计学意义。结论:HSD3B1基因1245位点突变可提高CRPC形成率,但并没有缩短患者的生存时间及增加患者的死亡风险。HSD3B1基因1245位点突变是否会对CRPC将来的治疗带来改变,尚需进一步研究。