MA或MOED方案联合造血生长因子动员自体外周血干细胞效果观察

目的：探讨米托蒽醌(MIT)为主的MA或MOED化疗方案联合造血生长因子对自体外周血干细胞(APBSC)的动员效果。方法：12例患者用MA联合造血生长因子动员方案(Ⅰ组)，8例患者用MOED联合造血生长因子动员方案(Ⅱ组)，两组均在白细胞(WBC)降至最低点开始回升时。皮下注射G-CSF或G-CSF+GM-CSF至采集结束。wBC恢复至＞2.5×109／L，CD34)+细胞比例＞1.0％时，用血细胞分离机连续2天采集APBSC。当累计采集的单个核细胞(MNC)达到4×108／kg以上时停止采集。以文献报道的环磷酰胺联合造血生长因子动员方案为对照(Ⅲ组)。结果：Ⅰ组动员方案在两次采集的CD34)+细胞数量优于Ⅱ组动员方案。Ⅰ组和Ⅱ组两种动员方案在第1次采集的CD34)+细胞数、采集次数、骨髓抑制强度方面优于Ⅱ组动员方案，但是第2次采集CD34)+细胞较少。20例患者连续采集APBSC 2次，共采集到MNC(4.36±2.08)×108／kg，CD34)+细胞(9.87±7.30)×106／kg，CFU-GM(2.86±2.10)×104／kg。18例接受自体外周血干细胞移植(APBSCT)者造血功能均获得满意重建。结论：以MIT为主的化疗联合造血生长因子是一种安全、高效的APBSC动员方法。     

人凝血因子Ⅷ体外高效表达体系的建立

目的 构建含有人凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因的慢病毒载体pXZ208-BDDhFⅧ,观察其在体外培养细胞中的表达情况.方法 用限制性内切酶酶切法获得B区缺失的人FⅧ基因(BDDhFⅧ cDNA)片段,将其克隆至慢病毒载体pXZ208的多克隆位点,构建慢病毒表达载体pXZ208-BDDhFⅧ,限制性内切酶酶切法鉴定载体的连接方向.采用三质粒共转染293T细胞制备病毒颗粒,包装后感染人肺、肾HLF细胞、张氏肝(Chang-Liver)细胞和成人骨髓基质细胞(MSC),并以pXZ171作为对照.流式细胞术(FCM)检测载体的感染效率,一期法检测细胞培养上清中FⅧ的活性,PCR检测BDDhFⅧ基因的整合.结果 成功构建了慢病毒载体pXZ208-BDDhFⅧ,包装后能有效感染多种靶细胞,感染效率分别为:HLF细胞(74.52±7.57)%、MSC(42.34±5.84)%和Chang-Live细胞(27.24±6.53)%.感染后48 h检测到HLF细胞、Chang-Liver细胞和MSC培养上清中有FⅧ的表达,FⅧ活性分别为(54.1±5.6)%、(22.5±2.9)%和(12.5±2.7)%.PCR检测到目的 基因的整合.结论 成功构建了慢病毒表达载体pXZ208-BDDhFⅧ,在体外可以有效感染多种靶细胞并表达有活性的FⅧ.     

乳房肿块为首发表现的慢性粒细胞白血病1例

患者女，35岁。因双侧乳房肿块1月于1991年12月12日入院。患者1月前无意中发现双侧乳房无痛性肿块，初为核桃大，后进行性增大，伴乏力，多汗及左上腹不适。外院按“乳房小叶增生症”治疗2局无效。体检，阵温37．2℃，脉搏84次／分，呼吸24次／分，血压14.3／9．3kpa。皮肤未见瘀点和瘀斑，浅表淋巴结未扪及，胸骨无雎痛，心肺无异常。     

再生障碍性贫血患者α_2-巨球蛋白测定分析

血小板减少是再生障碍性贫血(再障)出血的主要原因,近年来报道再障患者血液抗凝和纤溶系统有异常[1～3]。α2-巨球蛋白(α2-Ｍ)为血清中的一种高分子糖蛋白,是主要的蛋白水解酶抑制剂,具有广谱抗蛋白酶作用,本文通过测定36例再障血清α2-Ｍ的变化,初步探讨α2-Ｍ在再障出血机理中的作用。现报告如下。材料与方法检测对象　正常献血员39名,男24名、女15名,年龄14～58岁,平均26.5岁。36例再障均系初诊和住院复治病例,男22例、女14例,年龄12～68岁,平均24.5岁。诊断符合1987年宝鸡再障会议修订的标准,均为慢性再障,其中转化为阵发性睡眠性血红…     

杂合性白血病

收集17篇国内文献报道的杂合性白血病(HAL)26例。按Gale等提出的诊断建议标准对26例HAL的细胞形态学,细胞化学、电镜超微结构、免疫学和遗传学检查结果作了分析,其中淋巴细胞系和髓细胞系特征同时存在者14例,占53.8％,淋巴细胞系与髓细胞系特征先后出现者12例,占46.2％。结合文献复习,对26例HAL的诊断、临床特征、治疗、预后及病因予以综述。     

白血病红细胞免疫功能的观察

我们用多种指标检测27例白血病的红细胞、白细胞免疫功能,并与正常人作了比较。白血病患者红细胞 C_3b 致敏肿瘤细胞血凝检测与红细胞 C_3b 受体检测结果均比正常对照组降低(P<0.01),红细胞免疫复合物检查与循环免疫复合物检查结果均比正常对照组升高(P<0.01),而 CD_3、CD_4、CD_8、CD_(30)也比正常对照组降低(P<0.01)。提示白血病患者红细胞免疫与白血细胞免疫功能均低下。     

髓系抗原、P-糖蛋白和CD34抗原在急性淋巴细胞白血病中的表达及其意义

目的　探讨急性淋巴细胞白血病 (ALL)的髓系抗原、P 糖蛋白 (P gp)和CD3 4 表达特点及其与预后的关系。方法　采用间接免疫荧光法标记流式细胞仪 (FCM )检测 84例初治ALL患者的免疫表型。结果　ALL髓系抗原阳性率为 17.8% ,其中CD13 阳性最常见。CD3 4 表达阳性率为45 .3 % ,与髓系抗原表达和治疗缓解率无显著相关性。髓系抗原阳性组病例 (My ALL)肝脾肿大明显 ,白细胞总数增高显著 ,完全缓解 (CR)率明显低于阴性组病例 (P <0 .0 1)。P gp阳性表达率为 3 2 .1% ,P gp表达阳性与My ALL化疗效果有相关性。结论　My ALL细胞对于常规诱导缓解方案不敏感 ,选择兼顾ALL AML的方案可提高治疗效果。P gp高度表达与低CR率有密切关系     

急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因检测及临床意义

急性早幼粒细胞性白血病(APL)是一组累及 17号染色体上的维甲酸受体α基因,其中t(15;17)(q22;q21)易位后形成的早幼粒细胞性白血病(PML)/维甲酸受体α(RARα)融合基因在APL中的重视率最高,占90%以上[1].本研究以34例形态学诊断为APL患者和2例疑似APL患者为对象,采用筑巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患者PML/RARα融合基因,并追踪观察部分患者PML/RARα融合基因的动态变化,探讨其在诊断、疗效评估及预测预后中的意义.     

含绿色荧光蛋白的慢病毒载体的构建及表达

目的　构建以泛醌启动子 (PUB)驱动绿色荧光蛋白 (GFP)表达的慢病毒载体三质粒表达系统 ,并建立其包装细胞系获得GFP的表达。方法　载体的构建采用限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接等方法。三质粒系统中 ,转移质粒含PUB启动子及标志基因GFP ,包装质粒为ΔNRF ,内含CMV启动子和来自胰岛素基因的Poly(A)位点 ,包膜蛋白质粒编码水疱性口炎病毒G糖蛋白 (VSV -G)。载体构建成功后 ,用磷酸钙沉淀法将三质粒共转染来源于人胚肾细胞系的包装细胞——— 2 93T ,12h后在荧光显微镜下观察绿色荧光的表达情况。转染后 72h收集病毒上清 ,采用 6孔板培养感染细胞 ,荧光显微镜计数GFP阳性细胞法测定病毒滴度。结果　成功构建了含PUB启动子驱动GFP表达的质粒pXZ5。转染 2 93T细胞后 12h在荧光显微镜下均观察到较强的绿色荧光 ,证实了GFP的表达 ,成功构建了慢病毒载体的三质粒系统 ,建立了慢病毒载体的包装细胞系。 72h后 ,GFP的荧光强度较 12h增强 ,每一视野下 ,GFP表达阳性的细胞比例达 5 0 %左右。病毒浓度的测定在未进行超速离心浓缩的情况下达 2× 10 8U L。结论　成功构建了含PUB启动子驱动GFP表达的的慢病毒载体三质粒表达系统 ,转染2 93T细胞后获得了GFP的表达 ,完成了慢病毒载体包装细胞系的建立     

过氧化物酶染色阴性的急性非淋巴细胞白血病免疫诊断特点及其临床意义

作者报道一组急性白血病过氧化物酶（ＰＯＸ）染色阴性而无淋系相关抗原表达，但与一种以上髓系相关ＭｏＡｂ反应的ＰＯＸ阴性型急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）患者的免疫学特征。此组患者较同期化疗的急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）、ＰＯＸ（＋）ＡＮＬＬ反应差（Ｐ＜０．０１），病程短（Ｐ＜０．０２），提示ＰＯＸ（－）ＡＮＬＬ应按难治性急性白血病处理。