短发卡状RNA抑制AKT2基因表达增强卵巢癌细胞对紫杉醇敏感性的研究

目的：构建AKT2基因特异性短发卡状RNA（shRNA）真核表达载体，观察RNA干扰（RNAi）技术，对人卵巢癌A2780和SKOV3细胞中AKT2蛋白激酶表达的抑制作用，并探讨其促进细胞凋亡的机制。方法：运用基因工程技术，设计合成针对AKT2mRNA的特异性shRNA，构建真核表达载体pAKT2-shRNA。将pAKT2-shRNA经脂质体（Lipofectamine^TM 2000）包裹转染人卵巢癌A2780和SKOV3细胞，荧光显微镜观察细胞内DsRed红色荧光蛋白的表达，计算转染效率，半定量RT—PCR（Semi-quantitative RT-PCR）、蛋白质免疫印迹（Western blot）检测AKT2的表达及干扰效率，流式细胞学检测法（FACS）检测细胞凋亡率，比较抑制AKT2基因前后卵巢癌细胞抵抗凋亡能力。结果：成功构建了PAKT2-ShRNA载体。A2780和SKOV3细胞转染pAKT2-shRNA后，荧光显微镜下观察转染效率约40％；Semi-quantitative RT-PCR和Western blot检测结果示，转染后AKT2 mRNA和蛋白表达均显著降低。FACS检测结果显示，转染pAKT2-shRNA后，紫杉醇25nmol／L处理细胞12h，与空白对照组和阴性对照组相比，细胞凋亡率显著增加，P〈0．05。结论：构建的pAKT2-shRNA真核表达载体能有效抑制AKT2基因表达；运用RNAi技术，降低卵巢癌细胞中AKT2基因表达水平，能增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，促进肿瘤细胞凋亡。     

脓毒症患者血清降钙素原检测的临床价值

目的 探讨降钙素原(PCT)对脓毒症早期诊断和预后评估的价值.方法 采用前瞻性研究方法,随机选取脓毒症患者100例(总脓毒症组)、全身炎症反应综合征患者(SIRS组)37例、健康体检者(对照组)31例,又根据病情严重程度不同,将100例脓毒症患者,分成脓毒症组36例、严重脓毒症组40例、脓毒性休克组24例,分别测定各组血清PCT、C反应蛋白(CRP)、感染相关器官功能衰竭评分(SOFA评分),并进行相互比较,观察其与脓毒症诊断及预后的关系.结果 PCT、CRP在SIRS组[(3.1±2.3)μg/L、(34.7±28.0)mg/L]、总脓毒症组[(10.8±8.1)μg/L、(106.8±69.3)mg/L]较对照组[(0.3±0.2)μg/L、(4.1±2.9)mg/L]明显升高(均P<0.01),总脓毒症组与SIRS组比较,差异有统计学意义(P<0.01).PCT在脓毒症各组中随病情加重有不断升高趋势,且病死率也不断上升.最佳诊断脓毒症界值为:PCT>4.4 μg/L,CRP>51.8 mg/L,SOFA>4.0分.结论 PCT、CRP可以作为脓毒症早期诊断指标,有较高的特异性,PCT与SOFA评分联合检测是评估脓毒症病情严重程度的理想的量化指标.     

外周血循环标记物检测不稳定冠状动脉粥样硬化斑块

目的评价外周血循环标记物对不稳定冠状动脉粥样硬化斑块的早期预测价值。方法选择33例因胸闷、胸痛入院行冠状动脉造影的无冠状动脉性心脏病史患者,其中16例(不稳定斑块组)造影显示至少1处病变的狭窄<70%,血管内超声检查发现病变处有不稳定脂质软斑块;另17例(对照组)造影显示血管正常。采用酶联单克隆抗体夹心法(ELISA)检测血浆高敏肿瘤坏死因子(hsTNF)-α、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),用TransAMTM系统检测核因子(NF)-κBP65的活性,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMCs)中MCP-1 mRNA的表达。结果不稳定斑块组的MCP-1 mRNA表达为1.03±0.19,显著高于对照组的0.87±0.17(P=0.0122)。不稳定斑块组NF-κBP65活性为0.31±0.16,显著高于对照组的0.22±0.06(P=0.0001)。不稳定斑块组hsTNF-α、MCP-1水平分别为(1.662±0.014)、(192.83±25.24)ng/L,均显著高于对照组的(1.650±0.013)、(148.86±43.93)ng/L(P值分别=0.0195、0.0015)。结论冠状动脉轻中度狭窄处(<70%)的斑块常是一些性质不稳定的脂质动脉粥样硬化斑块,NF-κB、hsTNF-α、MCP-1在不稳定斑块患者外周血表达升高,因而检测外周血循环标记物可作为早期预测不稳定冠状动脉粥样硬化斑块的简便手段,有望替代有创性的影像学检查。     

激励机制在护理科研管理中的应用

我国护理界已充分认识到护理科研的重要性，正逐步完善护理科研管理的各个环节，其中激励机制在护理科研管理中具有重要的作用。管理心理学认为：“激励”指的是激发人的动机的心理过程，将它运用于护理科研管理，就是调动护理人员的科研积极性，提高护理科研水平，推动临床护理学的发展。     

北京市居民食物消费模式的调查

根据北京市居民饮食习惯、各类食物摄入频率与膳食结构的状况，并与中国居民平衡膳食宝塔中各类食物的参考摄入量相比较，了解居民的膳食结构模式及个体间的差异，以供进一步研究饮食习惯与健康的关系。     

2型糖尿病简易胰岛素抵抗测定方法的比较研究

目的：探讨几种简易胰岛素抵抗（IR）测定方法的准确性，为临床评价IR提供客观指标。方法：用基础状态法中4种不同表达方法以及口服葡萄糖耐量试验对90例2型糖尿病患者体内IR程度进行检测，计算胰岛素敏感指数（ISI）。以定量胰岛素敏感性检测指数（QUICKI）作为标准，其余方法得出的ISI与之进行相关分析。结果：1／FINSxFBG法、HOMA法和OGTY法的ISI与QUICKI相关系数分别为0．98、0．92、0．61（P〈0．05），FBG／FIns的ISI相关系数为0．42（P〉0．05）。结论：基础状态法中1／FINSxFBG法和自我平衡模型分析（HOMA）法与QUICKI法相关性较好．是两种简单、能较准确地评价IR的方法；OGTY法也能够粗略地评价体内IR程度；而由FBG／FINS计算出的ISI相关件较苹．县一种不可靠的柃测IR方法．     

晶状体超声乳化术中对瞳孔不能散大者的处理

目的探讨白内障施行晶状体超声乳化时对瞳孔不能散大者的处理措施。方法24例(24眼)瞳孔不能散大的白内障术中经巩膜或角膜隧道切口进入前房,以黏弹剂及黏弹剂弯针头分离虹膜或以囊剪行瞳孔缘剪开,瞳孔散大至5~6mm,环形撕囊或截囊,行晶状体超声乳化囊袋内植入人工晶状体,术后观察视力、瞳孔及眼部反应。结果经术中处理后瞳孔可散大至5~6 mm,术后瞳孔恢复圆形,视力均≥0.5,眼部无异常反应。结论白内障合并瞳孔不能散大者经术中处理瞳孔,可顺利实施超声乳化和人工晶状体植入术,术后获得良好视力和圆瞳孔,无并发症。     

不当使用外用药物致创面脓毒症并发多脏器功能障碍1例

1临床资料 患者，男，43岁，在家中被火焰烧伤全身后即以自制中药外敷，伤后3d送当地医院住院治疗，创面外用药未予调整，另外静脉滴注氨曲南抗感染。因发热、全身水肿伴呼吸困难及腹胀于伤后5d转入我院。入院时查体：意识清楚，烦躁，全身肿胀伴球结膜水肿，体温39．8℃，脉搏125次／min，呼吸55～60次／min，血压140／85mmHg（1mmHg=0．133kPa），呼吸困难，两肺呼吸音粗糙，未闻及干湿性哕音，腹部膨隆，无压痛，肠鸣音弱，1次／min。头颈部、躯干、四肢烧伤，总面积50％TBSA，     

大龄儿童便秘的手术治疗

目的 了解手术治疗大龄儿童便秘的远期疗效.方法 回顾性分析14例大龄便秘儿童(年龄大于10岁)在我科手术治疗的临床资料,并对其进行随访.随访内容包括每日大便次数及大便性质.结果 14例患儿男9例.女5例.年龄10～18岁.平均12.8岁.术后病理诊断为先大性巨结肠症9例,IND2例、乙状结肠冗长2例、神经节细胞减少症1例.结肠部分切除、结肠肛管心形吻合10例,Soave手术3例,改良Rehbein手术1例.所有患儿术后均痊愈出院.无吻合口瘘、吻合口狭窄.1例IND在腹腔镜辅助下行结肠部分切除、结肠肛管心形吻合术,术后便秘复发,再次手术后大便轻度失禁.其余患儿术后随访2～12年.大便均成形,1日1次者7例.1日2次者3例,2日1次者3例,1日3次者1例.术后有4例发生肠炎,均经保守治疗后痊愈.结论引起大龄儿童便秘的原因多种多样.根据不同病因采用相应的手术方法 治疗大龄儿童便秘可取得满意的疗效.     

Livin在小细胞肺癌中的表达及与p53相关性研究

目的 探讨凋亡抑制蛋白Livin在小细胞肺癌(SCLC)组织中的表达及其与p53之间的关系.方法 采用免疫组织化学染色S-P法检测Livin和p53在30例SCLC组织和16例癌旁正常肺组织中的表达情况.结果 Livin在SCLC组织中的表达率为56.67%,明显高于癌旁正常肺组织的12.50%(P＜0.01). Livin的表达与患者年龄、性别、肿瘤的TNM分期、淋巴结转移和肿瘤大小均无关(P＞0.05).30例SCLC组织中有14例(46.67%)p53表达,而16例癌旁正常肺组织中无p53表达,两者之间差异有统计学意义(P＜0.01).在SCLC组织中Livin与p53表达呈正相关(P＜0.01).结论 Livin在SCLC组织中异常表达,有望成为SCLC诊断和基因治疗的新靶点.Livin与p53的异常表达可能在SCLC癌变中起协调作用.