VEGF和Smad7双基因过表达慢病毒载体的构建

目的：构建过表达VEGF和Smad7双基因的慢病毒载体,为勃起功能障碍基因治疗的研究提供有效工具。方法：根据GenBank中基因信息,设计合成VEGF和Smad7引物,采用overlap PCR方法扩增目的基因片段,运用基因重组技术将其克隆至慢病毒表达载体Ubi-MCS-3FLAG-CBh-gcGFP-IRES-puromycin,经酶切、测序对重组质粒进行验证。将重组质粒和Helper1.0、pHelper2.0辅助质粒共转染293T细胞,包装双基因过表达慢病毒并测试其滴度。结果：经酶切和测序鉴定表明VEGF和Smad7双基因重组慢病毒载体构建成功,荧光法测定重组慢病毒滴度高（2E+8TU/mL)。VEGF和Smad7重组慢病毒能高效转染293T细胞,Western blot检测显示VEGF和Smad7蛋白在靶细胞中过表达。结论：成功构建了携带VEGF和Smad7基因并能正确表达的高滴度的重组慢病毒载体。     

六神曲炒制工艺的改进

六神曲按中医临床使用多以炒焦入药,习惯上多采用清炒法或用少量焦麸皮混炒。我省炮制规范要求以呈外黑内老黄色为度。在炒制过程中往往不易掌握好火候,并且焦化时起浓烟呛人。我们对此进行了改进,具体做法是。选秫米粒样大小的砂约3斤,油     

考核改革与培养能力

长期以来,由于旧的传统教育思想的束缚,习惯于理论知识的机械传授,单纯强调课堂教学方式的现象,在当前教育改革中尽管有所克服,但在一定程度上还依然存在着.导致学生对知识的死记硬背,不能灵活运用,动手能力差的被动学习局面.为适应四化要求,如何迅速扭转这一情况,培养学生的主动探索精神,逻辑思维能力,独立处理问题的水平,以培养“能力”为中心的教育思想的稳固建立是十分必要的.     

关于药品批准文号知识简介

一个护理人员,几乎天天都要与药品打交道。因此,护士应懂药品批准文号、批号知识。一、药品批准文号药品批准文号,是表示该药品系何年经那一级审批许可生产的。目前我国对药品审批权限,是实行三级管理:即中央、省、市三级。如:沪卫药准字(82)第0828号。表示该药品于1982年经上海市卫生局药品管理第0828号文件批准生产。以此类推。熟悉了解药品批准文号,有如下意义:(1)可以帮助识别药品的类别,是属于治疗药品,还是保健营养滋补药物,以利管理。(2)有批准文号的药品,说明已经国家有关部门审查批准,已取得可靠的临床验证,使用时可以放心。(3)根据有无批准     

套切法治疗大肠息肉 265例

我科近５年来采用经纤维肠镜套切法治疗大肠息肉２６５例，现分析报告如下。临床资料：２６５例肠息肉患者施行套切治疗，其中男１６７例，女９８例，男女之比为１．７：１。年龄２～８４岁，中位年龄４３岁。４０岁以上１７４例，占６５．７％，低于２０岁者３５例，占１３．２％。常规术前准备，术前１５min注射阿托品１mg及哌替啶５０mg。进镜至回盲部后退镜观察，发现息肉予以套摘。如摘切前已行全肠镜检查，则进镜至所见息肉为止。套切采用混合电凝电切法，电灼切时间每次不超过１．５s。息肉过大则采用分次套切法。息肉离断后复查残基…     

胃肠道恶性肿瘤TSGF测定及其价值的初步评估

恶性肿瘤生长因子（ＴＳＧＦ）是一种与恶性肿瘤血管增殖有关的新型肿瘤标志物。已有文献报道它具有广谱性、敏感性及特异性高等特点［１、２］。我们通过对正常人群及胃肠道肿瘤患者血清中ＴＳＧＦ含量的测定和对比评估，认为这种方法对消化道肿瘤具有灵敏、广谱、快速、...     

上消化道钡剂造影诊断胰胆管返流及临床分析

目的探讨X线造影诊断胰胆管返流征象。方法对本组100例患者的CT、B超、实验室及临床资料进行回顾分析总结。结果100例中X线诊断慢性胰腺炎55例，占55％，2例为急性胰腺炎，占2％，2例为胰腺囊肿，占2％，阳性率60％，无阳性发现者38例，占38％。结论通过高清晰X线透视机上消化道钡餐检查，对胰胆管返流有着较高的诊断率。     

结直肠癌缺陷基因201密码子点突变与大肠癌生物学特性研究

目的　探讨结直肠癌缺陷 (deletedincolorectalcarcinoma,DCC)基因 2 0 1密码子 (codon2 0 1)点突变与大肠癌生物学特性的关系。方法　采用等位基因特异性 (allele specific)PCR扩增技术结合限制性片段长度多态性 (restrictedfragmentlengthpolymorphism ,RFLP)检测 40例正常人大肠粘膜、35例大肠癌组织及相应癌旁正常粘膜的 2 0 1密码子突变情况。结果　大肠癌组织及癌旁正常粘膜2 0 1密码子突变率分别为 71% (2 5 / 35 )和 6 0 % (2 1/ 35 ) ,两者差异无显著意义。但与正常对照组 33%(13/ 40 )相比 ,显著增高 (χ2 =5 6 96 3,P <0 0 2 5 )。伴淋巴结转移组和DucksC、D群明显高于无淋巴结转移组和DukesA、B期 ,而与患者性别、年龄、癌的分级、分型等因素无关。结论　DCC基因 2 0 1密码子突变是大肠癌发生中的早期基因事件 ,且与其转移能力的加强密切相关。     

腹膜腔化疗及联合使用生长激素对小鼠结肠癌肝转移的影响

目的　研究腹腔化疗及联合使用重组人生长激素(rhGH)对小鼠结肠癌肝转移的影响。方法　42只BALB/c小鼠以小鼠结肠癌细胞(CT26)经脾接种建立肝转移模型后随机分为3组，化疗组小鼠每日腹膜腔注射5-Fu20mg/kg；联合组在化疗组基础上每日皮下注射rhGH2IU/kg；对照组仅以生理盐水分别行皮下及腹膜腔注射，疗程7天。2周后部分动物处死，观察肝转移情况，其余动物待其自然死亡以比较生存期。　结果　联合组血浆总蛋白明显高于化疗组和对照组(P<0.01)。与对照组相比，化疗组和联合组的肝转移发生率较低，转移瘤数目较少，肝脏重量明显较低(P<0.05)，小鼠生存期延长近一倍(P<0.05)。联合组肿瘤细胞周期中静止期(G0/G1期)细胞百分比高于其他两组(P<0.05)。肿瘤细胞增殖指数(PI)在联合使用rhGH组显著降低(P<0.05)。　结论　腹腔化疗明显降低小鼠结肠癌肝转移的发生，延长生存期；给予rhGH可以调整细胞增殖周期，提高周期特异性化疗药物的敏感性，降低肿瘤细胞增殖活性。     

抗结直肠癌缺陷蛋白合成肽单克隆抗体的制备与初步鉴定

目的 制备针对结直肠癌缺陷（ｄｅｌｅｔｅｄ ｃｏｌｏｒｅｃｔａ ｃａｒｅｉｎｏｍａ,ＤＣＣ）蛋白抗原决定簇多肽的单克隆抗体。方法 用合成的ＤＣＣ蛋白抗原决定簇多肽（氨基酸序列从１９５～２０４）为抗原,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,经细胞融合,有限稀释法筛选出能分泌抗ＤＣＣ合成肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并对单克隆抗体进行了初步鉴定。结果 细胞融合率７５％,经３次亚克隆,最后保留一株能稳定分泌抗ＤＣＣ民肽单