Stathmin及Cathepsin B在结直肠癌中的表达

目的研究Stathmin和Cathepsin B在人结直肠癌组织及其转移灶中的差异表达,探讨Stathmin和Cathepsin B在结直肠癌发生发展过程中的作用及其临床病理意义。 方法用免疫组织化学染色技术检测158例高分化,中分化及低分化结直肠癌患者手术切除标本及64例相应转移灶组织中Stathmin蛋白和Cathepsin B蛋白的表达情况。 结果Stathmin蛋白及Cathepsin B蛋白在结直肠癌组织及其转移灶中均高表达;高分化结直肠癌样本中Stathmin蛋白及Cathepsin B蛋白在细胞膜或细胞浆阳性表达,而在低分化结直肠癌细胞核,细胞膜及细胞浆中可见二者的阳性表达。 结论Stathmin及Cathepsin B可能是判断结直肠癌患者临床病理分级的有用指标。     

胃肠道间质瘤组织中基质金属蛋白酶2和9表达与血管生成拟态的关系

目的 探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9和血管内皮生长因子(VEGF)在胃肠道间质瘤(GIST)组织中的表达与血管生成拟态(VM)的关系.方法 收集84例GIST患者石蜡包埋肿瘤标本(有VM者21例),以免疫组织化学染色指数评定MMP-2、MMP-9和VEGF的表达.另收集42例GIST患者组织标本库储存的新鲜肿瘤标本(有VM者22例),以明胶酶谱技术检测肿瘤组织中MMP-2和MMP-9活性.结果 84例GIST患者中,有VM组患者MMP-2和MMP-9免疫组织化学染色指数(分别为4.10±2.05、3.43±1.89)明显高于无VM组(分别为2.98±1.97、2.38.4±1.84,均P<0.05);VEGF免疫组织化学染色指数差异无统计学意义.42例GIST患者中,有VM组患者MMP-2和MMP-9活性(分别为3.62±3.95、4.77±5.29)均明显高于无VM组(分别为1.26±l.21、2.11±1.54,均P<0.05).结论 GIST中MMP-2、MMP-9表达与VM形成具有一定相关性.     

乳腺癌miRNAs表达谱的检测

目的检测人乳腺癌石蜡组织及人乳腺癌细胞株中miRNAs的表达情况,初步筛选人乳腺癌miRNAs表达谱。方法(1)应用组织微阵列平台,采用原位分子杂交技术对91例人乳腺癌和26例癌旁乳腺组织标本42种miRNA进行检测;(2)培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和正常乳腺上皮细胞株HBL-100,分别抽提细胞总RNA,分离小分子RNA,荧光标记后与miRNAs微阵列杂交,通过芯片扫描和数据分析,获得人乳腺癌miRNAs表达谱。结果(1)与癌旁乳腺组织相比,14种miR-NAs在乳腺癌组织中的表达发生了显著变化(P0.05),其中9种表达上调,5种表达下调。(2)利用miRNAs微阵列,筛选获得71种与人乳腺癌相关miRNAs,与正常乳腺上皮细胞相比,34种miRNAs表达上调,37种表达下调。结论筛选出与乳腺癌相关的差异表达miRNAs,为进一步研究其在乳腺癌中的作用奠定基础。     

线形程序性坏死在不同肿瘤局部微环境中分布的初步观察

目的:观察肿瘤局部微环境对肿瘤细胞发生线形程序性坏死(LPPCN)的影响.方法:C57BL小鼠9只,结扎小鼠左后肢股动脉,注射B16单细胞悬液于左后肢(缺血组)和右后肢(对照组),构建B16F10小鼠黑色素瘤后肢缺血模型;C57BL小鼠10只,注射B16单细胞悬液于小鼠腹腔(腹腔组)和左后肢(后肢组),构建小鼠黑色素瘤生物力学模型;HE切片观察不同组间LPPCN分布的差别;免疫组织化学染色检测肿瘤组织基质金属蛋门酶(MMP)-2、MMP-9的表达.结果:LPPCN细胞百分率比较,缺血组高于对照组,后肢组高于腹腔组,差异均有统计学意义(均P＜0.01);MMP-2、MMP-9阳性细胞百分率比较,缺血组高于对照组,后肢组高于腹腔组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论:肿瘤局部缺氧和压力变化可以上调MMP-2、MMP-9的表达并诱导肿瘤细胞发生LPPCN.     

乳腺癌转移相关基因表达蛋白组织微阵列的初步研究

目的:通过MMP2、P27Kipl、纤维连接蛋白(fibronectin)、MDM2、P21WAF1免疫组化染色,分析上述不同蛋白在乳腺癌组织中的表达,探讨乳腺癌转移相关分子生物学机制.方法:收集具有淋巴结转移的乳腺癌病例100例,制作成组织芯片,进行MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1免疫组化染色,根据染色指数(staining index,阳性细胞百分数×染色强度)对乳腺癌原发灶和转移灶进行统计学处理,分析上述不同指标在乳腺癌转移中的作用.结果:100例乳腺癌标本中,转移灶MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1的表达均高于原发灶肿瘤组织的表达,其中转移灶MMP2、P27Kipl、fibronectin、P21WAF1的表达与原发灶的差别具有统计学意义,P＜0.05.结论:MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1表达相关基因可能参与乳腺癌转移,肿瘤细胞表达MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1蛋白增加,可能更易于其转移和浸润.从另外一个侧面说明:在乳腺癌演进的过程中,肿瘤细胞获得侵袭能力可能不是由单个基因进行调控的,而是多个基因相互协调作用的结果.     

MVD及VEGF、TGFβ1表达与肺癌转移预后之间的关系

目的:探讨微血管密度(MVD)及VEGF、TGFβ1表达与肺癌转移和预后之间的关系,分析VEGF、TGFβ1共同表达在预测肺癌预后上的意义。方法:对病理确诊的原发性肺癌89例,按有无淋巴结转移、远处转移及5年生存期限分别分组,并进行MVD计数和VEGF、TGFβ1免疫组化染色。染色结果进行统计学分析,结合随访资料探讨MVD及VEGF、TGFβ1与肺癌转移预后中的作用。结果:MVD与淋巴结转移、远处转移密切相关(P<0.01),在肺癌5年生存期限上MVD的差别也有显著意义(P<0.01)。TGFβ1表达在淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P<0.01);有远处转移组TGFβ1、VEGF表达也明显高于无远处转移组肺癌的表达(P<0.01);VEGF、TGFβ1共同表达5年以上生存组明显低于5年以下生存组。结论:MVD及VEGF、TGFβ1表达是预测肺癌淋巴结转移和远处转移及预后的良好指标。VEGF、TGFβ1共同表达可以促进肺癌血管形成和肿瘤细胞转移。     

MMP-2、MMP-9的表达与脉络膜黑色素瘤微血管密度及肿瘤转移的关系

目的 探讨恶性脉络膜黑色素瘤细胞中基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2） 和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）的表达特征及其与血管生成的关系及预后意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测56例（56眼）脉络膜黑色素瘤细胞中MMP-2、MMP-9的表达特征,以CD34标记检测微血管密度（microvessel density,MVD）并分析其与肿瘤血管生成及肿瘤转移的关系.结果 56例患者中MMP-2和MMP-9的表达阳性率较高,分别为91.07%和96.42%,两者的表达强度呈正相关关系（r=0.45,P=0.001）;有转移病例出现MMP-2、 MMP-9高表达的比例明显高于无转移病例（P=0.004,P=0.006）;MMP-2 、MMP-9高表达者的MVD明显大于其低表达者（P=0.025,P=0.021）.结论 MMP-2和MMP-9的过度表达可能与脉络膜黑色素瘤血管生成及肿瘤转移有关.     

内皮抑素抑制黑色素瘤血管生成的实验研究

【目的】研究内皮抑素对黑色素瘤血管生成的影响,及其对肿瘤细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响,并阐述其相关分子机制。【方法】C57/BL6小鼠40只,建立小鼠B16黑色素瘤动物模型,分为内皮抑素组和空白对照组,比较两组肿瘤内血管生成拟态(VM)和内皮依赖性血管的数目;构建组织芯片,应用免疫组织化学技术染色检测肿瘤组织PCNA的表达;电镜观察两组肿瘤内微血管的超微结构变化。【结果】实验组肿瘤中VM和内皮依赖性血管数量均少于对照组,且差别有统计学意义;实验组PCNA表达阳性率与对照组相比差异有统计学意义。【结论】内皮抑素可抑制黑色素瘤内皮依赖性血管和拟态样血管的生长,进而影响肿瘤细胞PCNA的表达。     

胃肠道间质瘤中血管生成拟态初步研究

目的：研究胃肠道间质瘤中是否存在血管生成拟态及临床意义.方法：收集84例CIST标本及临床病理资料．CD31／PAS双重染色结合CD117、CD31免疫组化染色证实VM存在，分析VM与患者临床病理指标之间的关系结果：84例GIST中21例具有VM；核分裂数≥5个／50HPF组和〈5个／50HPF组和有无肝转移组间VM阳性率差别有统计学意义（P=0．000，0．008）。极低危／低危组、中危组和高危组三组VM阳性率分别为5．9%，12．5％，39.5％，三组之间VM阳性率差异有统计学意义（P=0．010，0．020）Kaplan—Meier生存分析提示有VM组和无VM组生存时间差异有统计学意义（P=0．0000）.Cox比例风险模型分析表明有VM、肿瘤大小≥10cm和出血是影响GIST患者预后的危险因素（P=-0．000．0．005，0．032）=结论：GIST中存在VM，VM是影响GIST患者预后的不利因素，有VM的患者易发生肝转移．预后比无VM的患者差、     

染矽尘大鼠肺组织不同时间点FasL表达与细胞凋亡

目的探讨染矽尘大鼠肺组织FasL表达及细胞凋亡在矽肺病理变化中的意义。方法将96只Wistar大鼠随机分为对照组和染矽尘组。对染矽尘组以暴露式气管内一次注入二氧化硅粉尘悬液(1 ml,0．2 g/kg)建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入1 ml灭菌生理盐水。分别于处理后1、3、7、14、21和28 d,每组分别取8只大鼠处死取肺组织,用组织芯片技术结合免疫组化SP法检测大鼠肺组织不同时间点FasL的表达;末端脱氨核苷酸转移酶末端标记技术(TUNEL)法检测大鼠肺组织细胞凋亡,并采用Image-Pro Plus Version 4．5 for windowsTM图像分析计算积分光密度。结果染矽尘组大鼠肺组织FasL在染矽尘后的7、14、21和28 d时,表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),14 d时表达最高为157．50±23．12;染矽尘组大鼠肺组织凋亡阳性细胞在染矽尘后的1、3、7、14、21和28 d时,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),7和14d,分别最高为32．95±20．40和31．07±7．15。结论矽尘能导致肺组织细胞凋亡;FasL在染矽尘大鼠肺组织多种细胞中表达并介导细胞的凋亡,凋亡细胞主要以炎性细胞为主。