氢饱和生理盐水对重症急性胰腺炎肾损伤的保护作用

目的 探讨氢饱和生理盐水对急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠肾损伤的保护作用及其机制.方法 雄性Wistar大鼠54只,按数字表法随机分为假手术组、ANP组和氢饱和生理盐水处理（HRS）组,每组18只.采用胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠方法制备ANP模型.HRS组在造模成功后5 min尾静脉注射HRS6 ml/kg体重,并皮下滴注HRS 20 ml/kg体重.假手术组大鼠开腹后仅翻动十二指肠和胰腺后关腹.假手术组和ANP组大鼠在术后5 min经尾静脉注射生理盐水（6 ml/kg体重）,并皮下滴注生理盐水（20 ml/kg体重）.术后3、12、24 h分批处死大鼠,取血检测血淀粉酶、肌酐、尿素氮含量.取新鲜肾组织制备匀浆,检测其丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性.取肾脏及胰腺组织行常规病理检查,并在透射电镜下观察肾组织的超微结构.结果 ANP组12 h时的血淀粉酶、肌酐、尿素氮水平,肾脏组织病理评分,MDA含量分别为（5396±500） U/L、（80.3±11.6） U/L、（14.1±2.1）U/L、（448.3±36.8）分、（7.03±0.85） nmol/mg,均较假手术组显著升高（P值均＜0.05）;SOD活性为（35.2±5.28） U/mg,较假手术组显著降低（P＜0.05）.HRS组的相应值分别为（5448±967） U/L、（41.9±8.6） U/L、（7.2±1.3）U/L、（315.2±39.6）分、（5.15±0.35） nmol/mg,较ANP组均显著下降,但仍显著高于假手术组（P值均＜0.05）;SOD活性为（49.1±6.79） U/mg,较ANP组显著升高,但仍显著低于假手术组（P值均＜0.05）.结论 氢饱和生理盐水对ANP大鼠的肾损伤具有一定程度的保护作用,其机制可能与抗氧化应激有关.     

本科生导师制度对于八年制临床医学生学习及科研能力的影响

目的 评价本科生导师制度对八年制临床医学生学习及科研能力的影响。方法 2021年6—9月,以已完成本科阶段学习的八年制临床医学生为研究对象,随机调查104名学生,有效数据101名（有效率97.1%）,导师组54名,非导师组47名。以问卷调查的形式,从学习成绩、科研产出、自我评价、对导师的满意度等方面进行数据收集及分析。结果 客观指标：两组学生本科阶段考试成绩差异无统计学意义（P> 0.05）;导师组学生参加大创数量、论文发表评分显著高于非导师组,差异有统计学意义（P <0.05）。主观指标：导师组学生在科研主观满意度中的六项指标均显著优于非导师组,差异有统计学意义（P <0.05）,且学生对导师具有较高的满意度。综合评价：导师组学生科研能力综合评分显著高于非导师组学生,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 本科生导师制度提高了八年制临床医学生科研能力及增加了科研产出,该制度对学生的专业素养、学习方法及人生规划等方面均有益处。     

胰岛素瘤的诊治进展

胰岛素瘤来源于胰岛β细胞,是最常见的胰腺内分泌肿瘤。根据典型的Whipple三联症和生化指标,胰岛素瘤的定性诊断并不困难,但定位诊断仍是临床难点。定位诊断优先考虑螺旋CT、胰腺灌注及内镜超声等新技术。目前,手术切除是根治胰岛素瘤的唯一有效手段。手术方式的选择,良性胰岛素瘤可选择腹腔镜剜除术,对肿块较大或具有潜在恶性胰岛素瘤仍以开腹手术为宜,失去手术机会的恶性胰岛素瘤则选择药物治疗。本文着重对该病的定性诊断、定位诊断,腹腔镜剜除术、开腹手术以及药物治疗做简要概述。     

重组毕赤酵母中Textilinin-1基因拷贝数的荧光定量PCR法检测

 目的 利用荧光定量PCR法检测重组毕赤酵母外源纤溶酶抑制剂Textilinin-1基因的拷贝数。方法 采用双标准曲线法,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH）基因为内源参照基因,分别利用含有GAPDH和Textilinin-1基因的质粒,进行荧光定量PCR反应,建立标准曲线。对重组毕赤酵母基因组进行荧光定量PCR反应,通过标准曲线计算出外源Textilinin-1基因在毕赤酵母基因组中的拷贝数。结果 GAPDH和Textilinin-1基因的扩增效率分别95.04%和96.36%,两条标准曲线的决定系数均为0.999,且均具有良好的重复性,共检测10个单菌落,均得到Textilinin-1基因拷贝数为2。结论 建立的方法能够鉴定重组毕赤酵母中Textilinin-1基因的拷贝数。     

氢饱和生理盐水在重症急性胰腺炎肝损伤中的抗氧化应激作用及对丝裂原活化蛋白激酶通路的影响

目的 观察氢饱和生理盐水(HRS)对于急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肝脏活性氧自由基(ROS)激活的丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)通路的影响,并探讨其对于ANP大鼠肝脏的保护作用.方法 90只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(SO)组、ANP组和HRS组,每组分为3、12、24h3个亚组(n=10).逆行胆胰管注射5％牛磺胆酸钠制备ANP模型,SO组仅开腹翻动胰十二指肠后关腹.HRS组术后尾静脉补充HRS 6 ml/kg,同时皮下注射HRS 20 ml/kg,其余各组同等剂量给予生理盐水.术后分组剖杀,检测血清血淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIP)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST).取胰头及肝组织固定切片,观察病理改变并评分或分级,免疫组织化学检测肝脏组织中磷酸化c-jun氨基端激酶(p-JNK)、p-p38及磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)表达.检测新鲜肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平.结果 各时间点ANP大鼠血清AMY(U/L)(5 385±572比1 146±121)、LIP(U/L)(1 924.9±105.4比86.5±8.9)、ALT (U/L)(156.9±15.8比56.1±5.4)、AST (U/L)(448.5±53.0比124.6±14.7)以及胰腺肝脏病理评分[(13.79±1.36)比(0.38±0.53)分]较SO组均显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05);HRS组AMY(U/L)(5 567±512比5 385 ±572)、LIP (U/L)(1 856.8±149.3比1 924.9±105.4)较ANP组下降,但差异无统计学意义(P＞0.05).HRS组ALT(U/L)(134.8±11.8比156.9±15.8)、AST(U/L)(326.6±20.5比448.5±53.0)及肝脏的病理分级(17.1比23.1)较ANP组有显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);ANP组肝脏组织SOD(U/mg)(127.2±11.6比267.4±33.2)活性水平较SO组有明显降低,MDA (nmol/mg)(12.6±3.1比3.9±1.7)水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),HRS组肝脏组织中SOD (U/mg)(177.4±12.5比127.2±11.6)活性较ANP组有显著升高,MDA(nmoL/mg)(9.7±2.3比12.6±3.1)含量显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).ANP组肝脏组织中p-JNK(121.40±10.70比2.60±0.45),p-p38(63.1±6.9比16.2±1.7),p-ERK(7.10±1.40比0.90±0.04)水平比较于SO组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),HRS组p-JNK(51.30±9.70比121.40±10.70)及p-p38(16.2±1.7比63.1±7.0)水平比较于ANP组有显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05),但p-ERK(6.70±1.30比7.10±1.40)表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HRS可有有效的降低ANP大鼠肝脏氧化应激,从而减少ROS对JNK及p38通路的激活,从而对ANP大鼠肝脏起到保护作用.     

MIF抑制剂ISO-1在妊娠大鼠重症急性胰腺炎肺损伤中的作用

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在孕鼠重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤中的作用.方法 30只晚期SD孕鼠使用随机数字表法随机分为孕鼠组(SO组)、孕鼠SAP组(SAP组)和孕鼠MIF抑制剂ISO-1预处理组(ISO-1组),每组均为10只.逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型.术后12 h处死大鼠取血检测血清淀粉酶(AMY).取胰腺组织及肺组织行病理学检查并评分,免疫组化检测肺组织中MIF、核因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达.结果 SAP组孕鼠的血清淀粉酶(AMY)、胰腺及肺组织病理评分较SO组均有显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);SAP组孕鼠肺组织中的MIF、NF-κB及TNF-α表达较SO组也显著增强,差异有统计学意义(P<0.05).ISO-1组上述指标较SAP组均有显著改善,差异有统计学意义(P<0.05).MIF的表达与NF-κB及TNF-α的表达均呈正相关,相关系数分别为r=0.815和r=0.787,P<0.05.结论 MIF抑制剂ISO-1对孕鼠急性重症胰腺炎肺损伤具有一定的保护作用,其部分机制可能与抑制NF-κB及TNF-α的激活有关.     

胸腺素β4对重症急性胰腺炎大鼠的保护作用

目的 探讨胸腺素β4腹腔注射给药对重症性胰腺炎大鼠的保护作用及机制.方法 雄性SD大鼠54只,随机(随机数字法)分为3组:假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、胸腺素β4预处理组(Tβ4组),每组18只.采用5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制备大鼠SAP模型,Tβ4组在造模前30 min经腹腔注射胸腺素β4(6 mg/kg),术后3、6、12h分批剖杀大鼠,各时间点6只.检测血清淀粉酶、TNF-α、IL-1β及IL-6水平,光镜观察胰头部组织病理变化,Western blot检测胰腺组织NF-κB p65和IκB α蛋白表达水平.多个样本均数比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验.结果 SAP组(3、6、12 h)血清淀粉酶分别为(3221 ±394) U/L、(4509±474) U/L和(6280±728) U/L,高于相应时间点Tβ4组的(2598±416) U/L、(3639±373) U/L和(4782±466) U/L,差异具有统计学意义(t=-2.666,-3.530,-4.245,P＜0.05);SAP组(3、6、12 h)TNF-α分别为(247.7±18.5) pg/mL、(313.5±17.7) pg/mL和(359.3±22.6)pg/mL,均高于Tβ4组相应时间点的(182.3 ±13.6) pg/mL、(258.9±14.9)pg/mL和(278.1±16.3)pg/mL,差异具有统计学意义(t=-6.964,-5.769,-7.152,P＜0.05);SAP组(3、6、12 h)IL-1β分别为(258.2±10.5) pg/mL、(345.1±22.0) pg/mL和(430.9±25.4) pg/mL,均高于Tβ4组相应时间点的(170.3±12.4) pg/mL、(263.5±13.3) pg/mL和(303.7±16.1)pg/mL,差异具有统计学意义(t=-13.258,-7.762,-10.355,P＜0.05);SAP组(3、6、12 h)IL-6分别为(266.3±11.5) pg/mL、(355.0±24.4) pg/mL和(429.2±33.7) pg/mL,均高于Tβ4组相应时间点的(171.1±13.0) pg/mL、(234.9±19.2) pg/mL和(277.2±19.2)pg/mL,差异具有统计学意义(t=-13.401,-9.474,-9.582,P＜0.05);SAP组(3、6、12 h)胰腺病理评分分别为(6.25±0.94)分、(8.83 ±0.82)分和(12.08±1.16)分,显著高于Tβ4组相应时间点的(4.17±0.93)分、(6.33 ±0.82)分和(7.33±1.25)分,差异具有统计学意义(t=-3.867,-5.303,-6.823,P＜0.05).SO (12 h)组胰腺组织NF-κBp65蛋白相对表达量为0.95 ±0.11,显著低于SAP(12 h)组的(2.40±0.17),差异具有统计学意义(t=-17.368,P＜0.05),Tβ4组胰腺组织NF-κB p65蛋白相对表达量为(1.50 ±0.10),较SAP (12 h)组显著降低,差异具有统计学意义(t=10.917,P＜0.05).SO (12h)组胰腺组织IκB α蛋白相对表达量为(1.93±0.11),显著高于SAP (12 h)组的(0.78±0.18),差异具有统计学意义(t=13.260,P＜0.05),而Tβ4 (12 h)组胰腺组织IκB α蛋白相对表达量为(1.12±0.10),较SAP (12 h)组显著升高,差异具有统计学意义(t=4.112,P＜0.05).结论 胸腺素β4对重症急性胰腺炎大鼠具有保护作用.其作用机制可能与抑制胰腺NF-κB信号通路的活化及降低炎症细胞因子的水平有关.     

重症急性胰腺炎大鼠甲状腺病理结构的变化

目的 探讨重症急性胰腺炎(SAP)时大鼠甲状腺病理结构的变化.方法 雄性Wistar大鼠36只,体质量200～250 g,随机分为假手术组(SO组)和SAP组.逆行胆胰管注射5％牛磺胆酸钠复制SAP模型,术后3、12和24 h处死大鼠心脏取血,每个时间点6只,分别测定各时间点血清淀粉酶,取全部胰腺和双侧甲状腺,肉眼观察甲状腺形态变化,所取组织分别固定行光镜观察并行定量形态学研究.结果 SAP组3、12和24h滤泡间隔水肿逐渐加重.12h滤泡大小不等、融合,滤泡腔内胶质蛋白减少甚至排空,滤泡细胞肿胀,毛细血管充血扩张,红细胞瘀滞；24 h除具有12h病理变化外还表现为滤泡细胞脱落坏死,腺体结构破坏；定量形态学研究表明滤泡上皮细胞高度增加,滤泡腔表面积增大,有滤泡上皮细胞脱落入滤泡腔的滤泡数增多.结论 重症急性胰腺炎引起甲状腺病理结构的变化,随着时间的延长甲状腺病理损伤加重.