产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌膜孔蛋白OmpK35与OmpK36基因转录水平

目的通过对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌携带耐药基因和分子流行特点及膜孔蛋白OmpK35、OmpK36基因转录水平、膜孔蛋白表达情况分析,了解膜孔蛋白OmpK35、OmpK36在耐药机制中的作用。方法对32株产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌,进行MLST基因分型;利用PCR技术对产碳青霉烯酶,头孢菌素酶、超广谱β内酰胺酶相关耐药基因和膜孔蛋白OmpK35、OmpK36基因进行检测,并对OmpK35、OmpK36基因进行序列分析;实时荧光定量RT-PCR检测膜孔蛋白OmpK35、OmpK36基因转录水平,用SDS-PAGE检测膜孔蛋白的表达情况。结果 32株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌MLST分型,29株为ST11、2株ST15、1株为ST2193;PCR检测出31株KPC-2阳性,1株NDM-1阳性,32株都检出SHV,其中一株同时检出OXA-48基因。OmpK35、OmpK36基因序列存在点突变、单个碱基和小片段缺失;OmpK35、OmpK36基因转录水平与肺炎克雷伯菌ATCC 13883相比,转录水平不一,大部分明显上调;SDS-PAGE未检测有膜孔蛋白OmpK36缺失株。结论产KPC-2、NDM-1型碳青霉烯酶是导致肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药耐药并表现多药耐药的主要原因,而膜孔蛋白OmpK35、OmpK36在其耐药中作用未体现。     

TRPV1对H9c2心肌细胞缺氧复氧后凋亡的影响及机制

目的 探讨瞬时受体电位阳离子通道V亚族成员1(TRPV1)对H9c2心肌细胞缺氧复氧后凋亡的保护作用及可能机制。 方法 将H9c2心肌细胞随机分为对照组、模型组(缺氧/复氧组)、辣椒素(TRPV1激活剂)组(缺氧/复氧+辣椒素组)、辣椒素+LY组[缺氧/复氧+辣椒素+LY294002(PI3k抑制剂)组]。采用CCK-8法测定心肌细胞存活率，采用流式细胞仪测定各组心肌细胞凋亡率，采用Western blot法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定各组细胞caspase-3、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸化-蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)水平。 结果 与对照组比较，模型组、辣椒素组、辣椒素+LY组心肌细胞存活率和Bcl-2水平降低(均P<0.05)，细胞凋亡率和caspase-3、Bax、p-Akt水平升高(均P<0.05)；与模型组比较，辣椒素组心肌细胞存活率和Bcl-2、p-Akt水平升高(均P<0.05)，细胞凋亡率和caspase-3、Bax水平降低(均P<0.05)；模型组与辣椒素+LY组各指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。 结论 TRPV1可抑制缺氧复氧后H9c2心肌细胞凋亡，其机制可能与TRPV1激活磷脂酰肌醇3-激酶(PI3k)/Akt信号通路有关。      

microRNAs及miR-214在神经损伤再生中的作用

microRNAs(miRs)是一类短的非编码RNA基因,参与了神经系统的生理和病理过程,许多miRs在获得性脑损伤、脊髓损伤和周围神经损伤等均存在差异表达,这些miRs主要通过靶向特异性mRNA来影响神经存活、神经再生和神经胶质表型,从而导致miRs的翻译抑制或mRNA降解。周围神经损伤会使患者躯干和四肢出现神经功能障碍,严重影响患者的劳动力和生活质量。因此,研究miRs在神经损伤和再生中的调控作用,可为治疗神经系统疾病找到潜在的治疗靶点,对拓展神经系统疾病治疗的策略具有重要的意义。microRNA-214(miR-214)是miRs家族的成员之一,有研究显miR-214在神经元分化中被调节,并且在体外控制神经突生长。本文就miRs在神经损伤中的研究进展和miR-214在周围神经再生过程中可能的作用作一综述。     

探讨多基因甲基化检测评估非小细胞肺癌的临床诊断价值

目的探讨多基因甲基化水平与非小细胞肺癌(NSCLC)发生相关性及其诊断价值。方法收集60例确诊的NSCLC患者并设置为实验组,另取60名健康人群作为对照组,采集所有患者清晨空腹血,通过甲基化特异PCR(MSP)技术,检测血清DAPK、P16、Runx3基因甲基化情况,并评估比较NSCLC患者临床病理特征与单基因甲基化检测和多基因甲基化联合检测的关系。结果 NSCLC患者血清DAPK、P16、Runx3基因甲基化率明显高于正常人群。基因甲基化联合检测呈现出更高的检出率、特异性和准确度。DAPK基因启动子甲基化与NSCLC患者分化程度有关(P=0.03);P16和Runx3基因启动子甲基化在年龄、病理分型和TNM分期差异有统计学意义(P<0.05),而多基因甲基化比例仅与NSCLC患者年龄相关(P=0.028)。结论 DAPK、P16、Runx3基因高甲基化水平为NSCLC发生的高危因素,且其基因甲基化检测能够更准确的应用于早期NSCLC诊断。     

GSK3B基因3'-UTR多态性与阿尔茨海默病发病风险的相关性分析

目的研究中国汉族人群中糖原合成酶激酶3β基因(GSK3B)3'端非翻译区(3'-UTR)基因多态性与阿尔茨海默病(AD)发病风险的相关性。方法采用直接测序的方法,对535例AD病例及464例正常对照的GSK3B基因3'-UTR单核苷酸多态性(SNPs)位点进行基因分型。结果 GSK3B基因3'-UTR各SNPs位点的等位基因频率和基因型分布在AD组和正常对照组之间的差异无统计学意义(P0.05)。其中rs60393216、rs56728675和rs3732361存在强连锁不平衡,其构成的三种单体型的频率在AD组和正常对照组之间的差异无统计学意义(P0.05)。结论 GSK3B基因3'-UTR多态性与中国汉族人群AD发病风险无关。     

炎症因子基因与缺血性脑卒中患者预后的相关性分析

目的探讨炎症因子MCP-1、CCR2、E-selectin基因多态性与缺血性脑卒中患者预后之间的相关性。方法采用病例对照研究方法,选取2014年10月-2016年10月于本院连续住院的缺血性脑卒中患者200例作为观察组,均经计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)明确诊断,同期选择本院健康体检者200例作为对照组,接受问卷调查、体格检查、采集血标本。抽取患者外周静脉血并提取DNA,采用Sequenom Massyarray技术检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)(rs1024611、rs3760396)、C-C趋化因子受体2 (CCR2)(rs1799864、rs1799865)、E-selectin (rs2076059、rs10800469、rs3917412、rs5368)的基因型。由经过统一培训的医护人员在缺血性脑卒中发病90 d后进行随访,记录改良Rankin评分(mRS)。采用Logistic回归分析评价各基因型与脑卒中预后之间的关系。结果在缺血性脑卒中患者中,E-selectin的rs2076059基因型和等位基因频率与对照组相比差异具有统计学意义(P 0. 05)。缺血性脑卒中患者E-selectin的rs2076059基因型多态性显著增加,MCP-1、CCR2基因的单核苷酸多态性(SNP)之间没有显著关联。经回归分析发现E-selectin基因rs2076059位点也是缺血性脑卒中发病的独立危险因素。根据mRS评分,E-selectin基因rs2076059位点G/A基因型携带者较G/G基因型患者发生预后不良的相对风险度为2.17(P=0.007,OR=2.17,95%CI:1.48～5.79)。结论E-selectin基因rs2076059位点是缺血性脑卒中发病的独立危险因素; rs2076059位点与缺血性脑卒中的预后有关;相较于G/G基因型,G/A基因型为风险基因型,更易导致缺血性脑卒中预后不良。     

晋东南地区人群亚甲基四氢叶酸还原酶C677T基因多态性分析

目的了解晋东南地区人群亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性的分布情况,为流行病学分析提供科学依据。方法采用实时荧光定量PCR方法,检测1200人MTHFR的C677T基因多态性应用χ~2进行统计分析。结果该地区人群MTHFR的677CC、677CT、677TT基因型频率分别为17.67%,47.00%和35.33%。其中男性人群分别为17.79%,51.21%和31.00%;女性人群分别为17.61%,45.11%和37.27%。男女人群间MTHFR的C677T基因型频率相比差异无统计学意义(χ~2=4.89,P>0.05)。本地区人群C和T等位基因的频率分别为41.17%,58.83%,其中男性分别为43.40%和56.60%,女性分别为40.17%和59.83%。男女人群间C和T位基因的频率相比差异无统计学意义(χ~2=2.42,P>0.05)。结论晋东南人群中MTHFR的C677T基因多态性的分布符合Hardy-Weinberg平衡,为该地区叶酸代谢相关疾病提供流行病学资料。     

2015-2018年晋东南地区新生儿耳聋基因突变发生情况分析

目的通过对晋东南地区(晋城市)新生儿耳聋基因突变发生情况的统计和分析,以期为山西省耳聋出生缺陷的防控提供指导及数据参考。方法采集2015-2018年出生的50 016例新生儿的足跟血,经DNA提取、PCR扩增目的基因后,利用基因芯片—导流杂交法进行基因突变检测。结果 50 016例新生儿中基因突变总发生率为50. 26‰。具体GJB2 1 124例,SLC26A4 925例,GJB3 237例,12S rRNA 161例,tRNASer (UCN) 13例。其中致病性纯合及单基因复合杂合突变13例,此外另发现多基因复合突变54例,突变形式以GJB2+SLC26A4与12S rRNA+GJB2为主。结论与全国其他地区相比,晋东南地区新生儿耳聋基因突变发生率位居前列,尤其是GJB3及12S rRNA,突变发生率在调研的所有地区中居首位。另一方面突变类型呈现多样性特点,突变主要集中于GJB2、SLC26A4及12S rRNA基因。尤其是纯合、单基因以及多基因复合杂合突变。     

德朗热综合征1例

正德朗热综合征(Cornelia de Lange Syndrome,CdLS)又称阿姆斯特丹侏儒症,主要由参与姐妹染色单体内聚的基因突变引起的罕见常染色体显性遗传疾病,表现为特殊外貌及多器官畸形。现将吉林大学第一医院确诊的1例CdLS进行分析,探讨其临床特点,以提高儿科医师对本病的认识,做到及时诊断、及时治疗,以提高患儿预后。