碱性成纤维细胞生长因子-慢病毒真核表达载体的构建及转染

背景：以往研究多采用质粒载体,由于其转染效率不高,且转染时需借助脂质体转染剂进行转染,转染具有细胞毒性,操作复杂等难以应用于临床。 目的：构建携带人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)基因的慢病毒载体,转染成骨方向诱导的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),鉴定bFGF基因表达。 方法：实验组：设计人bFGF基因引物,用Trizol法提取胎盘组织RNA,用RT-PCR的方法扩增出bFGF基因,连接至pLenti6/V5-D-TOPO® 表达质粒,经Xho-Ⅰ、BamH-Ⅰ双酶切和DNA测序证实质粒正确构建。在脂质体转染剂Lipofectamine 2000的介导下,将bFGF-pLenti6/V5-D-TOPO表达质粒同包装质粒pLP1、pLP2、 包膜质粒pLP/VSVG 共转染293FT细胞株,收集bFGF-慢病毒上清转染诱导后第2代的兔BMSCs。对照组：设计GFP基因引物,以GFP- PMSLV-Plazmid为模板,PCR的方法扩增出GFP基因,连接至pLenti6/V5-D-TOPO® 表达质粒,构建GFP-慢病毒载体,并转染BMSCs。RT-PCR和Wetern-blot方法检测bFGF、GFP基因的表达。 结果与结论：转染48 h后,对照组BMSCs可见绿色荧光蛋白表达;实验组BMSCs在转染15 d后,RT-PCR方法扩增出bFGF基因,Western-blot检测出目的蛋白表达。提示成功构建携带人bFGF和GFP基因的真核表达载体,建立转染兔BMSCs的方法。     

经闭孔无张力吊带尿道中段悬吊术治疗女性压力性尿失禁

压力性尿失禁（ stress urinary incontinense,SU1）是中老年妇女的常见病,严重影响患者的生活质量,治疗SUI的手术方法很多,1914年Howard Kelly提出了阴道前壁修补术,     

两种不同盖髓剂对人牙髓细胞毒性的体外研究

目的:研究丁香酚及Dycal对人牙髓细胞的毒性。方法:体外组织块法培养人牙髓细胞,采用噻唑蓝比色法(MTT法)及台盼蓝染色活细胞计数法来评价不同浓度及不同时间段丁香酚及Dycal对牙髓细胞细胞毒性,比色法测定丁香酚干预组细胞内总谷胱甘肽含量。结果:0.1mmol/L浓度的丁香酚及0.1%浓度的Dycal对人牙髓细胞毒性明显,其对细胞毒性反应成浓度及时间依赖性改变。各丁香酚组细胞内谷胱甘肽含量低于对照组,第3天丁香酚最低浓度组细胞内谷胱甘肽含量高于高浓度组。结论:高浓度丁香酚及Dycal对牙髓细胞毒性明显,细胞毒性与浓度及作用时间有关。低浓度丁香酚可能通过谷胱甘肽的参与抵抗氧化应激,从而起到对细胞的保护作用。Dycal可能更加适合用于间接盖髓。     

冠心病合并抑郁患者内皮型一氧化氮合酶基因G894T多态性分析

目的探讨冠心病合并抑郁与内皮型一氧化氮合酶基因G894T位点多态性的关系。方法冠心病患者217例,分为冠心病合并抑郁组39例和冠心病组178例,选择同期抑郁症患者45例(抑郁症组)与健康体检者85名(对照组)。检测4组内皮型一氧化氮合酶基因G894T位点多态性,并分析4组间差异。结果 4组内皮型一氧化氮合酶基因G894T位点GT杂合基因型和T等位基因频率分布两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论冠心病合并抑郁与一氧化氮合酶基因G894T位点多态性无明显相关性。     

30例PICC置管并发症原因分析与对策

目的 为了探讨留置PICC并发症的处理,增强护理人员的维护意识.方法 采用美国ARROW PICC导管经外周静脉穿刺入中心静脉置管.结果 本组PICC穿刺中及后期维护所遇到的并发症30例,通过及时的护理措施和处理后有一例穿刺未成功和一例因血管变异穿刺后送管未成功外,其余28例均得到及时纠正和好转至治疗结束拔管.结论 寻找问题的最佳解决办法,使 PICC更好运用于临床.     

高校老年知识分子高尿酸血症与伴发代谢综合征的相关性

目的 了解高校老年知识分子(≥60岁)高尿酸血症(Hum)的患病情况及其临床特点,并分析与伴发代谢综合征的相关因素.方法 以我市8所大学老年知识分子为研究对象,通过收集和整理686名常规健康体检资料,进行不同年龄段、性别患Hum及伴发代谢综合征的相关性分析.结果 该人群Hum总体患病率为15.45%,男性明显高于女性(P＜0.05),男性各年龄段的发病均高于女性.血尿酸增高患者的高胆固醇、高甘油三酯、高血糖和高血压、脂肪肝、肥胖(超重)、冠心病、痛风、肾功能不全的检出率均明显高于尿酸正常组.结论 Hum是老年人的高发病,且老年Hum与多种心血管或代谢性疾病关系密切,应引起高度重视,因此对该人群积极开展健康保健工作十分重要.     

糜蛋白酶在烟草烟雾诱导的仓鼠肺动脉高压中的作用

目的探讨糜蛋白酶在烟草烟雾所诱导的肺动脉重构和肺动脉高压中的作用。方法将仓鼠暴露在烟草产生的烟雾中（烟雾暴露组,n=6）,4个月后,使用免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法、放射免疫学测定、反转录PCR等测定仓鼠肺的形态学和肺组织的生物化学改变。对烟雾暴露组与对照组（n=6）上述指标进行比较。结果长期烟草烟雾暴露使仓鼠右心室收缩压升高,肺小动脉中层细胞肥大,同时肺组织糜蛋白酶活性及合成增加,血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平升高（与对照组比较,P均﹤0.05）。糜蛋白酶抑素（chymostatin）可以降低烟草诱导的仓鼠肺组织中糜蛋白酶活性的增加和AngⅡ水平,改善肺小动脉的重构程度,降低右心室收缩压,但对仓鼠肺组织中血管紧张素转换酶（ACE）的活性无影响。结论长期烟草烟雾暴露可增加仓鼠肺中糜蛋白酶的活性及表达,激活的糜蛋白酶进一步诱导肺组织AngⅡ形成,这可能是烟草诱导的肺动脉高压发生机制的一部分。因此,糜蛋白酶抑素也许会对吸烟的肺动脉高压患者有益。     

大剂量尿激酶静脉溶栓治疗急性心梗30例临床观察

目的：探讨大剂量尿激酶（UK）静脉溶栓治疗老年急性心肌梗死的疗效。方法：采用大剂量静脉溶栓疗法，首剂150万U，以后每天50万U静脉点滴，4－7天，总计量300－450万U。结果：冠脉再通率80％（24／30），再梗率13．33％（4／30）,出血并发症13．33％（4／30）病死率13．33％。结论：大剂量尿激酶静脉溶栓治疗老年急性心肌梗死（AMI）病人，可以提高相关血管的再通率，降低病死率；溶栓治疗年龄不限；尿激酶150万／U是老年AMI溶栓治疗较适当剂量。     

小剂量多巴酚丁胺负荷超声心动图评价冠心病血运重建术疗效的临床研究

目的探讨小剂量多巴酚丁胺结合超声心动图多普勒组织成像(DTI)评价存活心肌,指导经皮冠状动脉介入治疗(PCI)把握适应证及判定PCI疗效的应用价值. 方法对20例经冠脉造影确诊冠心病行PCI的患者术前、术后分别行超声心动图及心脏核素检查.     

喀什市某乡居民健康教育前后内脏利什曼病知晓率的改变

2004-2006年在新疆喀什市伯什克然木乡内脏利什曼病流行的1、4、18和20村,通过发放宣传材料,张贴宣传画,开设健康教育课等方式,开展防治内脏利什曼病基本健康知识教育活动,使居民和中小学生对内脏利什曼病及其防治知识的知晓程度,由健康教育前的0.7%和0提高到健康教育后的54.2%和70.7%。通过健康教育活动,提高了人群自觉防病的知识水平。