局部枸橼酸抗凝技术在ICU肝功能障碍患者连续静脉-静脉血液滤过治疗中的应用研究

目的研究局部枸橼酸抗凝技术(RCA)在重症监护病房(ICU)肝功能障碍患者行连续静脉-静脉血液滤过(CVVH)治疗中的效果。方法 50例ICU肝功能障碍患者作为研究对象,全部患者在均在CVVH治疗过程中应用RCA,观察并比较患者治疗前后肝功能指标水平、临床指标水平、体外凝血情况以及并发症发生情况。结果患者治疗前总胆红素(TBIL)、谷转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平分别为(120.56±11.45)mmol/L、(420.15±10.11)U/ml、(418.08±9.53)U/ml,患者治疗后TBIL、AST、ALT水平分别为(116.53±10.62)mmol/L、(417.21±10.05)U/ml、(415.76±9.37)U/ml;治疗后,患者TBIL、AST、ALT水平均略低于治疗前,但比较差异无统计学意义(t=1.8247、1.4583、1.2275, P=0.0711、0.1479、0.2226>0.05)。患者治疗后血清总钙水平高于治疗前,且治疗后动脉血血乳酸与钾离子(K+)水平均低于治疗前,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗前后钙离子(Ca2+)、钠离子(Na+)、碳酸氢根离子(HCO3-)、酸碱度(pH)、总钙/离子钙水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。50例患者治疗过程中进行140例次血液净化治疗,其中Ⅲ级凝血0例次(0)、Ⅱ级凝血0例次(0)、Ⅰ级凝血11例次(7.86%)、0级凝血129例次(92.14%)。所有患者治疗过程中均未发生并发症。结论 ICU肝功能障碍患者在进行CVVH治疗过程中应用RCA,治疗效果明显,且安全可靠,值得临床推广。     

N末端B型脑钠肽及同型半胱氨酸对老年慢性病患者5年预后的预测价值

目的分析血浆N末端B型脑钠肽(NT-proBNP)和同型半胱氨酸(Hcy)对老年慢性病患者5年预后的预测价值。方法选取2012年1月-2014年7月国网湖北省电力有限公司职工医院检验科(健康体检业务)体检查出的老年慢性病患者226例,另选取同期体检健康老年人群50例作为对照组,检测研究对象NT-proBNP和Hcy水平,并随访5年观察患者死亡事件。结果死亡组患者的NT-proBNP和Hcy水平高于生存组和对照组(P<0.05),且死亡组患者随生存时间减少,NT-proBNP和Hcy水平逐渐上升(P<0.05)。NT-proBNP和Hcy水平与患者死亡事件呈正相关(P<0.001);NT-proBNP和Hcy水平与患者生存时间呈负相关(P<0.001)。NT-proBNP作为患者死亡事件的预测指标,ROC曲线下面积=0.773,最佳阈值=3149.50 pg/ml,灵敏度为82.9%,特异度为62.6%。Hcy作为患者死亡事件的预测指标,ROC曲线下面积=0.784,最佳阈值=39.50μmol/L,灵敏度为60.4%,特异度为88.7%。NT-proBNP阳性组的5年累积生存率明显小于NT-proBNP阴性组(P<0.001);Hcy阳性组的5年累积生存率明显小于Hcy阴性组(P<0.001)。结论NT-proBNP和Hcy水平对老年慢性病患者5年预后有一定预测价值,患者NT-proBNP水平>3149.50 pg/ml,Hcy水平>39.50μmol/L时,患者死亡风险明显增加,可作为老年患者慢性病危险分层的监控指标。     

CIP2A在子宫内膜样腺癌中的表达及临床意义

目的:探究蛋白磷酸酶2A(CIP2A)在子宫内膜样腺癌中的表达情况及临床意义。方法:选取2011年1月至2014年3月行手术切除并经病理证实的50例子宫内膜样腺癌(EAC)及同期行门诊刮宫术获取的40例正常增生期子宫内膜(NE)组织标本。应用RT-PCR、Western blot法检测EAC和NE组织中CIP2A mRNA及蛋白水平，免疫组化法检测CIP2A阳性表达情况。分析CIP2A在EAC和NE组织中的表达差异及与子宫内膜样腺癌临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法分析CIP2A不同表达水平对患者预后生存的影响，通过COX分析预后独立危险因素。结果:免疫组化染色显示:CIP2A在子宫内膜样腺癌中呈高表达，阳性着色定位于细胞浆和细胞核中，EAC组织中CIP2A阳性表达率显著高于NE组织(P＜0.01)。RT-PCR和Western blot检测显示EAC组织中CIP2A mRNA及蛋白表达水平高于NE组织(P＜0.01)。CIP2A表达与EAC的组织学分级、FIGO分期、宫颈管受累情况、p53表达及Ki-67增殖指数有关（P＜0.05）。Kaplan-Meier法生存分析显示EAC患者5年无病生存率为92.0%、总生存率为88.0%；CIP2A表达、组织学分级、FIGO分期、肌层浸润深度、附件转移、脉管内癌栓及Ki-67增殖指数与患者预后不良相关（P＜0.05）。多因素分析显示，组织学分级、FIGO分期及脉管内癌栓是影响子宫内膜样腺癌患者预后生存的独立危险因素（P＜0.05）。结论:CIP2A在子宫内膜样腺癌中呈高表达，与患者总生存率下降相关，并非影响患者预后的独立危险因素。     

基于TCGA、THPA、GEO数据库挖掘PTTG1在乳腺癌中的表达及预后意义

目的:通过对癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas，TCGA)、人类蛋白组图谱(The Human Protein Atlas，THPA)和人类肿瘤相关的基因表达汇编(Gene Expression Omnibus，GEO)数据库的数据挖掘，探索垂体肿瘤转化基因1（pituitary tumor-transforming gene 1，PTTG1）在乳腺癌中的表达及预后意义。方法:从TCGA、THPA和GEO数据库提取PTTG1在乳腺癌及正常组织中mRNA和蛋白水平的变化和患者临床病理资料，GEO在线预后分析数据库Kaplan-Meier Plotter(http://kmplot.com)检索PTTG1乳腺癌预后的相关性。结果:在数据库中，PTTG1 mRNA和蛋白水平在乳腺癌队列中表达显著高于正常乳腺组织(P<0.01)；PTTG1 mRNA在不同的分子亚型中表达存在显著差异(P<0.05)；PTTG1 mRNA在ER和PR阳性乳腺癌患者组织中表达显著低于ER和PR阴性乳腺癌患者(P<0.05)；PTTG1 mRNA在进展期乳腺癌患者组织中表达显著高于早期乳腺癌患者(P<0.05)；PTTG1 mRNA随着乳腺癌患者组织学分级程度升高而降低(P<0.05)。PTTG1低表达乳腺癌患者的预后显著好于其高表达患者(P<0.001)；PTTG1高表达的ER和PR阳性、HER-2阴性乳腺癌患者的预后均显著差于其低表达者(P<0.05)。PTTG1高表达乳腺癌样本富集到细胞因子受体相互作用、趋化因子信号通路、细胞周期、自然杀伤细胞介导细胞毒性、Toll样受体信号通路和T细胞受体信号通路等相关基因集。结论:PTTG1 mRNA和蛋白在乳腺癌组织中高表达，PTTG1 mRNA表达与乳腺癌预后相关且在不同分子分型的乳腺癌中具有不同的预后监测意义，可以作为乳腺癌预后判断的标志物。     

基于NF-κB信号通路的细柱五加中impressic acid的抗炎作用研究

目的 研究细柱五加Acanthopanax gracilistylus W.W.Smith中impressic acid（IA）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的抗炎作用。方法 以LPS诱导RAW264.7细胞建立炎症模型；使用EZ4U细胞增殖与细胞毒性分析试剂盒检测IA对RAW264.7细胞的毒性作用；Griess法测定一氧化氮（NO）水平；ELISA法测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）水平；RT-PCR法检测TNF-α、IL-1β mRNA表达；Western blotting检测高迁移率族蛋白B1（HMGB1）蛋白表达；ELISA法细胞质和细胞核的核因子-κB（NF-κB）水平。结果 Impressic acid可以显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中TNF-α、IL-1β水平和HMGB1蛋白表达，并抑制NF-κB从细胞质向细胞核的转移（P<0.05、0.01）。结论 细柱五加中IA对LPS诱导的RAW264.7细胞具有抗炎作用。     

基于响应面法优选美洲大蠊口腔原位温敏凝胶的制备研究

目的制备美洲大蠊Periplaneta americana口腔原位温敏凝胶。方法采用自由基聚合法首次以N-异丙基丙烯酰胺(NNIPAM)和甲基丙烯酸羟丙酯(HPMA)合成聚(N-异丙基丙烯酰胺-甲基丙烯酸羟丙酯)[P(NNIPAM-HPMA)]作为温敏材料;通过冷溶法制备美洲大蠊口腔原位温敏凝胶,采用Box-Behnken设计响应面法,以溶蚀时间、胶凝时间为评价指标,在固定美洲大蠊提取物用量基础上,对羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP K30)、P(NNIPAM-HPMA)的用量进行优选。结果通过原位聚合法合成了P(NNIPAM-HPMA)温敏材料;并用响应面法优选了可用于口腔的美洲大蠊原位温敏凝胶的处方,优选的处方为美洲大蠊提取物10%、HPMC 3.0%、PVP K30 9.5%、P(NNIPAM-HPMA) 10.0%,其溶蚀时间为2 h,胶凝时间8～9 s。结论优选得到美洲大蠊口腔原位温敏凝胶,为美洲大蠊提取物的口腔原位局部的临床应用奠定了科学依据。     

PI3K/AKT/mTOR通路及其抑制剂在乳腺癌中的应用现状

磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）信号转导通路在多种肿瘤中异常激活，参与肿瘤细胞增殖、分化和凋亡等生命过程的调控，是抗肿瘤药物研发的重要靶点。对目前已应用于乳腺癌临床或处于临床试验阶段的PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂进行归纳，并综述该通路抑制剂的联合用药策略，以期为不同亚型乳腺癌提供个体化靶向治疗方案。     

miR-361-5p对肾细胞癌ACHN细胞恶性生物学行为的影响

目的：探讨miR-361-5p对肾细胞癌ACHN细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡及其细胞周期的影响。方法：将miR-361-5p mimics和miR-361-5p inhibitor分别转染至肾癌ACHN细胞中，用qPCR检测转染细胞中miR-361-5p的表达水平，用MTT法、划痕愈合实验、Transwell实验、流式细胞术分别检测细胞的增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡水平。结果：与空白对照组和 Mimics-NC组比较，miR-361-5p mimics组ACHN细胞中miR-361-5p表达水平显著升高（P<0.01），细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著减弱（均P<0.01），而凋亡率升高（P<0.01）。与空白对照组或Inhibitor-NC组比较，miR-361-5p inhibitor组细胞中miR-361-5p表达水平显著下降（P<0.01），细胞的增殖、侵袭和迁移能力均增强（均P<0.01），细胞周期运转加速（P<0.01），凋亡率降低（P<0.05）。结论：miR-361-5p可抑制肾癌ACHN细胞的增殖、侵袭和迁移，并诱导细胞凋亡，其在肾癌发生发展过程中发挥重要的抑制作用。