人14-3-3σ基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其转录活性分析

目的构建人14-3-3σ基因启动子的荧光素酶报告基因载体,探讨该启动子的转录活性。方法运用UCSC软件对人14-3-3σ基因5′端2000bp进行启动子特征分析和转录因子结合位点分析。克隆14-3-3σ基因5′端5个不同长度的启动子片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic重组,获得5个不同长度的14-3-3σ启动子萤光素酶报告基因载体,分别转染HeLa细胞,通过双荧光素酶活性分析实验进行转录活性分析。将转录因子AP-2α的过表达质粒pCMV-Myc/AP-2α分别与以上不同长度的14-3-3σ启动子萤光素酶报告基因载体共转染HeLa细胞,通过双荧光素酶活性分析实验检测AP-2α对14-3-3σ启动子转录活性的影响。结果序列分析发现人14-3-3σ启动子基因5′端1349bp的区域内存在多个潜在的AP-2α结合位点,成功构建了5个不同长度的14-3-3σ启动子报告基因载体。双荧光素酶活性分析显示5个启动子片段均有转录活性,AP-2α可增强14-3-3σ启动子转录活性。结论成功构建了14-3-3σ启动子的报告基因载体,为进一步研究AP-2α对14-3-3σ的调控奠定了基础。     

多种肿瘤标志物联合检测的诊断意义

对３８例原发性肝癌，２６例胃癌，２２例肺癌，２１例食道癌及５０名正常人检测了血清甲胎蛋白（ＡＦＰ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）、铁蛋白（ＳＰ）、唾液酸（ＳＡ）并进行了对比，发现若以４项标志物中的单项或多项阳性作为阳性，肿瘤的总检出率为８６％，与各单项检出率（１９．６％～６８．２％）相比，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）     

公共场所从业人员无症状HBV携带者中检测前S1抗原的必要性探讨

目的:探讨公共场所从业人员无症状HBV携带者中检测前S1抗原(Pre-S1Ag)的必要性。方法:Pre-S1Ag、HBV血清学标志物(HBV-M)采用ELISA法,HBV DNA检测采用实时荧光定量PCR法。结果:2006.06.05~2007.06.05公共场所体检人数10034人,单阳(单一HBsAg阳性)人数532人(5.30%),双阳(HBsAg、HBeAg阳性)人数231人(2.30%),单阳与双阳阳性检出率比较,2χ=123.44,P<0.05,两者差别有统计学意义。单阳阳性率显著高于双阳阳性率。HBV-DNA阴阳性体检者血清标本中,HBV-DNA与Pre-S1Ag比较:2χ=1.13,P>0.05,两者差别无统计学意义。HBeAg阳性组中,Pre-S1Ag、HBV-DNA的检查率分别为:97.0%、93.9%,三者之间有较高符合率;HBV-DNA与Pre-S1Ag比较:2χ=2.44,P>0.05。HBeAg阴性组中,HBV-DNA与Pre-S1Ag比较:2χ=0.46,P>0.05。两组差异均无统计学意义。将HBeAg阳性组与阴性组的Pre-S1Ag阳性率进行比较:2χ=343.73,P<0.05,两者差别有统计学意义。结论:作为反映乙肝病毒复制和传染性的血清学标志,前S1抗原和DNA与HBeAg密切相关,且更敏感,对"乙肝五项"检测有重要的补充和加强作用。前S1抗原具有独立的检测价值。