一种新的免疫活性细胞(IPCs)在慢性乙型肝炎患者中的检测

目的近年来研究发现了一种在人的外周血中专职产生α/β干扰素的免疫活性细胞,即“干扰素产生细胞(IPCs)。IPCs在外周血中产生干扰素的量是其他产生干扰素细胞的200～1000倍。因此可以说IPCs是体内IFN的专职产生细胞。 IPCs在慢性乙型肝炎患者体内数量的多少和功能的强弱,决定着患者体内IFN的产量,并直接影响着HBV的清除和病程的转归。本文初步检测了干扰素产生细胞(IPCs)在慢性乙型肝炎患者体内的变化特点,以期进一步明确HBV持续感染的患者中是否存在着IPCs数量和功能的缺失及其对慢性肝炎发病机制的影响。方法随机选取了解放军第三○二医院2001年7月～8月住院的25例慢性乙型肝炎患者,男性19例,女性6例,年龄12～49岁。对照组14例为健康供血员。新鲜分离的抗凝外周全血3ml,用PBS等倍稀释,混合均匀后轻轻加在淋巴细胞分离液面上,血液与淋巴细胞分离液的体积比为2:3,2 500rpm离心25min,轻轻吸界面细胞到一干净离心管中,加PBS(含2％胎牛血清和0.5mMEDTA)悬浮细胞,以1500rpm、1 000rpm离心洗涤细胞2次,洗尽血小板。1×10~6PBMC用荧光标记鼠抗人CD_4-FITC,CD3,CD14,CD16,CD20和CD11c—PE单抗染色25min,1％的多聚甲醛固定,上流式细胞仪检测。按照国外Liu YJ(Blood2001,98(4):906-912)所采用的方法,在前向角和侧向角散点图中找出所有可见的PBMC,先设门R1,记数10~5个PBMC。再以PE标记的CD3,CD14,CD16,CD20,CD11c为横轴,以FITC标记的CD4为纵轴作散点图,设门2,门2内的细胞即我们所要检测的IPCs。记数门2内所有的细胞所占10~5个PBMC的百分数,然后比较慢性乙型肝炎患者和健康人外周血中IPCs数量的变化。结果 25例慢性乙型肝炎患者外周血中IPCs的百分数为0.093±0.078,较正常人(0.326±0.092)明显降低,两者相差3.5倍,有显著差异(P<0.001)。同时发现在HBV DNA(+)的患者中其IPCs的百分数为0.081±0.054,明显高于HBV DNA(-)患者(0.040±0.031),差异显著(P<0.01)。IPCs数量与慢性乙型肝炎患者ALT水平无相关性。结论本文通过检测25例慢性乙型肝炎患者和14例正常人外周血IPCs的数量发现,在慢性肝炎患者外周血中存在着明显的IPCs数量的降低,平均只占其外周血PBMC的0.093％,而明显低于正常人的0.326％(P<0.001)。因此,在临床中我们观察到慢性肝炎患者体内HBV病毒总是在潜伏或增殖,导致病情迁延反复以及在实验研究中发现患者体内IFN的量低于正常人等现象,这些现象最直接的原因可能是其体内IPCs数量的下降所致。同时我们也观察到,虽然在慢性乙型肝炎患者体内存在着IPCs数量的降低,机体的免疫反应受到抑制,但并不是机体处于无反应状态。因为在有HBV复制的病例中,其IPCs为0.081±0.054,与无HBV复制的病例组相比(0.040±0.031),P<0.05。由此可见在病毒的刺激作用下,机体自身的细胞免疫应答也是增强的,但可能由于数量上的不足而不足以抑制病毒的复制,因而HBV DNA呈阳性。本研究只是初步检测了慢性肝炎患者IPCs的数量及其临床意义,有关IPCs的研究还存在着许多待阐明的问题,例如IPCs数量和T细胞亚群变化之间的关系;IPCs水平的高低与患者HBV病毒载量动态变化以及IPCs与慢性肝炎病程之间的关系等问题,有待我们去进一步探讨。     

慢性乙型肝炎患者体内干扰素产生细胞的初步检测及其临床意义

目的　研究慢性乙型肝炎患者体内干扰素产生细胞 (IPCs)的特点。方法　用流式细胞仪对 2 1例慢性乙型肝炎患者和 12名健康人外周血中IPCs数量的变化进行了检测 ,同时与T淋巴细胞亚群CD4 /CD8 的比值进行了比较分析。结果　慢性乙型肝炎患者外周血IPCs的百分数 ( 0 .0 97± 0 .0 82 )较正常人 ( 0 .310± 0 .0 87)明显降低 ,两者相差3.2倍 ,有显著差异 (P <0 .0 0 1) ,而CD4 /CD8 的比值 ( 1.79± 0 .46 1)则明显高于正常人的 1.39± 0 .396 (P <0 .0 1) ,同时发现在HBVDNA阳性的患者中 ,其IPCs的百分数和CD4 /CD8 的比值分别为 0 .0 83± 0 .0 5 7和 1.98± 0 .5 2 7,均明显高于HBVDNA阴性患者 (分别为 0 .0 42± 0 .0 2 9和 1.47± 0 .46 6 ) ,差异显著 (P <0 .0 1)。结论　与正常人相比 ,慢性乙型肝炎患者外周血中IPCs的数量降低 ,后者可能与慢性乙型肝炎患者病程的进展以及血清中HBVDNA阳性有关 ,确切机制有待进一步研究。     

026 干扰素产生细胞研究的进展

近年来研究发现了一种在人的外周血中专职产生α／β干扰素的细胞，被命名为干扰素产生细胞或IPCs。IPCs在外周血中产生干扰素的量是其它血细胞的200～1000倍，而干扰素在一些病毒感染性疾病中对病毒的清除具有十分重要的意义，同时研究发现在许多疾病中存在着IPCs数量和功能的缺失。本文综述了IPCs的相关功能特点及其与人类疾病的关系方面的研究进展。     

HBsAg致敏的树突状细胞体外抗乙型肝炎病毒的效应

目的 探讨用HBsAg致敏的树突状细胞(DCs)体外诱导自体T淋巴细胞特异性抗乙型肝炎病毒的免疫效应.方法 从乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中诱导DCs,在DCs成熟前加入纯的HBsAg刺激,将成熟后的DCs与自身T淋巴细胞体外共培养,5天后收集T细胞,分组加入2.2.15细胞培养液中,分别收集第1、3、5和7天的培养上清液,检测其HBeAg和HBsAg的分泌情况以及其与T淋巴细胞共培养产生的IFN-γ和IL-12的含量.结果 经抗原刺激后的DCs刺激自身T淋巴细胞增殖可明显加强其细胞毒作用,同时其产生的IFN-γ和IL-12的浓度明显高于未经抗原刺激的DCs组(P＜0.05)和对照组PBMC(P＜0.01).经抗原激活的T细胞可有效地抑制HBeAg的表达,但未发现对HBsAg有明显的抑制作用.结论 体外经HBsAg刺激后的DCs激活的自身T细胞可明显地增强细胞毒作用并可提高产生IFN-γ和IL-12的含量,从而显著地抑制2.2.15细胞上清中HBeAg的表达,致敏后的DCs疫苗体外可有效地起到抗乙型肝炎病毒的效应.     

地下工事真菌气溶胶的来源及其危害研究

目的：调查地下工事真菌气溶胶的来源及其对人体健康的危害。方法：用撞击法和沉降法对多条地下工事空气采样，进行菌株鉴定。结果：3种类型地下工事空气真菌数，沉降法检测平均2936～7253cfu／m^3，高于对照组（P〈0．01）。半密闭和通风式地下工事空气真菌数，撞击法检测结果高于对照组（P〈0．01）。半密闭式地下工事真菌数最高，撞击法检测通道及房间分别为6818cfu／m^3和11290cfu／m^3，沉降法检测通道及房间分别为4129cfu／m^3和7253cfu／m^3，且两种方法房间真菌数均明显高于通道（P〈0．01）。鉴定2845株菌株，其中青霉属和曲霉属为优势菌，占60．6％。73株黄曲霉菌中有9株产生黄曲霉毒素B1，占12．3％。结论：真菌气溶胶来源主要为外界进入及内部大量腐殖质存在，形成真菌污染源，对人体健康及储存物资有一定危害。     

短期坑道内半密闭环境对人体免疫功能的影响

目的观察短期进驻坑道内半密闭环境对人体的影响，为特殊情况下进驻坑道提供依据。方法试验于华北某地军事坑道内，以工兵连队男性军人为试验对象，每日3餐各30min在坑道外就餐，其余时间均在关闭的试验房间内。按试验前、中、后3次观察体液免疫和细胞免疫15项免疫指标。结果IgG、IgA、IgM、补体G、补体C4、C反应蛋白、α1-酸性糖蛋白、铜蓝蛋白、触珠蛋白和转铁蛋白，试验前、后无显著性差异（P〉0．05）。T淋巴细胞亚群CD3^＋和CD8^＋，试验中较试验前、后明显降低（P〈0．05），CD；无显著性差异（P〉0．05）；NK细胞CD16^＋试验中较试验前、后明显增高（P〈0．05）；B细胞CD19^＋试验中较试验前、后明显降低（P〈0．05）。结论短期进驻坑道内半密闭环境，人体免疫系统可发生代偿性变化，但对人体无明显不良影响。     

免疫活性细胞在自身免疫性肝炎发病机制中的意义

为探讨免疫活性细胞在自身免疫性肝炎 (autoimmunehepatitis,AIH)发病机制中的意义 ,应用免疫组化方法 ,通过系列标志性单抗对 36例确诊的AIH患者穿刺肝组织中树突状细胞(DC)及淋巴细胞 (LC)亚群进行观察分析 ,取其中 8例AIH患者的血液作DC分离、培养 ,流式细胞仪检测DC表面标志 ,并对LC亚群作定量分析。结果显示 ,8例AIH患者外周血DCHLA DR表达较健康对照组及乙肝组增强 (P <0 0 1) ,外周血总T细胞增加 ,CD4 + /CD8+ 降低 (P <0 0 1) ,γδT细胞高于健康对照组(P <0 0 1) ;AIH肝组织内浸润的细胞主要为T淋巴细胞 ,汇管区内以CD4 + 细胞为主 ,小叶内以CD8+ 细胞为主 ,CD4 + /CD8+ 与乙肝组无明显差异。提示AIH患者存在免疫异常 ,DC细胞与AIH疾病的发生关系密切 ,γδT细胞可能在AIH发病机制中扮演了重要的角色     

自血光量子治疗急性黄疸型肝炎65例

自血光量子疗法是指小剂量自血在体外经紫外线光量子照射充氧后再回输体内的一种治疗方法。我院自1993年1月～1994年10月用此法治疗急性黄殖型肝炎65例，在降酶、退黄方面疗效显著。报告如下。1临床资料1．1病例选择全部病例系1993年1月～1994年10月间的130例住院病人，均符合1990年上海全国第六次肝炎会议分型诊断标准。其中甲型肝炎8例，乙型肝炎112例，丙型肝炎10例。随机抽样分为自血光量子组65例，其中男性45例，女20例，年龄3～52岁，平均27．5岁，平均病程16．7d。对照组65例，男43例，女22例，年龄3～56岁，平均29．5岁，平均病程17…     

脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的临床效果研究

目的 探讨脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的临床效果.方法 20例肝硬化失代偿期患者,采取介入(经肝固有动脉或门静脉)和静脉输注途径移植脐血干细胞,移植术后3个月观察血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TB)、凝血酶原时间(PT)和清蛋白(ALB)水平变化,同时观察术后临床症状的改善情况及不良反应.结果 患者脐血干细胞移植术前与术后3个月ALT、TB、PT和ALB水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).患者腹腔积液减少率为75%(15/20),乏力好转率为80%(16/20),肝病面容、肝掌及蜘蛛痣减轻率为70%(14/20).患者移植术中和术后,未见明显不良反应和并发症发生.结论 脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化是一种较安全的治疗方法,可起到暂时性的肝脏支持作用.     

干细胞移植治疗慢性肾衰竭一例

慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)是指各种原发性或继发性慢性肾脏疾病患者进行性肾功能损害所出现一系列症状或代谢紊乱的临床综合征.目前,透析和肾移植是最基本的治疗方法,但其存在各种并发症及供体短缺、免疫抑制剂副作用大等问题.研究发现:干细胞具备很强的增殖能力和分化潜能,在肾脏疾病损伤修复方面,显示了很好的应用前景.本院2009年9月采用干细胞移植治疗1例慢性肾衰竭患者,现报道如下.