甲型H1N1流感合并肺炎的重症及危重症老年患者23例临床分析

甲型H1N1流感早期症状不典型,多与一般的季节性流感症状相似,早期诊断率不高,容易出现误诊、漏诊;一旦合并肺炎的重症及危重症患者,如不能及时有效控制,则病情短期内可急进性进展,导致致命的后果.影像学检查是甲型H1N1流感临床诊断的主要组成部分,也是指导治疗及判断预后的重要依据,有助于肺部损害的客观评估及并发症的早期诊断,对甲型H1N1流感病毒感染者的预后至关重要.     

新型抗IL-1β和IL-17A双特异抗体的构建及特性鉴定

目的 双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)具有双重的生物学功能.本实验旨在设计并原核表达抗人IL-1β和抗人IL-17A的双特异性抗体(BsAbl/17),获得具有生物活性的BsAb1/17,为深入研究和利用双特异性抗体奠定基础.方法 利用重叠PCR方法构建VH1VL17-CL和VL1VH17-CH1基因片段,并且在所用引物的5'和3'端附加Nco Ⅰ和BamH Ⅰ的酶切位点.将重叠PCR产物进行胶回收后用Nco Ⅰ/BamH Ⅰ进行双酶切,酶切产物再次胶回收,将其连接到用Nco I/BamH I消化的pET-27b载体上.将重组质粒pET-27b-VH1VL17-CL(petA)和pET-27b-VL1VH17-CH1(petB)转化到E. coli Rosetta中.SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,用real-time PCR检测其阻断IL-1 β刺激人T细胞表达细胞因子IL-18的活性,人IL-6定量酶联检测试剂盒检测其阻断IL-17A刺激HeLa细胞表达人IL-6的活性.结果 DNA测序结果证明成功构建了pET-27b-VH1VL17-CL(petA)和pET-27b-VL1VH17-CH1(petB)表达质粒.petA、petB诱导产物主要以包涵体形式存在,成熟蛋白纯化产物纯度超过90%以上,经SDS-PAGE分析表明表达产物的相对分子质量约为38×103,与理论值相符.Western blot和ELISA结果证实双特异抗体BsAb1/17对IL-1 β和IL-17A均具有很好的亲和力.通过RT-PCR检测证明其具有阻断IL-1 β刺激人T细胞大量表达细胞因子IL-18的活性,并且具有阻断IL-17A刺激HeLa细胞产生IL-6的活性.结论 成功构建了同时抗IL-1β和IL-17A的双特异抗体,并利用大肠杆菌表达系统高效表达较高纯度的具有生物活性的双特异抗体.

Abstract：

Objective To construct bispecific antibody BsAb1/17 against both IL-1β and IL-17A,express and purify the biologically active BsAbl/17 protein in prokaryotic system for further studies and applications. Methods VH1VL17-CL and VL1VH17-CH1 gene segments were constructed by overlap-PCR.Restriction enzyme sites Nco Ⅰ and BamH Ⅰ were designed at the 5'and 3' end primers respectively. The products of overlap-PCR were ligated to the Nco Ⅰ/BamH Ⅰ -prepared pET-27b vector. The recombinant plasmids pET-27b-VH1 VL17-CL(petA) and pET-27b-VL1 VH17-CH1 ( petB ) were transformed into E. coliRosetta separately. The expressing products were analyzed by SDS-PAGE and Western blot. Neutralization activity of the bispecific antibody for blocking the induction of IL-18 expression by IL-1β in human T cells was determined by real-time PCR. Neutralization activity of the bispecific antibody for blocking the induction of IL-6 expression by IL-17A in HeLa cells was determined by ELISA assay. Results The structure of the plasmids pET-27b-VH1 VL17-CL(petA) and pET-27b-VL1 VH17-CH1 (petB)was confirmed by DNA sequencing. After induction, the fusion proteins were expressed mainly as inclusion bodies. The purity of the both proteins exceeded 90%. SDS-PAGE analysis suggests the relative molecular mass of both products expressed by petA and petB were approximately 38× 103, which is in accordance with the theoretical value. The results of Western blot and ELISA test demonstrated that BsAb1/17 molecule had binding ability to both IL-1β and IL-17A. The BsAb1/17 could block IL-1β to stimulate human T cell to express IL-18 and block IL-17A to stimulate HeLa cell to express IL-6. Conclusion We successfully constructed a novel bispecific antibody BsAb1/17 against both IL-1 β and IL-17A, and expressed biologically active BsAb1/17 protein in prokaryotic system.     

静脉输液技术新进展

通过对静脉输液前微粒污染的控制,包括操作环境的净化,控制安瓶割据长度,开启安瓶前消毒,正确抽吸药液,正确选用配药针头,避免反复穿刺瓶塞,改进穿刺瓶塞角度等,以及输液途径的增加,静脉输液排气法,穿刺前血管的准备,改变进针角度的问题,拔针方法改进的论述,使其应用于临床实践中使静脉输液技术向快速性、准确性、安全性的方向发展。     

对住院自愿戒毒者实施健康教育的疗效评定

目的评定对住院自愿戒毒者进行健康教育的疗效。方法采用自行设计的调查表,选定101例住院自愿戒毒者为研究对象,了解对住院自愿戒毒者开展健康教育的可行性和接受程度,比较他们在健康教育前后的认知变化。结果住院自愿戒毒者由于种种原因染上了毒瘾,他们并不了解吸毒会对他们生活和躯体带来的影响和痛苦,在教育前的知识问卷中总分仅为（31.1±12.1）分,而教育后总分高达（97.29±7.42）分。另外,住院自愿戒毒者对开展健康教育普遍持支持、肯定、积极的态度。结论健康教育的干预效果明显,住院自愿戒毒者的文明认同感有所提高,社会人角色的判定有助于提高每个自愿戒毒者的认知。     

不同来源蜜环菌对天麻产量影响的研究

目的：研究不同来源的11个蜜环菌菌株对天麻产量的影响。方法：有性繁殖，采用菌枝加新材的播种方法，一年半收获，结果：蜜环菌A9，A10伴栽的天麻产量最高，为16．14和15．23kg/m^2。结论：不同来源蜜环菌对天麻产量具有不同的作用。     

认知功能训练对住院老年性痴呆病人康复的初探

目的了解认知功能训练时对住院老年痴呆患者康复的影响，观察认知功能训练对住院老年痴呆患者的治疗效果。方式对29例老年痴呆患者进行为期一年的类Bingo游戏训练，用MMSE、IMCT量表评定疗效。结果病人训练前后MMSE、IMCT量表讦分有显着差异，病人情绪、社会适应能力较训练前明显改善。结论用类Bingo游戏对老年痴呆病人进行认知功能训练，能改善病人与他人情绪和情感的沟通与交流，对康复是有益的。     

强制和自愿戒毒者线索诱发海洛因渴求反应的差异

目的 比较环境线索诱发强制和自愿戒毒者海洛因渴求反应的差异。方法 208名强制戒毒被试者和172名自愿戒毒被试者暴露于海洛因相关环境线索，根据被试者的自我报告，采用Likert分级法评价线索诱发的渴求程度，填写主观戒断反应问卷、毒品使用情况和一般社会学资料，并测量暴露前后血压、心率及瞳孔。采用独立样本t检验，比较线索暴露诱发强制和自愿戒毒被试者渴求及生理指标的差异。结果 暴露后，自愿戒毒被试者的渴求分值明显高于强制戒毒被试者（P〈0．01），强制戒毒被试者暴露前的收缩压和舒张压均明显高于自愿戒毒被试者（P〈0．01），但暴露后两组血压未见显著性差异（P〉0．05）。结论 环境线索诱发强制和自愿戒毒被试者渴求反应存在差异，可能与实验地点、调查者和测量方法的不同有关。     

云南省腾冲县八种树材用于培养蜜环菌栽培菌棒的研究

目的:合理利用当地林木资源,寻找更多适合天麻蜜环菌栽培生长的树材;方法:通过前期的三级种培养筛选试验之后,有目的性地选取云南腾冲县八种当地常见树种制成菌棒,每种菌棒种1 m2,三个重复,培养蜜环菌栽培种,观察不同树材的接菌速度、接菌率、蜜环菌菌索生长速度以及树材特性;结果:欧洲山毛榉和酸角树接菌速度快,接菌率高,菌索生长速度也较快;金叶子、厚皮香、桤木、西南桦的综合情况也较好;结论:实验结果证明,八种树材中除了白杜娟和南烛综合情况不理想之外,其他六种树材都适合作为培养蜜环菌的菌材,其中豆科、山茶科和杜鹃花科属于以前没有用于生产过蜜环菌栽培种的的树种。     

鲍氏针层孔菌的形态学观察

 目的对鲍氏针层孔菌的形态结构特征深入了解。方法对鲍氏针层孔菌的菌落、菌球、营养菌丝和子实体进行观察。结果菌落菌丝初期为白色,后逐渐变为淡黄色、黄色至黄褐色;营养菌丝多分枝,可见菌丝横隔,无锁状联合;菌球呈规则的圆球状,表面具柔软的毛刺;子实体呈半圆形、马蹄形或覆瓦状;担孢子卵圆形,平滑,(3.51～4.06)×(2.18～3.01)μm。结论鲍氏针层孔菌的形态学研究,有助于该菌和其他相似物种进行区别。     

129 木层孔菌属真菌的化学成分与生物活性

国内外研究成果表明,木层孔菌属的多种真菌含抗肿瘤活性成分,有待于开发抗肿瘤新药.对该属常见真菌的化学成分和生物活性进行介绍.