雌激素膜受体GPR30在子宫内膜癌的表达及意义

目的:探讨雌激素膜受体GPR30在子宫内膜癌的表达及意义。方法:RT-PCR和免疫组织化学法检测子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中GPR30mRNA和蛋白的表达,分析GPR30表达与临床病理的联系;免疫细胞化学分析GPR30蛋白在子宫内膜癌细胞系RL95-2(ER+)和KLE(ER-)的表达。结果:子宫内膜癌组织GPR30mRNA的表达水平显著高于正常子宫内膜组织(P<0.05);子宫内膜癌组织GPR30蛋白表达阳性率(21/30,70%)显著高于正常子宫内膜组织(5/17,29.41%)(χ2=7.232,P=0.007);肿瘤组织学分级越高,GPR30表达阳性率越高(P=0.003),GPR30表达与内膜癌分期、肌层浸润深度和腹水转移无关(P>0.05);ERα阳性的子宫内膜癌细胞系RL95-2和ERα阴性的细胞系KLE均表达GPR30。结论:雌激素膜受体GPR30于子宫内膜癌组织和子宫内膜癌细胞系均有表达,与肿瘤组织学高分级相关,提示GPR30可能在子宫内膜癌中发挥重要的作用。     

静脉多普勒流速曲线与胎儿循环的研究

以往在对胎儿循环的研究中,只有动脉多普勒流速曲线.近几年静脉多普勒流速曲线的研究逐渐成为重点和热点.胎儿心脏后负荷、心肌顺应性、血容量及心率改变可以调节静脉和动脉的血流速度波形.心血管因素的改变常见于严重的胎儿生长受限、双胎输血综合征、胎儿水肿等.阐述上述胎儿病理情况下静脉导管、下腔静脉、脐静脉等的多普勒流速曲线的变化.静脉多普勒评估可提供关键性的诊断及预后信息,并对指导临床治疗起重要作用.故而全面的多普勒评估应包括静脉多普勒评估.     

GPR30与AMF正向反馈调控促进子宫内膜癌进展的机制研究

目的:探讨子宫内膜癌(EC)中G蛋白偶联跨膜受体30(GPR30)与自分泌移动因子(AMF)正向反馈的调控机制。方法:免疫组化和免疫荧光法检测EC患者子宫内膜组织中AMF和GPR30的表达情况。Western blot法检测雌激素及GPR30特异激动剂G1对RL95-2细胞、KLE细胞及SPEC-2细胞AMF分泌的调控。使用shRNA干扰、qRT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光验证雌激素膜受体GPR30介导的AMF表达和分泌。qRT-PCR和Western blot法检测AMF刺激前后细胞GPR30的表达情况。使用信号通路蛋白芯片筛选AMF表达下调前后G蛋白相关信号通路变化,并通过Western blot验证。结果:AMF和GPR30在内膜癌组织中呈高表达,且两者表达水平呈正相关。雌激素刺激后,子宫内膜癌细胞分泌的AMF均显著增多,且与雌激素浓度呈正相关。GPR30特异激动剂G1上调了AMF的分泌。干扰GPR30表达致AMF的表达和分泌下降。外源性AMF刺激可上调GPR30 mRNA及蛋白水平。AMF表达下调后MAPK-ERK信号通路明显受到抑制,同时阻断MAPK-ERK信号通路可消减AMF对GPR30的上调作用。结论:内膜癌细胞中雌激素通过GPR30能显著上调AMF的表达及分泌; AMF可激活MAPK信号通路正向反馈调控GPR30表达。E2-GPR30-AMF轴为内膜癌雌激素致瘤理论提供重要补充,进而为寻找能阻断雌激素作用靶点关键因子的分子靶向治疗提供可靠的实验依据。     

HOXA10在子宫内膜癌中的表达及调控机制探讨

目的:探讨HOXA10在子宫内膜癌组织中的表达情况,以及miRNA135a对HOXA10表达的调控和对子宫内膜癌细胞侵袭能力的影响。方法:通过靶基因预测确定miRNA135a与HOXA10的相关性。应用免疫组化法检测HOXA10在子宫内膜癌组织中的表达。通过脂质体转染法瞬时转染HEC-1B和Ishikawa细胞系建立瞬时过表达miRNA135a模型。Real-time PCR和Western blot法检测转染前后HOXA10 mRNA和蛋白水平表达的变化,通过划痕实验、Transwell侵袭实验观察细胞侵袭和迁移能力的变化。结果:子宫内膜癌中HOXA10表达水平显著低于正常子宫内膜组织(P0.01);过表达miRNA135a后,HEC-1B和Ishikawa细胞的迁移和侵袭能力显著增强,差异有统计学意义(P0.01),两种细胞中HOXA10 mRNA和蛋白水平均显著降低(P0.01)。结论:子宫内膜癌中miRNA135a通过抑制HOXA10促进内膜癌细胞的侵袭和迁移能力,参与子宫内膜癌生物学行为的调控。     

利用液相色谱串联质谱技术检测卵巢上皮性癌血清标记物的研究

目的:通过差异蛋白组学方法探寻卵巢上皮性癌血清标记物,以提高其早期诊断率。方法:收集20例卵巢上皮性癌和20例卵巢良性肿瘤患者外周血血清,等容积混合去除高丰度蛋白后,用液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)检测、鉴定两组血清的差异蛋白,用DeCyder软件分析后得到有临床应用意义的显著表达差异的蛋白。结果:LC-MS/MS共筛选出94个具有显著差异的蛋白,与良性卵巢肿瘤相比,在卵巢上皮性癌中,N-乙酰胞壁酸-L-丙氨酸酰胺酶(PGRPL)、铜蓝蛋白、补体9(C9)等蛋白表达上调,Isoform1 of Mirror-image polydactyly gene 1 protein(MIPOL1)、载脂蛋白A-Ⅳ(APOA-Ⅳ)等蛋白表达下调。结论:经鉴定,PGRPL、铜蓝蛋白和C93种蛋白质可能在卵巢上皮性癌发病中发挥作用,有望作为新的血清标记物。     

上腹部手术后腹腔镜胆囊切除术体会—附30例分析

腹腔镜胆囊切除术（LC）早期有上腹部手术被视为相对禁忌症，但随着LC技术的熟练，有上腹部手术史的胆囊结石LC术也被列为首选方法。该文就1998年10月－2000年10月我科30例例有上腹部手术史行LC术患者进行分析讨论，将腹腔粘连分级为Ⅲ级,观察其手术时间、术中出血、通气时间、置放引流情况、中转开腹及并发症等指标，结果提示有上腹部手术史行LC术，其术后恢复无显著差异。但手术时间相对较长及术中出血相对较多（P＜0．05） ，并且其中转开腹比率较高（20％，对照组为4．92％），但无1例并发症。因此作者认为有相当熟练腹腔镜手术经验者，有上腹腔手术史胆囊结石病人，LC术应被列为首选术式。     

射流手术刀的研究

水射流手术刀研制是基于水射流束力学原理和组织器官的特性研制而成.大量动物实验表明:神经纤维和血管网状结构及致密结统组织,具有耐受强的冲洗而其间细胞则被冲洗掉,我们研制的水射流刀能够切割除血管神经外的组织器官而对周围组织无任何损伤,它具有在手术过程中不需阻断血流,因而可保留血管、出血少.它还具有安全、方便、价廉.也可用于肝、肾血管铸型标本的制作.