BLOC⁃3介导Rab32线粒体定位改变对肝癌细胞生长的作用研究

目的 观察溶酶体相关细胞器生物发生复合体⁃3 （biogenesis of lysosome⁃related organelles complex⁃3,BLOC⁃3）亚基Hps1和Hps4对肝癌细胞中Rab32线粒体定位的影响及在肝癌细胞生长中的作用。 方法 通过公共数据库GenDoma,String和InBio Discover分析Hps1和Hps4与Rab32的相互作用情况。体外培养人肝癌细胞系SNU⁃739和Hep⁃3B,利用脂质体转染方法分别转染Hps1和Hps4相关的siRNAs和质粒,采用免疫荧光和Western blot观察Hps1和Hps4对Rab32线粒体定位的影响,细胞划痕、克隆形成、EdU、MTS及Transwell侵袭实验检测Hps1和Hps4调控Rab32线粒体定位后肝癌细胞迁移、增殖和侵袭的变化情况。通过公共数据库UALCAN中的数据集CPTAC分析Rab32蛋白在肝癌和正常肝脏组织中的表达差异。 结果 数据库分析结果显示,Hps1和Hps4均可以与Rab32相互作用;与正常肝脏组织相比,Rab32蛋白在肝癌组织中的表达显著降低（P<0.001）。在肝癌细胞系SNU⁃739中干涉Hps1或Hps4或同时干涉Hps1和Hps4后,Rab32线粒体定位均减少（均P<0.01）,细胞线粒体Rab32蛋白表达均降低（均P<0.001）,细胞增殖、迁移和侵袭能力增强（均P<0.05）;在肝癌细胞系Hep⁃3B中过表达Hps1和Hps4后,Rab32线粒体定位增多（P<0.01）,细胞线粒体Rab32蛋白表达增加（P<0.001）,细胞增殖、迁移和侵袭能力均受抑制（均P<0.01）,而单独过表达Hps1或Hps4时无显著抑制作用（均P>0.05）。结论 BLOC⁃3亚基Hps1和Hps4均可与Rab32相互作用并增加Rab32线粒体定位,进而抑制肝癌细胞生长。     

焦磷酸测序检测RARβ2基因启动子甲基化方法的建立

目的：建立基因启动子甲基化的焦磷酸测序检测方法,为基因启动子甲基化标志物的检测奠定基础。方法：从正常人全血中提取基因组DNA。采用复合巢式PCR的方法扩增目的基因,克隆构建对照标准品质粒。使用甲基化特异性焦磷酸测序检测RARβ2基因启动子CpG岛的5个甲基化位点,双脱氧测序验证。将阳性和阴性对照标准品质粒PCR扩增产物按不同比例混合后进行焦磷酸测序,检测每个点的甲基化程度,制作校正曲线。结果：构建了甲基化特异性焦磷酸测序阴性对照和阳性对照标准品。经焦磷酸测序检测后,阴性对照标准品甲基化程度为0％,阳性对照标准品甲基化程度为100％,与双脱氧测序结果一致。经对混合样品检测,甲基化频率符合线性关系,线性相关性大于0.99,斜率约为1,并且所有位点的标准偏差约为1％。结论：成功构建了甲基化特异性焦磷酸测序检测RARβ2启动子区域甲基化阳性对照和阴性对照标准品质粒。建立了甲基化特异性焦磷酸测序检测基因启动子甲基化的方法。     

冬奇子口服液对小鼠肝损伤保护作用的研究

目的 通过建立四氯化碳（CCl4）致小鼠急性肝损伤模型,观察冬奇子口服液对肝损伤的的保护作用,并初步探讨冬奇子口服液的保肝机制.方法 将50只ICR小鼠随机分为5组：对照组,CCl4致肝损伤模型组,低、中、高剂量的冬奇子给药组（1、2.5、5 g/kg）.各组连续给药7d,末次给药1h后,正常组腹腔注射调和油,其余各组腹腔注射0.1％CCL调和油溶液（10 ml/kg）,18h后测定血清丙氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,肝组织丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性.结果 低、中、高剂量的冬奇子给药组与肝损伤模型组比较,血清ALT分别降低16.27％（P＜ 0.05）、64.96％（P＜ 0.01）和113.77％（P＜ 0.01）;血清AST分别降低33.79％（P＜0.05）、61.20％（P＜0.01）和87.31％（P＜0.01）;肝组织MDA含量分别降低28.27％（P＜0.05）、65.74％ （P＜0.01）和108.89％（P＜0.01）;肝组织SOD活性分别增加13.82％（P ＞0.05）、27.31％（P＜0.05）和40.73％ （P＜0.05）.结论 冬奇子口服液对肝损伤具有保护作用,其机制可能与减少肝组织脂质过氧反应,增强SOD的抗自由基的能力有关.     

翻转课堂结合案例式教学模式在心血管基础医学实验中的实践应用

目的 探讨翻转课堂结合案例式教学模式在基础医学综合实验课程中的应用价值。 方法 选择2016级空军军医大学临床医学五年制专业学生80人作为研究对象,并按不同的教学模式将其随机分为对照组（传统教学模式）和试验组（翻转课堂+案例式教学模式）,利用考核和问卷调查等方式评价翻转课堂结合案例式教学模式在心血管基础医学综合实验课程教学中的应用效果。 结果 在实验操作时间和成功率方面试验组学生明显优于对照组学生（P<0.05）。在对实验原理的理解、实验操作技术掌握、学习兴趣的提升、学习主观能动性、学习记忆效果、临床和科研思维能力、团队协同合作能力、教学模式满意度方面试验组学生均明显优于对照组学生（P<0.05或P<0.01）。实验相关知识考核显示,试验组学生的实验知识考核分数明显高于对照组学生（P<0.01）。 结论 与传统教学模式相比,翻转课堂+案例式教学模式更能够提高学生自主学习能力以及临床和科研思维,值得在基础医学综合实验教学中推广。     

外周血GPC3在肝细胞癌临床诊断中的价值

目的 探讨血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican?3,GPC3)蛋白和外周血GPC3 mRNA及其联合检测在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的诊断价值.方法 采用免疫组化法检测1例肝癌组织标本中GPC3的表达情况.检索PubMed、Web of Science、Embase和C...     

55例活动部份覆盖义齿的临床观察

制作覆盖天然牙或牙根的全口义齿,已在临床上广泛应用,同样把覆盖义齿的概念应用到活动部份义齿,也有相同的价值。本文对我科在１９９５年以来所作的５５例活动部份覆盖义齿病人进行复查,疗效满意,现报道如下：临床资料１．一般资料：临床病例经复查５５例,男性３１...     

可摘局部义齿与龋病的关系

为了探讨可摘局部义齿与继发龋之间的关系，对80例患者进行5年的随访，通过对戴义齿的时间长短，义齿夜间是否摘除，以及基牙龋坏部位的发生情况等临床观察。结果表明：可摘活动义齿修复后，影响了唾液的自然流动，自洁作用下降，唾液停滞在义齿表面，形成了获得性义齿薄膜，在此基础上，致菌斑形成，继而基牙龋变。     

肱二头肌短头肌腱反转移位重建喙锁韧带治疗肩锁关节脱位

目的探讨肱二头肌短头肌腱反转移位重建喙锁韧带治疗肩锁关节脱位的疗效。方法应用反转肱二头肌短头肌腱重建喙锁韧带治疗肩锁关节完全性脱位。结果，临床症状及畸形消失33例，半脱位1例，克氏针游走移位3例，继发肩关节僵硬2例，喙锁间隙骨化1例。结论认为该方法操作简单，创伤小，重建喙锁间的解剖结构并稳定性，临床效果满意。     

Kaplan＇s脱位的手法复位

Ｋａｐｌａｎ＇ｓ脱位的手法复位马海燕仝占坤谢静黄启超山东省曹县人民医院（２７４４００曹县）示指掌指关节完全性脱位，卡入掌侧结构内，俗称扭扣孔脱位，又称Ｋａｐｌａｎ＇ｓ脱位。津下教授指出，该脱位手法整复困难，必须手术复位。我院自１９９０年１２月至１９９...     

标准化病人在普通外科急腹症见习教学中的应用研究

目的探讨标准化病人在普通外科急腹症见习教学中的应用效果。方法选取2014年10月在唐都医院普通外科见习的五年制本科生60人,随机分为实验教学组及常规教学组,实验教学组采用标准化病人教学法。课后对两组学生进行测试评价教学效果。结果实验教学组成绩显著高于常规教学组。结论采用标准化病人教学法能显著提高外科急腹症教学效果。