肺炎克雷伯菌两种感染方法小鼠模型的研究

目的探讨尾静脉注射法和鼻腔滴注法对肺炎克雷伯菌小鼠模型的影响。方法选择体质量30g左右清洁级雄性昆明小鼠30只,随机分为对照组、尾静脉组、鼻腔组给予菌液后,每2h观察小鼠发病情况,记录小鼠体质量变化。小鼠感染后眼球取血法处死一批小鼠。采用酶联免疫法检测血清C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)和白细胞介素-1(IL-1)、IL-6。苏木精-伊红染色法(HE)染色观察肺组织病理形态学改变。结果对照组小鼠活跃,饮食正常。尾静脉组6h后均开始发病,脸部肿胀,28h死亡1例。小鼠鼻腔滴注细菌后,24h后小鼠逐渐开始发病,36h后小鼠症状加重,对照组小鼠28h和50h体质量为(31.84±0.99)g和(32.31±1.13)g高于感染前(29.93±0.98)g(P0.001);尾静脉组28h和鼻腔组小鼠28h、50h体质量分别为(26.82±0.52)g和(28.36±0.88)g、(26.06±0.82)g低于对照组相应时期(P0.001)。尾静脉组小鼠28h体质量低于感染前和鼻腔组28h(P0.001);随时间延长,鼻腔组体质量逐渐下降(P0.001)。感染后尾静脉组小鼠CRP、PCT和IL-1、IL-6分别为(44.06±10.37)μg/ml、(18.64±6.92)ng/ml、(158.62±33.86)pg/ml、(19.15±4.82)pg/ml和鼻腔组为(18.39±4.69)μg/ml、(6.23±2.03)ng/ml、(103.03±27.22)pg/ml、(12.18±3.80)pg/ml高于对照组(P0.001);尾静脉组小鼠CRP、PCT和IL-1、IL-6高于鼻腔组(P0.001)。尾静脉组小鼠肺组织出现炎性渗出物,肺泡腔内浸润大量炎性细胞,肺泡结构模糊;鼻腔组肺泡出现炎性细胞浸润,肺泡结构呈现模糊。结论尾静脉注射和鼻腔滴注构建肺炎克雷伯菌小鼠模型,体质量、CRP、PCT和炎性因子水平存在差异性,且尾静脉注射比鼻腔滴注严重。     

燃煤型氟中毒对雌鼠动物模型的影响

目的动态观察燃煤型氟中毒对雌鼠动物模型影响。方法以45只SD雌鼠为研究对象,定期称体重,观察雌鼠体重的变化,氟斑牙的变化,测定雌鼠尿氟、骨氟含量。结果染氟30天左右,高氟组雌鼠开始出现轻度氟斑牙。随着染氟时间的延长,各模型组均呈现出程度不同的氟斑牙,且氟斑牙损伤程度呈现逐渐加重。相同时间点(60、120、180天),各模型组雌鼠尿氟[(中氟组:2.96±0.68、6.55±1.68、14.58±1.73 mg/L)、(高氟组:9.64±0.76、15.04±1.96、21.11±3.26 mg/L)]和骨氟[(中氟组:75.90±18.52、110.08±32.35、148.39±15.01 mg/kg)、(高氟组:112.65±13.50、149.87±14.06、234.97±24.02 mg/kg)]含量与对照组[(尿氟:0.66±0.10、0.72±0.12、1.21±0.28 mg/L)、(骨氟:13.54±3.80、21.00±3.55、27.06±9.75 mg/kg)]比较,逐渐增高,差异有统计学意义(P0.05)。随染氟剂量的增高,尿氟、骨氟含量均逐渐增加,中氟组与高氟组比较,差异有统计学意义(P0.05)。各模型组组内比较,随染氟时间的延长,骨氟和尿氟含量均逐渐增加,中氟组和高氟组的尿氟和骨氟间差异均有统计学意义(均P0.05)。结论燃煤型氟中毒对雌鼠动物模型毒性可表现在氟斑牙发生率,尿氟和骨氟含量显著增高。     

p53、p21在氟中毒雌鼠卵巢早衰中的表达变化

目的 探讨p53、p21在燃煤型氟中毒雌鼠卵巢早衰中的表达变化.方法 选用断乳24只清洁级SD雌鼠建立动物模型(模型组),于染氟90 d将雌鼠处死.观察雌鼠染氟期间牙齿的变化,观察卵巢颗粒细胞改变检测雌鼠尿氟、骨氟水平和卵巢组织衰老基因p53和p21表达情况.结果 模型组氟斑牙、尿氟和骨氟水平明显升高.模型组中,低氟组卵巢组织颗粒细胞未见早衰,但随染氟剂量的增加,卵巢组织颗粒细胞呈现轻度、中度、重度性水肿的趋势,细胞形态损伤模糊,且闭锁的卵泡明显增加,黄体退化严重,成熟卵泡显著减少,卵巢功能呈现逐渐早衰的迹象.随染氟剂量增加,各染氟组衰老基因p53和p21表达逐渐增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 燃煤型氟中毒致卵巢早衰与基因p53和p21的表达明显相关.     

燃煤型氟中毒雌鼠卵巢 IL-1β细胞因子的表达

目的：动态观察燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢IL‐1β细胞因子的影响。方法采用自由食用织金病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米复制燃煤型氟中毒动物模型（对照组、中氟组、高氟组）,动态观察雌鼠染氟期间牙齿变化情况。采用离子选择电极法、高温灰化－氟离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量。于不同时段（60 d、120 d、180 d ）动情期处死雌鼠,分离卵巢。免疫组化法检测卵巢颗粒细胞内分泌细胞因子IL‐1β的表达。结果（1）成功复制实验动物模型。（2）随着染氟剂量增加及染氟时间的延长,雌鼠氟斑牙症状逐渐加重。（3）雌鼠尿氟、骨氟含量随着染氟剂量的增加及染氟时间的延长而增加。（4）在染氟时间相同的组别（60 d、120 d、180 d ）,各染氟组（中氟组、高氟组）与对照组相比卵巢颗粒细胞IL‐1β蛋白表达率均降低（P＜0．05）,高氟组低于中氟组（P＜0．05）;染氟剂量相同,随着染氟时间延长,各染氟组（中氟组、高氟组）IL‐1β含量逐渐减少,与对照组相比有统计学意义（ P＜0．05）。（5）与对照组相比,染氟60 d时,中氟组、高氟组雌鼠E2含量随染氟剂量的增加而逐渐增高（ P＜0．05）。染氟120 d、180 d中氟组、高氟组雌鼠E2含量随染氟剂量的增加而逐渐降低,但差异均无统计学意义（ P＞0．05）;随着染氟时间点的变化（60 d、120 d、180 d ）,对照组雌鼠E2含量呈从低到高再降低的波动性变化,120 d雌鼠高于60 d和180 d ,且120 d与60 d比较差异有统计学意义（ P＜0．05）。中氟组、高氟组E2含量逐渐减低,但仅有高氟组60 d、120 d分别与180 d比较有统计学意义（ P＜0．05）。结论过量的氟可抑制IL‐1β在卵巢颗粒细胞的表达,致使IL‐1β影响颗粒细胞、P分泌和参与生殖调节的作用也减弱,E2含量减少。这可能是氟中毒致使血清E2降低的机制之一。