管蛋白(tubulin)抗血清的制备和微管免疫荧光细胞化学的研究

我们采用上海细胞生物研究所提取纯化的兔脑微管蛋白(tubulin)免疫家兔,获得抗管蛋白抗血清。经间接免疫荧光染色法检查,此抗血清的效价为 1:32。用这批抗血清对离体培养的我国小儿包皮成纤维细胞进行了微管间接免疫荧光染色和观察。染色结果表明,间期细胞的胞质微管荧光大量地分     

腺苷三磷酸对人横纹肌肉瘤细胞系P21和c-myc蛋白表达的影响

为进一步研究腺苷三磷酸抑制癌细胞增殖诱导分化的作用机理，用ＡＴＰ作用于人横纹肌肉瘤单细胞克隆亚系ＲＤＬ６细胞，用免疫荧光细胞化学方法观察ＡＴＰ作用后的ＲＤＬ６细胞核内Ｐ＾２１蛋白表达增强，ｃ－ｍｙｃ蛋白表达降低，膜下胞质内微丝束－应力纤维组改善，粘着斑内的主要粘附蛋白－纽蛋白（ｖｉｎｃｕｌｉｎ）表达增强，正常小鼠成肌细胞Ｃ２Ｃ１２细胞核内Ｐ＾２１蛋白高表达，ｃ－ｍｙｃ蛋白不表达。结果表明：ＲＤＬ６     

17-β雌二醇对原代人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶基因表达的影响

目的：阐明雌二醇对内皮细胞一氧化氮（ＮＯ）生成及一氧化氮合酶（ｃＮＯＳ）基因表达的影响。方法：观察雌二醇作用于原代人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）一定时间（１～２４ｈ）后的ＮＯ产量，采用Ｇｒｅｉｓ反应测定代谢产物ＮＯ－２的量及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术分析雌二醇作用于ＨＵＶＥＣ１８ｈｃＮＯＳｍＲＮＡ的表达。结果：１００、３０、１０及１ｎｍｏｌ·Ｌ－１的雌二醇作用下，ＨＵＶＥＣ分别于１、４、１２及１８ｈ起，ＮＯ－２产量有明显增高。０．１ｎｍｏｌ·Ｌ－１雌二醇作用２４ｈ内，ＮＯ－２产量与对照组比较差异无统计学意义。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果表明：１～１００ｎｍｏｌ·Ｌ－１雌二醇可明显促进ｃＮＯＳｍＲＮＡ的表达；而０．１ｎｍｏｌ·Ｌ－１雌二醇无此效应。结论：雌二醇可促进ＨＵＶＥＣＮＯ的生成及ｃＮＯＳ基因的表达，可能为雌激素保护作用的重要机制，雌二醇作用的阈浓度可能在０．１～１ｎｍｏｌ·Ｌ－１之间     

17-β-雌二醇对原代人脐静脉内皮细胞一氧化氮生成的影响

目的观察１７β雌二醇对原代人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）一氧化氮（ＮＯ）生成的影响。方法采用胰蛋白酶灌流消化法培养原代ＨＵＶＥＣ，以原代ＨＵＶＥＣ为对象，观察不同浓度的１７β雌二醇（１００ｎｍｏｌ／Ｌ，３０ｎｍｏｌ／Ｌ，１０ｎｍｏｌ／Ｌ，１ｎｍｏｌ／Ｌ，０．１ｎｍｏｌ／Ｌ）作用于原代ＨＵＶＥＣ一定时间下ＮＯ产量（测代谢产物ＮＯ－２），采用Ｇｒｅｉｓ反应测定ＮＯ－２的量。结果１００ｎｍｏｌ／Ｌ１７β雌二醇作用１小时，ＮＯ－２即明显增高（Ｐ＜０．００１）；３０ｎｍｏｌ／Ｌ的１７β雌二醇作用下，４小时起ＮＯ－２产量即明显增高（Ｐ＜０．００１）；１０ｎｍｏｌ／Ｌ的１７β雌二醇作用１２小时及１ｎｍｏｌ／Ｌ的１７β雌二醇作用１８小时，ＮＯ－２产量均有明显增高（Ｐ＜０．０５）。０．１ｎｍｏｌ／Ｌ的１７β雌二醇作用２４小时内，ＮＯ－２产量与对照组比较无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。１７β雌二醇作用的阈浓度可能在０．１ｎｍｏｌ／Ｌ－１ｎｍｏｌ／Ｌ之间。结论１７β雌二醇可促进原代人脐静脉内皮细胞ＮＯ的生成，可能为其抑制动脉粥样硬化形成、降低血管阻力的重要机理之一。     

六味地黄活血汤的抑瘤及促恶性表型逆转效应的初步研究

本研究初步证实了六味地黄活血汤(下简LHXT)对六株人肿瘤细胞均有明显抑瘤效应,IC_(50)均显著低于人胚肺细胞的IC_(50)。流式法(FCM)示该药使细胞聚集于G_2 M期,比对照高10倍。~3[H]-TdR掺入法则显示对DNA合成无抑制作用。软琼脂集落法证明该药对瘤细胞的抑制呈时间及剂量依赖性。免疫荧光法发现LHXT在抑制肿瘤细胞增殖同时,有明显促恶性表型逆转效应,对具高恶性、高转移率的PG细胞尤为突出。与阿霉素(ADM)促恶性表型逆转作用极其类似。该药并有明显抑制C-myc,及促P~(53)基因在PG细胞的扩增、表达。裸鼠荷瘤实验证实该药有明显抑瘤效应(P<0.05),与ADM同用效果更好(P<0.01),且显著优于单用ADM者(P<0.01)。     

脏器保护与细胞间隙连接(下)

间隙连接是细胞 细胞间的膜通道 ,它将组织细胞的胞质连通交流信使和营养小分子 ,形成有空间缓冲性的调节网络 ,是维持组织器官代谢协同及信号畅通保持内稳定所依赖的重要因素 ,调控脊椎动物个体发育和组织发生 ,并普遍存在于成体细胞 ,在增殖、分化、凋亡及多种功能活动中起重要作用。从其在心、脑及感官功能中的作用发现细胞间通讯具有防护脏器损伤的功能。间隙连接的脏器保护作用是新的研究路线 ,利用近年对间隙连接结构功能调节在分子细胞水平研究的新成就阐明有关机理 ,将为人类多器官疾病发生机理和预防研究开辟新思路。文接上篇介绍…     

细胞骨架与恶性转化

一、细胞骨架细胞骨架是具有多种功能的纤维网状的细胞器。近十几年来由于技术方法的不断改进,采用电镜、免疫荧光技术及生物化学方法对细胞骨架的组成成分及其在细胞中的分布和功能进行了深入的系统研究。根据纤维直径的大小     

三磷酸腺苷诱导人白血病细胞U937凋亡的电镜观察

目的 为探讨三磷酸腺苷（ＡＴＰ）对人白血病细胞Ｕ９３７的促凋亡作用。方法 应用ＡＴＰ（０．２３ｇ／Ｌ）作用于人白血病细胞Ｕ９３７（ｈｕｍａｎ ｈｉｓｔｏｃｙｔｉｃ ｌｙｍｐｈｏｍａ）,⑴用白细胞计数器每日计数器细胞和计算抑制率;⑵用流式细胞分析仪检测ＡＴＰ对Ｕ９３７细胞周期改变和凋亡的影响;⑶苏木精－伊红以和电子显微镜检测凋亡小体的形成过程;⑷用苯胺黑染色检测凋亡小体的生命本性。结果 ⑴ＡＴＰ对Ｕ     

防感冒保护肺避免老年多器官功能不全综合征的危害

多器官功能不全综合征（multiple organ dysfunction svndrome）,缩写MODS）是指在重大创伤或严重感染、出血等条件下,患者有两个或两个以上的脏器同时发生功能衰竭的复杂临床症状。该病常见于重症外科或监护室,成为患者死亡的重大威胁。     

尘(femto)水平级环磷酸腺苷(cAMP)放射免疫分析法的建立

cAMP是生命现象的重要调节物质,体液及组织中cAMP的测定,无论在基础理论或临床实践的研究中均具有重要意义。cAMP的测定方法,目前国内外惯用的主要是蛋白结合法和放射免疫分析怯。放射免疫分析法,灵敏度或特异性均较优越。我们从制备全抗原开始,经过诱导产生抗体,鉴定抗体到样品处理及分析方法的建立,完成了cAMP放射免疫分析法。