LINC00460靶向miR-380-3p对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的:探讨LINC00460对皮肤鳞状细胞癌（CSCC）细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及可能机制。方法:实时荧光定量PCR（RT-qPCR）分析人类永生化表皮细胞（HaCaT）和CSCC细胞（SCC13、A431和HSC-5）中LINC00460和miR-380-3p的表达水平。将LINC00460小干扰RNA（si-LINC00460）、miR-380-3p模拟物（miR-380-3p mimics）、si-LINC00460+miR-380-3p抑制物（anti-miR-380-3p）分别转染A431细胞,细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞活力,流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell实验分析细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印记（Western blot）检测细胞周期素D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶9（MMP9）、上皮细胞钙黏蛋白（E-Cadherin）、神经钙黏蛋白（N-Cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的表达。双荧光素酶报告基因实验、RT-qPCR确定LINC00460对miR-380-3p的靶向调控作用。结果:与HaCaT比较,CSCC细胞中LINC00460表达显著增加,miR-380-3p表达显著降低（P＜0.05）。下调LINC00460表达后A431细胞增殖活力、迁移和侵袭细胞数以及CyclinD1、MMP2、MMP9、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达显著降低（P＜0.05）,凋亡率、E-Cadherin蛋白表达显著升高（P＜0.05）。上调miR-380-3p表达后A431细胞增殖活力、迁移和侵袭细胞数以及CyclinD1、MMP2和MMP9表达显著降低（P＜0.05）,凋亡率显著升高（P＜0.05）。与下调LINC00460比较,同时下调LINC00460和miR-380-3p后A431细胞增殖活力、迁移和侵袭细胞数以及CyclinD1、MMP2、MMP9、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达显著升高（P＜0.05）,凋亡率、E-Cadherin蛋白表达显著降低（P＜0.05）。LINC00460靶向负调控miR-380-3p表达。结论:CSCC细胞中LINC00460表达增加,下调LINC00460能够降低CSCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,诱导细胞凋亡,其机制与靶向调控miR-380-3p表达有关。     

lncRNA LINC00460和ADAR1表达与乳腺癌预后的关系及其诊断价值

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC00460和RNA特异性腺苷脱氨酶1(ADAR1)表达水平与乳腺癌预后的关系及其诊断价值.方法 回顾性收集2019年5月至2020年5月同济大学附属第一妇婴保健院收治的86例乳腺癌患者的乳腺组织和癌旁组织.采用qRT-PCR法测定乳腺癌组织和癌旁组织中LINC00460...     

新疆维吾尔族溃疡性结肠炎患者长链非编码RNA LINC00467表达特征与预后分析

目的探讨新疆维吾尔族溃疡性结肠炎(UC)患者长链非编码RNA(LncRNA)LINC00467表达特征与预后关系。方法回顾性分析2017年1月至2019年6月新疆医科大学第四附属医院收治的维吾尔族UC患者30例,其中活动期20例,缓解期10例。另选择2019年1月至2020年6月新疆医科大学第四附属医院维吾尔族健康人30例作为对照组。受试者均于结肠镜检查时,内镜直视下采用统一型号活检钳,取3块肠黏膜组织。采用荧光定量PCR测定LncRNA LINC00467表达。比较不同分期的UC患者LncRNA LINC00467表达;LncRNA LINC00467表达与UC患者临床特征的关系;比较不同预后的UC患者LncRNA LINC00467表达;采用Cox多因素分析影响预后危险因素。结果LncRNA LINC00467表达比较,活动期组(1.56±0.27)和缓解期组(0.89±0.21)高于对照组(0.34±0.08),活动期组(1.56±0.27)高于缓解期组(0.89±0.21),差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄、病程和病变范围LncRNA LINC00467表达比较无统计学差异(P>0.05);LncRNA LINC00467表达比较,中度(1.30±0.25)和重度(1.67±0.24)高于(0.86±0.16)轻度,且重度(1.67±0.24)高于中度(1.30±0.25),差异有统计学意义(P<0.05)。随访末,预后良好21例,预后不良9例。预后不良组LncRNA LINC00467表达(2.42±0.48)高于预后良好组(0.63±0.12),差异有统计学意义(P<0.05)。经Cox多因素分析显示,疾病活动程度和LncRNA LINC00467表达为影响预后危险因素。结论新疆维吾尔族UC患者LncRNA LINC00467呈高表达,且随着病情加重及预后进展表达越高,及LncRNA LINC00467表达为影响危险因素。     

Linc00460通过海绵吸附影响miR-320a对乳腺癌细胞的有氧糖酵解作用

目的 探讨Linc00460通过海绵吸附miR-320a对乳腺癌（BC）细胞有氧糖酵解作用的影响。方法 qRT-PCR法检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A及5种BC细胞系中Linc00460和miR-320a表达水平。qRT-PCR检测干扰Linc00460对miR-320a表达的影响,双荧光素酶报告基因实验检测miR-320a和Linc00460的靶向关系。将si-Linc00460和miR-320a inhibitor共转染至MDA-MB-231细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-320a表达水平;MTT法检测细胞增殖能力;2-NBDG法检测细胞葡萄糖摄取率;比色法检测细胞上清液中乳酸含量;酶活性试剂盒检测糖酵解关键酶的活性;Western blot检测酵解途径中关键蛋白表达水平。结果 与MCF-10A细胞比较,5种BC细胞系中Linc00460高表达,而miR-320a低表达。干扰Linc00460后,MDA-MB-231细胞中miR-320a表达显著升高。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-320a和Linc00460可靶向结合。干扰Linc00460表达后MDA-MB-231细胞增殖能力受到明显抑制（P=0.000）,细胞葡萄糖摄取率和细胞上清液中乳酸含量降低（均P=0.000）,PFK、PK和LDH酶活性受到抑制（均P=0.000）,PFKM、GLUT1和LDHA蛋白表达水平下调（均P=0.000）。抑制miR-320a可明显逆转si-Linc00460对MDA-MB-231细胞增殖和糖酵解的抑制作用（均P=0.000或0.001）。结论 Linc00460可能通过海绵吸附miR-320a,上调PFKM表达,从而促进BC细胞有氧糖酵解作用。