京尼平苷对高糖高脂诱导的胰岛β细胞胰岛素分泌的影响

目的研究京尼平苷对高糖高脂诱导的胰岛β细胞胰岛素分泌的影响。方法用高糖高脂孵育大鼠胰岛β细胞(INS-1)及原代大鼠胰岛,同时用京尼平苷干预,用放射免疫法检测胰岛素分泌量。结果京尼平苷增加高糖高脂孵育后INS-1细胞的数量;京尼平苷促进高糖高脂孵育后INS-1细胞的胰岛素分泌;京尼平苷改善高糖高脂孵育后原代大鼠胰岛的胰岛素分泌,且通过胰高糖素样肽-1(GLP-1)受体发挥作用。结论京尼平苷通过GLP-1受体调节高糖高脂诱导后胰岛β细胞的胰岛素分泌。     

KPNA2表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞生长的影响

目的:通过分子克隆构建KPNA2过表达载体，探究其对骨肉瘤细胞143B生长的影响。方法:利用Trizol法提取Hela细胞总RNA，而后通过PCR反应扩增KPNA2基因，将扩增产物克隆至表达载体pcDNA3.1+构建KPNA2过表达质粒。通过qPCR实验和Western blot实验检测KPNA2过表达载体转染143B细胞后的表达效率。利用CCK-8、平板克隆形成实验检测143B细胞的增殖状况，利用流式细胞术检测143B细胞的周期分布。结果:qPCR实验和Western blot实验均表明KPNA2过表达质粒转染后，143B细胞内KPNA2表达水平显著上调。CCK-8、平板克隆形成实验结果证实KPNA2上调能够促进143B细胞增殖。流式细胞术结果表明过表达KPNA2能够加快143B细胞周期进程。结论:KPNA2能够促进骨肉瘤细胞系143B生长，为骨肉瘤早期诊断和靶向治疗提供实验依据和理论基础。     

呫吨酮并吡啶衍生物XP-15联合紫杉醇对耐药肝癌细胞QGY-7701 的体外抑制作用

目的:探索呫吨酮并吡啶衍生物XP-15联合紫杉醇对人肝癌QGY-7701耐药细胞株的体外抗肿瘤作用。方法:运用CCK8法、Transwell实验和流式细胞仪检测凋亡技术观察细胞功能学变化，运用Western Blot蛋白免疫印迹技术探索其可能的作用机制。结果:XP-15可明显增强紫杉醇对耐药QGY-7701细胞的抑制作用，XP-15联合紫杉醇作用于耐药QGY-7701细胞24 h后，QGY-7701细胞活力明显减弱，且其侵袭迁移能力明显降低，同时流式细胞仪凋亡检测提示细胞凋亡百分比明显增加。Western Blot蛋白免疫印迹亦证实细胞抗凋亡蛋白bcl-2表达明显降低，肝癌增殖分化相关PI3K及AKT蛋白分子表达减少。结论:XP-15具有增敏紫杉醇诱导耐药QGY-7701细胞凋亡同时抑制其增殖活力的作用，其作用机制可能与下调PI3K-AKT通路活性，同时减少bcl-2抑制凋亡蛋白表达相关。     

非小细胞肺癌浅表转移淋巴结EGFR基因状态及EGFR-TKI疗效分析

目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者浅表淋巴结EGFR基因突变状态及其采用EGFR-TKI治疗的效果。方法:选取经病理确诊为NSCLC转移浅表淋巴结及部分配对肿瘤原发灶石蜡组织标本行EGFR基因检测,分析临床病理资料,比较部分病例浅表淋巴结转移灶与肿瘤原发灶EGFR基因突变状态差异。此外,根据检测结果分组,比较各组的PFS,并采用COX回归分析了解PFS的影响因素。结果:56例浅表淋巴结行EGFR检测,35例EGFR突变阳性与EGFR野生型21例。无吸烟、腺癌与EGFR突变相关,而女性突变率高于男性,但差异无统计学意义(P>0.05)。11例淋巴结与配对肿瘤原发灶一致性分析,两者一致率为81.8%,Kappa值为0.645,P值为0.020。35例EGFR突变阳性者采用EGFR-TKI治疗,其PFS优于21例采用化疗的EGFR野生型组。COX多因素回归显示,校正腺癌、PS评分,EGFR突变阳性者有利于延长PFS。结论:非小细胞肺癌浅表转移淋巴结EGFR突变检测可用于指导EGFR-TKI的使用。     

二甲双胍对PCOS伴不孕症患者糖脂代谢、β胰岛细胞功能和卵巢功能的影响

目的探讨二甲双胍对多囊卵巢综合征(PCOS)伴不孕症患者糖脂代谢、β胰岛细胞功能和卵巢功能的影响。方法将80例PCOS患者随机分为观察组及对照组(每组40例),对照组患者口服来曲唑进行促排卵治疗,观察组患者在对照组治疗的基础上服用二甲双胍,比较两组患者临床疗效以及用药前后血糖血脂水平、β胰岛细胞功能和卵巢功能。结果观察组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);观察组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);观察组空腹血糖(FBG)水平低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);观察组空腹胰岛素(FIN)、胰岛素抵抗指数(Homa-IR)、胰岛β细胞功能指数(Homa-β)水平均低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);观察组患者卵巢体积、卵巢窦卵泡数目均低于对照组,差异有统计学意义(P <0.01);观察组患者子宫内膜厚度高于对照组,差异有统计学意义(P <0.001)。结论二甲双胍可有效改善PCOS伴不孕症患者糖脂代谢水平,提高患者β胰岛细胞功能和卵巢功能。     

血管内皮细胞生长因子促进肝内胆管细胞癌生长的机制研究

目的探究血管内皮细胞生长因子（VEGF）及其受体对肝内胆管细胞癌（ICC）细胞生长调控的作用机制。 方法Western blotting检测VEGF在12例ICC患者肿瘤组织和癌旁正常组织中的表达水平。采用外源性重组人源VEGF（rhVEGF）处理ICC细胞株Huh28后，采用细胞计数检测细胞生长情况，5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）实验检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡。Western blotting检测rhVEGF处理后Huh28细胞中VEGF受体VEGFR1及VEGFR2的表达情况。使用特异性抗体分别阻断VEGFR1及VEGFR2，通过ELISA法检测细胞的凋亡水平。采用慢病毒shRNA构建稳定敲低VEGFR2的ICC细胞株Huh28-shVEGFR2（实验组）和对照细胞株Huh28-shNC（对照组）。采用Huh28-shVEGFR2及Huh28-shNC细胞在10只裸鼠中构建皮下瘤模型，观察肿瘤的生长情况。 结果VEGF在ICC肿瘤组织中蛋白表达水平上调，显著高于癌旁正常组织（P<0.01）。外源性rhVEGF可以促进Huh28细胞生长，抑制细胞凋亡，而对细胞增殖能力无明显影响。rhVEGF处理后Huh28细胞中磷酸化的VEGFR1及VEGFR2表达水平升高（P<0.05）。VEGFR2抗体可以显著逆转rhVEGF介导的抗凋亡作用（P<0.05），而VEGFR1抗体则无明显效果。皮下瘤模型结果显示，与对照组相比，肿瘤生长在实验组中受到显著抑制，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论VEGF是通过VEGFR2依赖的信号通路抑制ICC细胞凋亡，从而促进ICC细胞生长。     

肝内胆管细胞癌根治性切除术后临床预后影响因素的研究

目的探讨肝内胆管细胞癌（ICC）行根治性切除（R0切除）术后的独立预后影响因素。 方法回顾性分析中山大学附属第一医院自2002年1月至2018年8月行R0切除并经病理确诊的237例ICC患者的临床病理及随访资料，采用Kaplan-Meier法构建生存曲线；单因素及多因素COX回归分析筛选影响患者生存预后的独立因素。一致性指数（C-index）、时间依赖性受试者工作特征曲线（ROC曲线）、曲线下面积（AUC）及校准曲线用于评价COX回归模型的预测效能。 结果237例ICC患者的中位生存期为19.93个月（95%CI=14.31~26.21），术后1、2、3年生存率分别为62.3%、45.0%及35.6%。单因素及多因素回归分析显示谷氨酰转移酶（GGT） >53 U/L（P=0.001）、CA125>17.4 U/ml（P<0.001）、淋巴结转移（P=0.039）、肿瘤分化不良（P<0.001）是ICC患者行R0切除术后预后不良的独立危险因素。按照删除概率P>0.1的标准，纳入癌胚抗原（CEA）（P=0.092）后的预后模型C-index为0.74（95%CI=0.68~0.78），不同随访时间点对应的AUC值均在0.8左右，模型具有良好的预测效能。 结论GGT、CEA、CA125、淋巴结转移情况及肿瘤分化程度可作为ICC患者R0切除术后临床预后的预测指标。     

旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对非小细胞肺癌A549增殖的影响

目的:观察旋毛虫(T.spiralis)肌幼虫(ML)排泄分泌蛋白(ESPs)对非小细胞肺癌A549增殖的影响。方法:将A549细胞进行分组,旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白为实验组,顺铂(DDP)为阳性对照组和不加处理的细胞为阴性对照组,通过MTT比色法检测ESPs和DDP对A549细胞增殖活性的影响。结果:MTT检测结果显示,随着ESPs浓度的增加及作用于A549细胞时间的延长,A549细胞的增殖活力逐渐减弱,ESPs对A549细胞具有明显的抑制作用,呈剂量—时间效应。结论:旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对A549细胞的增殖具有抑制作用。     

前列腺小细胞神经内分泌癌患者一例报道并文献复习

目的探讨前列腺小细胞神经内分泌癌的临床诊断和治疗。 方法回顾性分析我院收治的1例前列腺小细胞神经内分泌癌患者的资料。结合相关文献讨论前列腺神经内分泌肿瘤的病理学分型、临床表现、影像学特征、诊治和预后。 结果患者男性，64岁，2014年9月因发现PSA 52.72 μg/L，前列腺穿刺活检提示前列腺腺泡腺癌，Gleason评分3+4=7分，予手术去势，后联合持续抗雄治疗（比卡鲁胺50 mg qd）。2017年5月复查发现盆腔巨大肿物伴肠梗阻，全身多发骨转移、肝脏转移、肺转移。予盆腔肿物切除+横结肠造瘘，术后病理提示前列腺小细胞内分泌癌。患者术后2周开始予多西他赛100 mg d1+卡铂450 mg d1，化疗2周期后因多脏器功能衰竭去世。 结论前列腺癌伴神经内分泌分化为最常见的前列腺神经内分泌肿瘤，前列腺小细胞癌临床罕见，早期手术联合化疗为主要治疗手段，肿瘤恶性程度高、进展快，预后差。