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肝癌中高表达的新基因LAPTM4B对细胞增殖及成瘤性的影响 总被引:12,自引:2,他引:10
目的:研究在肝细胞癌中高表达的新基因LAPTM4B对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响,探讨LAPTM4B基因的生物学功能。方法:构建真核表达质粒pcDNA3-TM4B,利用脂质体稳定转染LAPTM4B cDNA至NIH3T3细胞中,用RT~PCR、Northem和Western杂交法筛选和鉴定转染后LAPTM4B基因高表达的单克隆细胞株,研究其与细胞增殖相关的生物学特征的变化。结果:与转染空载体的对照组相比,转染了LAPTM4B cDNA的NIH3T3细胞表面发生明显变化,微绒毛的数量和长度增加,多分枝且缠绕成团。转染细胞在纤黏连蛋白、人工基膜和层黏连蛋白基质上的黏附/铺展能力增强。生长曲线显示转染细胞的生长速率增高。流式细胞仪检测显示转染细胞的S期细胞数比未转染细胞显著增多,而G0-G1期细胞数减少。Western杂交显示Cyclin E蛋白在转染细胞中的表达显著增加。转染细胞对血清的依赖性下降并具有成瘤性。结论:LAPTM4B基因能影响细胞增殖的调节,促进NIH3T3细胞的增殖,并使NIH3T3细胞具有成瘤性,在肿瘤发生过程中具有重要的作用。 相似文献