离心速度及时间对培养细胞透射电镜样品制备的影响

目的:探讨消化离心法中不同的离心条件对培养细胞超微结构的影响,寻找最佳的离心速度及时间.方法:将培养细胞消化后分成不同的离心速度和时间组,电镜下比较各组细胞超微形态的变化.结果:当离心速度低于800 r/min,8min时,无法收集到足够的细胞量.离心速度2 000 r/min,15 min时细胞挤压变形,胞浆出现撕裂等人工假象.离心速度在800～1 500r/rain,8～15min时制样较容易,细胞超微结构保存良好.结论:消化离心法制备培养细胞透射电镜样品,其最佳的离心速度和时间是800～1 500r/min,8～15min.     

镉对大鼠睾丸支持细胞波形蛋白、E-钙黏蛋白表达及血睾屏障的影响

目的:探讨镉(Cadmium)对大鼠睾丸支持细胞波形蛋白、E-钙黏蛋白表达和血睾屏障的影响。方法:21只6周龄雄性SD大鼠随机分为单纯镉组(0.1%氯化镉腹腔内注射,1 mg/(kg.bw),每周连续注射5 d,处理后1、2、3、4周取材)和对照组(腹腔内注射等量生理盐水);镧示踪组和镉加镧组(镉剂量同上,1周取材),各实验组及对照组均为3只动物。取睾丸作光镜免疫组化和图像分析、血睾屏障超微结构及镧示踪观察。结果:波形蛋白阳性产物主要在支持细胞近基室腔的胞浆中表达,并向曲细精管管腔呈辐射状延伸;E-钙黏蛋白阳性产物主要定位于生精上皮近腔室的支持细胞和部分生精细胞胞浆中。镉处理后两种蛋白阳性产物表达的平均光密度值明显降低,支持细胞胞质特化区和紧密连接破坏。镉加镧处理组硝酸镧透过支持细胞紧密连接间隙。结论:镉减弱大鼠睾丸支持细胞波形蛋白和E-钙黏蛋白的表达,造成支持细胞血睾屏障的损伤。