荧光定量聚合酶链式反应法检测婴儿尿液人巨细胞病毒DNA对人巨细胞病毒感染的诊断意义

目的探讨荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）方法检测婴儿尿液人巨细胞病毒（HCMV）DNA水平对婴儿HCMV感染的诊断价值。方法采用FQ-PCR检测348例临床疑似HCMV感染婴儿尿液中HCMVDNA水平。同时采用化学发光免疫分析法（CLIA）检测婴儿血清HCMV-IgM抗体。在尿液HCMVDNA检测阳性患儿中比较血清HCMV-IgM抗体检测阳性与阴性患儿尿液中HCMVDNA拷贝数差异。结果FQ-PCR检测尿液HCMVDNA的阳性率为41.74%,CLIA检测婴儿血清HCMV-IgM抗体的阳性率为19.83%。2种方法对HCMV感染诊断的符合率为76.7%。前者诊断阳性率显著高于后者（χ^2=69.44P〈0.01）。在尿液HCMVDNA检测阳性患儿中,IgM抗体阳性组尿液HCMVDNA拷贝数显著高于阴性组（P〈0.01）。结论FQ-PCR检测尿液HCMVDNA是早期诊断婴儿HCMV感染的敏感有效的方法。HCMV感染婴儿尿液中高HCMVDNA拷贝数与活动性HCMV感染密切相关;FQ-PCR方法检测尿液HCMVDNA水平对于判断是否为HCMV活动性感染具有一定意义。     

Activation of mucosal phospholipase D in a rat model of colitis

BACKGROUND AND AIMS: Phospholipase D (PLD) hydrolyzes phosphatidylcholine and produces lipid second messengers. Although cellular PLD has recently been recognized as an important signal-transmitting enzyme, the role of PLD in pathophysiologic conditions is largely unknown. In particular, the regulation of PLD in intestinal inflammation has not been previously investigated. The aim of the present study was to elucidate the role of PLD in experimental colitis. METHODS: Rats were intracolonically administered acetic acid and assessed for mucosal damage, mucosal PLD activity, mucosal myeloperoxidase activity, mucosal chemiluminescence and luminal concentration of leukotriene B4. Acetic acid treatment induced acute mucosal injury that was maximal at 24 h after treatment. RESULTS: Mucosal PLD activity was significantly elevated and correlated with mucosal damage. Chemiluminescence in colitic mucosa was inhibited by the addition of ethanol which suppresses the formation of phosphatidic acid catalyzed by PLD. CONCLUSION: These results suggest that PLD is activated in experimental colitis in rats and that PLD may play a role in mucosal damage induced by reactive oxygen metabolites.     

肿瘤标志物联合检测对原发性肝癌的诊断价值

目的应用化学发光标记免疫法联合检测五项肿瘤标志物对肝脏疾病的癌变诊断价值进行评估。方法用化学发光标记免疫法对肝癌组56例、肝硬化组40例、肝炎组47例及正常对照组30例的血清甲胎蛋白、癌胚抗原、肿瘤相关糖类抗原CA199、CA125和铁蛋白进行联检。结果原发性肝癌组、肝硬化组和肝炎组AFP、CA199、CA125和SF含量均高于正常对照组（P〈0．05-0．01）；联合检测原发性肝癌的阳性率均高于转移性肝癌（P〈0．05）。结论应用多项指标联检对肝脏疾病的癌变（尤其是原发性肝癌）的检出率可达95％以上，同时对原发性肝癌与转移性肝癌有很好的鉴别作用。     

聚乙二醇预处理脂血标本前后FT3和FT4的变化

目的：探讨用聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）预处理脂血标本前后游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）和游离甲状腺素（FT4）的变化。方法：将28名正常人组和20例脂血组的血清分两份,一份直接测定,另一份用95g/LPEG液处理标本后,再以放射免疫法测定FT3和FT4。结果：正常人组PEG处理前后,FT3和FT4检测结果差异均无统计学意义（P〉0.05）;而脂血标本组用PEG处理前FT3和FT4检测结果显著高于PEG处理后（P〈0.001）。结论：正常情况下,PEG处理标本不影响FT3和FT4检测。标本经PEG处理后,去除脂质、甲状腺激素自身抗体的干扰,提高结果的准确性。     

应用BED-CEIA方法估算重庆市静脉吸毒人群艾滋病病毒感染的发病率

目的检测重庆市静脉吸毒人群中艾滋病病毒（HIV）新近感染状况并计算HIV发病率。方法收集重庆市两个监测哨点自1999—2006年以来的监测样本共计4711份，通过酶联免疫和蛋白印迹实验检测出HIV-1感染的样本，再应用Ig—G—捕获HIV-1 BED-发病率酶联方法（BED—CEIA），检测其中的新近感染样本，进而估算该人群的HIV-1发病率。结果共检出HIV-1阳性样品130份。哨点A 2001—2005年HIV感染率分别为0．73％、2．02％、1．54％、2．96％、2．80％，发病率分别为0．57％、0．93％、0、1．24％、1．68％；哨点B 2004—2006年HIV感染率分别为4．21％、9、96％、8．13％，发病率分别为0．95％、1．04％、0．90％。虽然两个哨点在发病率方面都有起伏，但差异无统计学意义，感染率与发病率变化趋势一致。结论目前在重庆市监测哨点发现的HIV感染者大部分为既往感染者，发病率维持在较稳定的范围。     

C肽化学发光免疫诊断分析方法的建立及临床应用

目的：建立一种特异、敏感的临床C肽的化学发光免疫分析诊断方法并应用于临床。方法：采用特异性的两株C—P单克隆抗体，辣根过氧化物鲁米诺酶促增敏化学发光体系，利用双抗体夹心法检测。结果：敏感度为0．02μg／，L；检测线性范围为0．02～20μg／L；多人次检测证实试剂盒批内变异均小于10％，分析间变异小于15％；与18μg／L人胰岛素原、2000mIU／L的人胰岛素无显著交叉反应。结论：该方法灵敏度高，特异性好，稳定性强，检测范围宽，有良好的准确性和重复性，适合应用于临床。     

丹酚酸抗氧化活性及其对DNA损伤保护作用

目的探讨丹酚酸抗氧化活性及其对DNA氧化损伤的保护作用机制。方法运用自由基反应模型观察丹酚酸对二苯代苦味酰肼自由基（DPPH）和羟自由基的淬灭效应,使用邻菲罗啉（Phen）-CuSO4-VC-H2O2-DNA化学发光体系测定丹酚酸对DNA损伤的抑制作用。高效液相色谱（HPLC）测定丹酚酸的组成。结果丹酚酸水提物（AE）、乙酸乙酯萃取物（EE）、大孔吸附树脂纯化物（RE）和对照维生素（VC）、二丁基羟基甲苯（BHT）对DPPH自由基的半数清除浓度（IC50）分别为141.2,15.3,14.6,15.8和71.5μg/ml。化学发光体系中,丹酚酸的加入能明显抑制并延迟DNA损伤。AE、EE、RE抑制发光50%浓度（IC50）值分别为1 293.6,62.0,49.2μg/ml。丹酚酸清除DPPH自由基能力和对羟自由基攻击的DNA损伤保护作用受丹酚酸组成和丹酚酸B含量的影响。结论丹酚酸属于预防型和断链型抗氧化剂,并可有效清除DPPH和羟自由基,对DNA损伤有明显保护作用。丹酚酸的抗氧化活性及对DNA损伤的保护作用与丹酚酸B含量有关。     

化学发光法测定白果白蛋白的体外抗氧化活性

目的研究白果白蛋白的体外抗氧化活性、对DNA损伤的保护作用及其作用机制。方法以莲房原花青素和小牛血清蛋白为对照,分别采用邻苯三酚-鲁米诺化学发光体系测定了白果白蛋白对超氧阴离子的清除作用,硫酸铜-邻菲啉-抗坏血酸-双氧水、硫酸亚铁-鲁米诺-双氧水和硫酸亚铁-鲁米诺3个体系测定了白果白蛋白对羟自由基的清除作用,双氧水-鲁米诺体系测定了白果白蛋白对体外双氧水的清除作用,采用硫酸铜-邻菲啉-抗坏血酸-双氧水-脱氧核糖核酸体系测定了白果白蛋白对体外DNA损伤的保护作用。结果白果白蛋白具有较好的体外清除活性氧和保护DNA损伤的活性,但在硫酸亚铁-鲁米诺-双氧水和双氧水-鲁米诺化学发光体系中表现出"促氧化"作用。结论采用化学发光体系衡量白果白蛋白的抗氧化活性具有选择性。     

医院内诺如病毒感染的三种病原学检测方法应用比较

目的找到一种简便易行的检测感染性腹泻粪便标本中诺如病毒的方法。方法用两种酶免疫吸附试剂盒检测北京地区婴幼儿腹泻和综合医院内成人感染性腹泻粪便标本中的诺如病毒,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)作对照,评价这两种试剂盒。用两种试剂盒分别检测69份儿科病房标本和来自3家综合医院15份成人医院内感染性腹泻的粪便标本中诺如病毒;其中5份儿科病房和15份成人病房的粪便标本还同时进行了RT-PCR检测。结果84份粪便标本中,试剂盒甲的诺如病毒检出率为20.2%(17/84),试剂盒乙的诺如病毒检出率为36.9%(31/84);两种试剂盒的符合率为73.8%(62/84),但试剂盒乙的检出率显著高于试剂盒甲(P<0.01)。在应用了RT-PCR检测的20份标本中,阳性率为55.0%(11/20)。试剂盒甲与RT-PCR检测结果相比,检出率明显低于RT-PCR(P<0.05),试剂盒乙与RT-PCR检测结果相比,检出率差异无统计学意义(P>0.05)。3家综合医院的成人标本中,每家医院都有2份或2份以上送检标本诺如病毒检测阳性,结合临床诊断可判定为诺如病毒医院内感染暴发。结论酶免疫吸附方法检测诺如病毒感染简便易行、利于推广,试剂盒乙可以替代RT-PCR方法应用于临床。3家综合医院都存在诺如病毒医院内感染的暴发。     

Ge—132对人白细胞吞噬氧化活性的影响

目的：研究有机锗（Ｇｅ－１３２）对健康成人白细胞吴噬氧化活性的影响。方法：采用改良的人全血化学发光法测定Ｇｅ－１３２相当于在全血中所测定血浆浓度中Ｇｅ元素含量的：①１０、１０００、２０００倍时白细胞的化学发光值；②１０倍加５μｇ氢化可的松时白细胞的发光值。结果：①Ｇｅ－１３２对应的锗量在低于所测定血浆浓度锗量的１００倍时，对白细胞的吞噬氧化活性具有显著激发作用，而Ｇｅ－１３２在高于所测定血浆浓度的