The knockdown of MALAT1 inhibits the proliferation,invasion and migration of hemangioma endothelial cells by regulating MiR-206 / VEGFA axis

AimLncRNA MALAT1 is involved in regulation of angiogenesis, however, its expression and mechanism in infantile hemangioma (IH) are less reported. The study aimed to investigate MALAT1 in IH and to reveal the potential mechanism of MALAT1 acting on IH.MethodsIsolated form IH tissue, human CD31⁺ hemangioma endothelial cells (HemECs) were cultured and sorted by magnetic-activated cell sorting (MACS). Quantitative real-time (qRT)-PCR was performed to detect the expressions of MALAT1, miR-206 and VEGFA. The correlations among MALAT1, miR-206 and VEGFA were confirmed by bioinformatics analysis and dual-luciferase reporter assay. The effects of MALAT1, miR-206 and VEGFA on cell proliferation were detected by cell counting kit-8 (CCK-8) and cell colony formation assay. Flow cytometry, wound scratch, Transwell and Tube formation assay were performed to determine cell apoptosis, migration, invasion and vasoformation, respectively. Apoptosis-related proteins were determined by Western blot.ResultsThe results showed that MALAT1 and VEGFA were high-expressed and miR-206 was low-expressed in IH tissues. SiMALAT1 negatively affected the cell proliferation, migration, invasion and vasoformation of HemECs and promoted apoptosis of HemECs. Moreover, Bcl-2 expression was significantly inhibited and the expressions of Bax and c cleaved-3 were greatly promoted. MALAT1 directly targeted and inhibited the expression of miR-206, and VEGFA was predicted to be the target gene for miR-206. SiMALAT1 suppressed the cell proliferation, migration, invasion and vasoformation of HemECs through modulating miR-206/VEGFA axis.ConclusionKnock-down of MALAT1 inhibits the growth of HemECs through regulating miR-206/VEGFA axis, indicating that MALAT1 is a potential therapeutic mechanism for the treatment of IH.     

lncRNA LINC00858靶向微小 RNA-363-3p促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨LINC00858通过靶向miR-363-3p对肝癌HCCLM3细胞生物学行为的影响.方法 选取2017年1月至2019年1月青海省第五人民医院收治的肝癌病人30例,获取其肝癌组织及其癌旁组织.设置si-NC组、si-LINC00858组、si-LINC00858+anti-miR-NC组和si-LINC00858+anti-miR-363-3p组.实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测LINC00858和miR-363-3p表达水平;双荧光素酶报告实验验证LINC00858和miR-363-3p的靶向关系;CCK-8检测细胞增殖活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法(Western blotting)法检测相关蛋白表达.结果 肝癌组织中LINC00858高表达(2.85±0.27),miR-363-3p低表达(0.58±0.05).LINC00858靶向调控miR-363-3p;抑制LINC00858能够上调p21表达,下调细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达,降低细胞活力、迁移数、侵袭数(P<0.05).干扰miR-363-3p表达逆转了抑制LINC00858表达对肝癌HCCLM3细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结论 抑制LINC00858通过靶向上调miR-363-3p抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭.     

LncRNA TUG1通过调控miR-196b-5p调控卵巢癌细胞凋亡和放射敏感性分子作用机制

目的 探讨LncRNA TUG1通过调控miR-196b-5p表达对卵巢癌细胞凋亡和放射敏感性的影响及其潜在的作用机制。方法 运用qRT-PCR和Western blot检测卵巢癌细胞株SKOV3、HO8910、OVCAR3和正常卵巢上皮细胞HOSE中miR-196b-5p和TUG1的表达水平。双荧光素酶报告基因分析法验证TUG1可能的靶基因。建立TUG1抑制表达、miR-196b-5p过表达及si-TUG1和anti-miR-196b-5p共转染的SKOV3细胞株,流式细胞术检测细胞凋亡率。采用克隆形成实验检测各组SKOV3细胞不同剂量X射线照射后的存活情况,曲线拟合计算不同剂量辐射后各放射生物学参数。结果 正常卵巢上皮细胞HOSE相比,卵巢癌细胞SKOV3、HO8910及OVCAR3中miR-196b-5p的表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),TUG1的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-196b-5p是TUG1的靶基因。TUG1抑制表达或miR-196b-5p过表达均促进SKOV3细胞凋亡,差异有统计学意义(P<0.05)并增加其放射敏感性,差异有统计学意义(P<0.05)。抑制miR-196b-5p表达可部分逆转抑制TUG1表达对SKOV3细胞促进凋亡和增强放射敏感性作用。结论 TUG1可负性调控miR-196b-5p的表达,抑制TUG1表达,可促进卵巢癌细胞凋亡,增加细胞放射敏感性。     

子宫颈鳞状细胞癌组织中LncRNA HCG11和miR-590-3p的表达及其与预后的关系

 目的 探讨LncRNA HCG11和miR-590-3p在子宫颈鳞状细胞癌组织及配对的癌旁组织中的表达情况,以及二者表达水平与患者临床资料和预后的相关性。方法 收集58例子宫颈鳞状细胞癌和配对的癌旁正常组织标本,运用qRT-PCR法检测58对子宫颈鳞状细胞癌组织及相应的癌旁组织中的LncRNA HCG11和miR-590-3p的表达,分析与宫颈鳞状细胞癌临床病理和预后的相关性,并评价其临床意义。结果 荧光定量PCR显示宫颈鳞状细胞癌组织中LncRNA HCG11的表达比癌旁组织明显下调（P<0.05）,miR-590-3p的表达比癌旁组织明显上调（P<0.05）;二者在核酸表达水平上呈负相关（r=-0.642, P=0.000）。 LncRNA HCG11和miR-590-3p的表达均与宫颈癌淋巴结转移、组织大小及临床分期之间存在显著的相关性,且与预后相关（P<0.05）。Cox回归多因素分析发现LncRNA HCG11和miR-590-3p分别可作为宫颈鳞状细胞癌患者独立的预后因子。结论 LncRNA HCG11和miR-590-3p可作为宫颈鳞状细胞癌独立的预后标志物和潜在的治疗靶点,LncRNA HCG11可能通过调控miR-590-3p的表达量从而发挥抑癌基因的作用。     

支气管哮喘病儿外周血单核细胞中 LncRNA MEG3的表达及其与肺功能、免疫功能的相关性研究

目的 探讨支气管哮喘病儿外周血单核细胞中长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)的表达及其与肺功能和免疫功能的相关性.方法 选取2017年10月至2018年9月安阳市妇幼保健院收治的支气管哮喘病儿60例为观察组,根据疾病严重程度分为轻度组(20例),中度组(20例),重度组(20例),同时选取同期体检的40例健康儿童作为对照组.均行肺功能检测,采用qRT-PCR检测各组外周血单核细胞中LncRNA MEG3表达量;血细胞分析仪检测嗜酸性粒细胞计数水平,ELI?SA法检测免疫球蛋白E(IgE)水平血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17A(IL-17A)、γ干扰素(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,比较各组肺功能、免疫功能指标、血清炎性介质及LncRNA MEG3水平差异,Pearson相关检验分析支气管哮喘病儿外周血单核细胞中LncRNA MEG3表达量与肺功能指标、免疫功能指标及炎性介质的相关性.多元线性回归分析LncRNA MEG3表达量与病情严重程度、肺功能、免疫功能的关联影响关系.结果 重度组,中度组及轻度组LncRNA MEG3表达水平高于对照组[(0.30±0.07)、(0.42±0.06)、(0.67±0.10)比(1.01±0.13)](P<0.05),重度组LncRNA MEG3表达水平高于中度组及轻度组(P<0.05),中度组LncRNA MEG3表达水平高于轻度组(P<0.05);重度组,中度组及轻度组FEV1[(52.19±9.86)、(59.73±8.02)、(73.18±12.90)比(93.06±10.43)],FEV1/FVC[(65.23±9.65)、(72.05±5.28)、(80.12±8.12)比(93.25±10.90)]及PEF[(42.27±5.98)％、(59.94±5.67)％、(70.22±6.59)％比(86.52±3.57)％]低于对照组(P<0.05),重度组FEV1,FEV1/FVC及PEF低于中度组及轻度组(P<0.05),中度组FEV1,FEV1/FVC及PEF低于轻度组(P<0.05),重度组,中度组及低度组IgE[(110.25±13.32)U/mL、(84.92±12.98)U/mL、(56.61±11.21)U/mL比(23.21±5.81)U/mL]、嗜酸性粒细胞计数水平[(0.45±0.04)×109/L、(0.36±0.03)×109/L、(0.20±0.02)×109/L比(0.13±0.03)×109/L]、IL-4[(20.24±4.07)ng/L、(16.71±3.17)ng/L、(12.23±1.59)ng/L比(8.03±2.25)ng/L]、IL-17A[(119.51±8.52)ng/L、(100.89±6.28)ng/L、(85.74±9.05)ng/L比(52.67±13.24)ng/L]水平高于对照组(P<0.05),重度组IgE、嗜酸性粒细胞计数水平、IL-4、IL-17A水平高于中度组及轻度组(P<0.05),中度组IgE、嗜酸性粒细胞计数水平、IL-4、IL-17A水平高于轻度组(P<0.05),重度组、中度组及轻度组IFN-γ[(40.13±5.39)ng/L、(50.01±6.45)ng/L、(60.30±5.42)ng/L比(69.87±6.51)ng/L]、TGF-β[(709.74±36.53)ng/L、(836.77±42.64)ng/L、(1,002.35±53.34)ng/L比(1,940.88±224.39)ng/L]低于对照组(P<0.05),重度组IFN-γ、TGF-β低于中度组及轻度组(P<0.05),中度组IFN-γ、TGF-β低于轻度组(P<0.05),相关分析显示,支气管哮喘病儿LncRNA MEG3表达水平与IgE、IL-4、IL-17A呈负相关(P<0.05),与IFN-γ、TGF-β呈正相关(P<0.05),与FEV1,FEV1/FVC及PEF呈正相关(P<0.05).多元线性回归显示,病情严重程度、肺功能、免疫功能与LncRNA MEG3表达量有密切的关联影响关系(P<0.05).结论 支气管哮喘病儿外周血单核细胞中LncRNA MEG3的表达量降低,并且与病情相关,其可能通过对免疫功能及炎症介质的调节参与支气管哮喘的发病及进展过程.     

小细胞肺癌组织中LncRNA AK09398的表达及与预后的关系研究

背景与目的 小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)约占肺癌的15％,由于较早发生血行及淋巴转移,SCLC患者的预后差,其具体机制尚不明确.研究发现LncRNA(noncoding RNA,ncRNA)在肿瘤的发生、发展、转移、凋亡中起着重要的作用.本研究旨在探讨LncRNA AK09398在SCLC组织标本中的表达及临床意义.方法 通过qRT-PCR法检测LncRNA AK09398在118例临床资料完整的SCLC肺癌组织及正常肺组织标本中的表达,分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系.结果 LncRNA AK09398在肺癌癌组织中的平均表达水平为(7.813±0.373),与癌旁组织(1.782±0.116)及正常肺组织(1.209±0.200)比较,差异有统计学意义(F=58.41,P＜0.001).LncRNA AK09398在SCLC组织标本中的表达较癌旁组织明显增高.LncRNAAK09398的表达与患者的年龄、性别无关,差异无统计学意义(p均＞0.05);与疾病分期、淋巴结转移及远处转移、化疗敏感性及生存状态明显相关,差异有统计学意义(P均＜0.05).高表达LncRNA AK09398患者的总生存时间及无进展生存时间均较低表达者明显缩短;Cox多因素回归模型分析提示,LncRNA AK09398的表达、远处转移及临床分期是SCLC独立的预后因素(P＜0.05).结论 LncRNA AK09398参与调节SCLC的发生发展,可能作为潜在的SCLC预后评估的分子标志物.     

LncRNA在非小细胞肺癌中的研究进展

肺癌相关死亡是世界范围内癌症导致死亡的最常见原因.非编码RNA无蛋白编码功能,但可发挥多种生物学作用.长链非编码RNA是最新表征的一种至少包含200个核苷酸且不编码蛋白的RNA.多种长链非编码RNA具有促进或抑制肿瘤进展的功能,包括非小细胞肺癌.由于他们在调节基因表达方面的基本作用并涉及肿瘤发生的生物学机制,有望成为以组织或血液为基础的癌症生物标志物.在该综述中,我们着重强调lncRNA在非小细胞肺癌中的作用,并讨论其作为诊断及预后标志物、治疗靶标的潜在临床应用.     

USP51 deubiquitylates H2AK13,15ub and regulates DNA damage response

Dynamic regulation of RNF168-mediated ubiquitylation of histone H2A Lys13,15 (H2AK13,15ub) at DNA double-strand breaks (DSBs) is crucial for preventing aberrant DNA repair and maintaining genome stability. However, it remains unclear which deubiquitylating enzyme (DUB) removes H2AK13,15ub. Here we show that USP51, a previously uncharacterized DUB, deubiquitylates H2AK13,15ub and regulates DNA damage response. USP51 depletion results in increased spontaneous DNA damage foci and elevated levels of H2AK15ub and impairs DNA damage response. USP51 overexpression suppresses the formation of ionizing radiation-induced 53BP1 and BRCA1 but not RNF168 foci, suggesting that USP51 functions downstream from RNF168 in DNA damage response. In vitro, USP51 binds to H2A–H2B directly and deubiquitylates H2AK13,15ub. In cells, USP51 is recruited to chromatin after DNA damage and regulates the dynamic assembly/disassembly of 53BP1 and BRCA1 foci. These results show that USP51 is the DUB for H2AK13,15ub and regulates DNA damage response.