RNA干扰对骨桥蛋白不同片段表达的影响

目的 观察RNA干扰技术对肝癌细胞株内骨桥蛋白(osteopontin,OPN)不同片段的抑制效果,以期为针对OPN的靶向治疗提供更准确、有效的位点.方法 应用合成OPN序列特异性双链RNA(OPNi-A、OPNi-B、OPNi-C),转染人HEP G2肝癌细胞株,用荧光定量PCR和免疫组化检测比较OPN的mRNA和蛋白表达情况.结果 OPNi-A、OPNi-B、OPNi-C转染HEP-G2后,A片段的荧光强度大于B片段和C片段.RNA干扰HEP-G2细胞株48 h后,A、B、C、三个片段的OPNmRNA的△CT值分别从干扰前的8.31±1.58、8.78±1.49、8.25±1.51上升至12.14±1.43、10.22±1.97、10.48±1.88 (P＜0.05)；三个片段的OPN蛋白水平免疫组化评分也从干扰前的6.44±1.67、5.43±2.05、5.45±2.52下降到2.84±1.52、4.43±1.65、3.95±1.43.结论 RNA干扰对肝癌细胞株内骨桥蛋白不同片段有不同的抑制作用.合成更具针对性的siRNA可能对抑制肝癌侵袭转移具有重要的科学和卫生经济学意义.     

胃癌患者血清骨桥蛋白检测的临床意义

目的 探讨外周血骨桥蛋白（OPN）作为胃癌肿瘤标志物检测的临床意义.方法 应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测205例胃癌患者手术前后血清OPN的质量浓度,对照组为60例健康志愿者.结果 胃癌患者血清OPN检测的敏感性和特异性为别为71.2%和86.3%,血清OPN水平与胃癌组织的OPN表达、肿瘤大小、临床分期、淋巴结和器官转移、脉管内癌栓及复发有关.治疗前后OPN的质量浓度具有显著差异,术后复发患者与正常对照组有显著差异.结论 OPN是一种较理想的胃癌肿瘤标志物.     

糖尿病大鼠骨质疏松发病过程中骨桥蛋白变化的实验研究

目的 研究糖尿病大鼠骨质疏松发病过程中骨桥蛋白的表达。方法 24只雄性Wistar大鼠随机分成2组，糖尿病大鼠组12只，空白对照组12只，饲养4月后处死动物，检查骨桥蛋白mRNA水平表达。 结果 糖尿病组骨桥蛋白总RNA提取及RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳显示，糖尿病组大鼠在骨质疏松发病过程中，骨桥蛋白在骨组织中高表达，与空白对照组相比，差异具有显著性。 结论 骨桥蛋白在糖尿病大鼠骨组织有显著性改变，推测骨桥蛋白参与调节骨质疏松发病过程。     

血清VEGF、OPN浓度与进展期胃癌术后复发关系的临床研究

目的 研究进展期胃癌患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)及骨桥蛋白(OPN)浓度与进展期胃癌术后复发的关系,以探讨其作为进展期胃癌术后复发筛查标记物的价值。方法 采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测术前及术后不同时期40例进展期胃癌患者血清中VEGF、OPN浓度,观察其阳性率、表现阳性的时间与术后复发的关系,并与CEA、CA199及影像学检查相比较。结果 进展期胃癌根治术后血清VEGF、OPN浓度及阳性率明显下降,与术前比较其差异有统计学意义(P<0.05);术后转移或复发患者血清VEGF、OPN浓度及阳性率再次升高,与术后1月对比差异有明显统计学意义(P<0.01);术后复发患者VEGF、OPN浓度及阳性率明显高于未复发者,差异有明显统计学意义(P<0.01);术前及术后复发时VEGF、OPN单独检测阳性率高于CEA、CA199,其表现阳性的时间亦早于CEA、CA199,其差异均有统计学意义(P<0.05),联合检测时前者亦高于后者,其差异均有统计学意义(P<0.05);血清VEGF、OPN浓度升高表现阳性的时间明显早于胃镜、CT等影像学检查,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论 进展期胃癌患者血清VEGF、OPN主要由肿瘤组织分泌产生,术后监测其血清浓度可用于早期预测和发现肿瘤的转移复发。     

骨桥蛋白表达与结直肠癌临床病理特征及预后的关系

目的 探讨骨桥蛋白( OPN)在结直肠癌组织中的表达与临床病理特征及预后的关系. 方法 应用免疫组化SP法测定112例结直肠癌患者癌组织及癌旁正常组织中OPN表达水平,分析OPN表达与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系. 结果 结直肠癌组织中OPN阳性表达率明显高于相应癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0. 05),其表达水平与肿瘤直径、分化程度、TNM分期、原发肿瘤浸润深度相关;OPN阳性表达组的无病生存时间和总体生存时间均短于阴性表达组,差异有统计学意义( P<0. 05 ). OPN的阳性表达是结直肠癌患者预后的独立影响因素. 结论结直肠癌患者癌组织中OPN呈高表达, OPN在组织中的高表达与患者的早期复发及不良预后密切相关.     

血清CA125和骨桥蛋白联合检测对卵巢癌的诊断价值

目的：探讨联合检测血清CA125和骨桥蛋白（OPN）对卵巢癌的诊断价值。方法分别采用化学发光法及ELISA法检测卵巢癌、卵巢良性肿瘤、正常对照组的CA125和OPN水平,对其血清浓度以及阳性率进行统计分析。结果卵巢癌组的CA125和OPN水平明显高于良性肿瘤组及正常对照组,差异有显著性（P<0.05）;良性肿瘤组CA125和OPN明显高于正常对照组,差异有显著性（P<0.05）;卵巢癌组的CA125、OPN单项检测及联合检测的阳性率均明显高于良性肿瘤组及正常对照组,差异有显著性（P<0.05）;卵巢癌组CA125和OPN联合检测的阳性率明显高于单项检测的阳性率（P<0.05）,且联合检测在早期卵巢癌优于晚期卵巢癌。结论联合检测卵巢癌患者血清CA125和OPN优于单项检测,且联合检测可明显提高卵巢癌的早期诊断率,以及卵巢癌的诊断准确率。     

血清骨桥蛋白水平与类风湿关节炎活动性的关系及在伴肺间质病变中的意义

Objective To investigate the association between serum level of osteopotin (OPN) and disease activity of rheumatoid arthritis (RA) patients, and explore the importance of OPN in the pathogenesis of interstitial lung disease (ILD) in RA. Methods Sixty-five RA patients and 20 healthy controls were pros-pectively enrolled. RA patients were divided into active group (n=43) and inactive group (n=22), and ILD groups (n=24) and non-ILD group (n=41). Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the serum levels of OPN in patients with RA and healthy controls, and the relationship between OPN and other clinical and laboratory findings were analyzed. Results ① Serum OPN tended to be significantly higher in RA patients (median, 18.0 ng/ml) than in the healthy controls (median, 14.3 ng/ml), P<0.01; ②The serum level of OPN in RA patients showed a significant positive correlation with the course of disease, numbers of tender joints , ESR and CRP, but no positive relationship was found in number of swollen joints; ③ The serum level of OPN was significantly higher in RA-ILD patients (median, 20.0 ng/ml) than that in non-lLD (median, 17.0 ng/ml, P<0.05). And there was remarkable negative correlation between the concentration of serum OPN and the value of PaO2, but no association was found with pulmonary function %VC and %DLCO. ④ Compared with the non-ILD group, the ILD group had more active disease in terms of tender joint counts and swollen joint counts, ESR, CRP (P<0.01) and the serum titer of RF-IgM, (P<0.05). Conclusion OPN plays a role in the pathogenesis of RA and is related to the disease activity. It may serve as an active disease inflammatory marker of RA . OPN may be involved in the pathogenesis of RA related ILD and is associated with the severity of pulmonary damage.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠草酸钙肾结石形成的影响及其机制研究

观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对肾结石的治疗作用及对肾脏的保护作用,并对其可能机制进行探讨.采用乙二醇联合氯化铵灌胃的方法建立大鼠草酸钙肾结石模型,并以EGCG对其进行干预.采集大鼠J血液标本,检测大鼠血肌酐、尿素氮以及血钙等生化指标;收集大鼠尿液标本,观察并比较大鼠24h尿量、尿草酸以及尿钙水平;取大鼠肾脏标本制成组织切片,观察大鼠草酸钙肾结石的病理变化.采用实时定量PCR及Western blot对肾组织中骨桥蛋白(OPN)的表达水平进行检测.结果发现,与正常组大鼠相比,结石组大鼠血肌酐、尿素氮、尿钙、尿草酸水平以及肾组织内OPN表达水平均显著升高(P＜0.05),而24h尿量则显著降低(P＜0.05);与肾结石组大鼠相比,在EGCG处理后,大鼠血肌酐、尿素氮、尿钙以及尿草酸水平显著降低(P＜0.05),同时24h尿量显著升高(P＜0.05),呈浓度依赖性.与对照组相比,肾结石组大鼠肾组织草酸钙结石病理改变明显,而在EGCG处理后,大鼠肾脏病理改变明显改善,呈浓度依赖性.此外,EGCG处理后大鼠肾脏OPN表达水平显著降低,也呈浓度依赖性.结果可推知EGCG能够抑制大鼠肾脏内草酸钙肾结石的形成,并对肾功能有明显的保护作用.     

柔肝方含药血清对TGF-β1 诱导人肝星状细胞表达骨桥蛋白的影响及其机制

目的:研究柔肝方含药血清对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肝星状细胞表达骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的影响及其作用机制。方法:30只SD大鼠,随机分成正常组、柔肝方低剂量(9 g·kg-1)给药3 d及5 d组、柔肝方高剂量(18 g·kg-1)给药3 d及5 d组,每组6只,按10 m L·kg-1·d-1灌服饮用水或柔肝方药液,制备含药血清。用含10%正常血清或含药血清的DMEM培养基体外培养LX-2人肝星状细胞株,MTT法检测细胞增殖;LX-2细胞经含10%正常血清或含药血清的培养基预处理24 h,再予TGF-β1(终质量浓度10μg·L-1)刺激24 h,收集细胞,RT-PCR法检测OPN mRNA表达,Western blot法检测OPN及磷酸化蛋白激酶B(p-protein kinase B,p-PKB)蛋白表达。结果:与正常组比较,各含药血清组均能抑制LX-2细胞增殖(P0.05,P0.01);予含药血清预处理再经TGF-β1刺激的细胞,与正常组细胞比较,OPN mRNA,OPN和p-PKB蛋白表达明显下调(P0.05,P0.01)。结论:柔肝方含药血清对TGF-β1诱导的人肝星状细胞表达OPN具有抑制作用,其机制可能与抑制PI3K/PKB信号通路活化有关。     

超声检查联合CA125、OPN检测在卵巢癌诊断中的应用

目的探讨超声检查联合糖类抗原125(CA125)、骨桥蛋白(OPN)检测在卵巢癌诊断中的应用价值。方法选取2017年1月至2018年3月在我院治疗的卵巢肿瘤患者89例,其中良性肿瘤51例,恶性肿瘤38例,均采用彩色超声检查,同时检测血清CA125和OPN水平。结果超声检查诊断卵巢癌灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为76.32%、92.16%、87.88%和83.93%;恶性肿瘤患者血清CA125和OPN分别为143.92(34.38,210.29)U/ml和167.28(41.29,200.82)ng/ml,明显高于良性肿瘤(P<0.05);血清CA125、OPN判断卵巢良恶性肿瘤的ROC曲线下面积分别为0.887和0.865,截断值分别为54.26 U/ml和67.58ng/ml,灵敏度分别为84.10%和81.60%,特异度分别为90.20%和89.88%;超声检查联合CA125和OPN检测诊断卵巢癌灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为92.11%、82.35%、79.54%和93.33%。结论超声检查联合CA125、OPN检测在卵巢癌诊断中具有较好的应用价值,值得临床应用。