K562／ADM耐药细胞株的建立及其生物学特性的初步观察

我们建立的K562/ADM耐药细胞株,在ADM浓度为2.4μg/m1(4.46μM)中已稳定培养3.5个月,传了30—35代,K562/ADM亦具有多药耐受件(Multidrug Resistance,MDR)的特点,对ADM、VCR、AT—1258和DDP的耐受性分别为K562的114.7、94.0、13.3和7.4倍,但对5—FU不产生交叉耐药。K562和K562/ADM的倍增时间分别为19.2h和52.8h,集落生成率分别为37.5％和11.1％,K562染色体数为34—68,中位数为56;K562/MDM染色体数为32—90,中位数为50,K562/ADM可做为耐药机理和克服耐药措施研究的极好模型。     

生长抑素受体亚型在人鼻咽癌细胞株CNE2中表达

背景与目的：生长抑素受体（somatostatin receptor SSTR）在许多肿瘤组织均有表达，为生长抑素类似物如奥曲肽用于这些肿瘤的治疗提供了生物学基础，但对生长抑素受体在鼻咽癌中表达情况的研究甚少。本研究旨在了解生长抑素受体基因在鼻咽癌细胞中的表达情况，为生长抑素类似物用于鼻咽癌治疗的进一步研究提供试验基础。方法：采用RT—PCR法和SP免疫组化法联合检测体外培养的人鼻咽癌细胞株CNE2的SSTRs表达，并对PCR mRNA产物测序以鉴定结果。结果：RT—PCR提示人鼻咽癌细胞株CNE2分别表达生长抑素受体亚型SSTR1、SSTR2、SSTR4；免疫组化结果：人鼻咽癌细胞株CNE2表达SSTR1、SSTR2A为强阳性（〉60％），表达SSTR4为弱阳性、SSTR2介于两者之间、SSTR3和SSTR5则无表达。结论：我们的研究证实人鼻咽癌细胞株CNE2有多种生长抑素受体亚型基因表达，且以表达SSTR1、SSTR2较多。     

生长抑素对人肝癌细胞株BEL-7402血管内皮生长因子表达与合成的影响

研究表明生长抑素可以抑制肿瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF)的释放，其机制涉及多种受体后信号传导途径，本实验以体外培养的人肝癌BEL-7402细胞株为研究对象，观察生长抑素类似物奥曲肽对肝癌细胞VEGF表达与合成的影响，并初步探讨其作用机制。     

流式细胞光度术在鼻咽癌上皮样细胞株细胞周期动力学研究中的应用

本实验应用流式细胞光度术研究鼻咽癌上皮样细胞株（ＣＮＥ）的细胞周期动力学。结果发现ＣＮＥ细胞仍保持原代细胞的ＤＮＡ含量水平（超三倍体和亚四倍体），随着细胞接种时间的延长细胞周期中Ｇ０／Ｇ１时相细胞的百分数逐渐升高，而Ｓ％和Ｇ２＋Ｍ％则逐渐降低。该项研究还发现随着孵育时间的延长，细胞周期中各时相细胞的运动均逐渐延缓，其中以Ｇ０／Ｇ１和Ｇ２＋Ｍ时相细胞的运动减慢较为明显。     

pp32表达引起人肝癌细胞HepG2形态改变

目的:研究pp32在肝癌细胞中的作用.方法:采用RT-PCR的方法钓取pp32全长基因.脂质体介导的方法将pp32基因导入HepG2细胞.观察细胞形态,血清依赖性和接触抑制等细胞表型,测量细胞生长曲线,检测ALP、LDH、γ- GT、ALB和AFP等生化指标.结果:成功钓取了pp32全长基因,筛选获得pp32稳定表达的HepG2细胞株.pp32表达使HepG2细胞伸出细长突起,但不影响HepG2细胞增殖.ALP和LDH酶活力升高,其他指标没有变化.结论:pp32表达引起人肝癌细胞HepG2形态改变,但不改变其恶性表型.     

鼠髓样白血病细胞株NFS-60不依赖细胞的克隆

目的构建诱导型表达载体pTKS3-CAT，并转染人表达G-CSF受体的NFS-60不依赖细胞，将粒细胞集落刺激因子（G-CSF）依赖的细胞株鼠髓样白血病细胞株NFS～60，筛选为NFS-60不依赖细胞的克隆。方法在培养体系中加入0．5-10ng/ml浓度的rhG-CSF，培养、传代。结果得到NFS-60不依赖细胞株的克隆，其细胞表面包含G-CSF相应受体，而增殖曲线不依赖于G-CSF因子浓度。结论克隆NFS-60不依赖细胞作为工程细胞用于G-CSF样活性化合物发现的研究。     

槲皮素对K562/A02细胞株热休克蛋白mRNA及蛋白质表达的影响

目的 了解槲皮素对K562／A02细胞株70kd热休克蛋白(HSP70)基因及蛋白质表达的影响。方法 热处理前后加入终浓度为10μmol／L的槲皮素，RT-PCR方法检测HSP70基因mRNA表达，Western blot方法检测HSP70蛋白表达。结果 热处理明显增加K562／A02细胞HSP70基因mRNA转录和蛋白表达；热处理前加入槲皮素，HSP70基因mRNA及蛋白表达均显著下调；热处理后加入槲皮素，HSP70基因mRNA及蛋白表达无明显变化。结论 热处理能明显增加K562／A02细胞HSP70基因转录和蛋白表达；槲皮素能抑制K562／A02细胞HSP70基因mRNA及蛋白的表达，并且抑制点早于HSP70的基因转录；槲皮素在K562／A02细胞HSP70基因转录启动后则不再有抑制作用。