浅谈喹诺酮类药的临床应用

喹诺酮类药物是一类人工合成的含4-喹诺酮基本结构，对细菌DNA螺旋酶(DNA gyrase)具有选择性抑制作用的抗菌药物。该类药物以其抗菌谱广，抗菌活性强，使用方便，疗效确切，毒副作用小等特点，无论在研究开发还是临床应用方面均倍受重视。     

PCR-RSSO基础上HLA-Ⅰ、Ⅱ基因分型的研究

目的通过对PCR-DNA技术的分析,探讨人类白细胞抗原(HLA)基因分型方法。方法采用PCR反向序列特异性寡核苷酸(polymerase chain reaction-reverse sequence specific oligonucleotide,PCR-RSSO)杂交技术,建立改良半量扩增体系全自动HLA-I、Ⅱ等位基因分型方法,进行了635份血液标本HLA-A、B、C、DR、DQ等位基因分型,其中166份DNA同时采用序列特异性引物技术(PCR-SSP)和手工全量扩增体系PCR-RSSO技术。对全自动半量PCR-RSSO、PCR-SSP、手工PCR-RSSO 3种方法做两两比较。结果全自动半量PCR-RSSO的分型成功率为98.4%(3 124/3 175),PCR-SSP为98.8%(656/664),手工PCR-RSSO为88.3%(733/830)。经χ2检验,全自动半量PCR-RSSO与PCR-SSP的分型成功率无统计学差异,与手工PCR-RSSO有显著差异(P<0.05)。结论PCR-RSSO可识别HLA-Ⅰ,Ⅱ共706个等位基因,覆盖WHO命名委员会2000年公布的936个等位基因的75.43%;对706个HLA等位基因的分型均为中~高分辨率,有分辨纯合子等位基因的能力;易长期保存书面的实验原始资料,即杂交条;具有成本低、劳动强度低、省时和DNA消耗量少等优点。PCR-RSSO适合于造血干细胞移植和建立造血干细胞及脐带血干细胞库的组织配型。     

耐药相关蛋白P-gp、GST-π、TopoⅡ在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的探讨原发性肝癌组织中的P-糖蛋白（P—glycoprotein，P—gP）、谷胱甘肽-S转移酶-π（glutahione-S—transferase-π，GST-π）、DNA拓扑异构酶Ⅱ（DNA—topoismerase，TopoⅡ）耐药基因的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法检测35例肝癌组织、20例癌旁和10例肝硬化组织中P—gP、GST-π、TopoⅡ的表达，并对其组织病理指标及3年生存率进行综合分析。结果①35例肝癌中的P—gp、GST-π、TopoⅡ的阳性表达率分别为85．7％、71．4％、31．4％。②肝癌组织中P—gp、GST-π表达显著高于癌旁组织及肝硬化组织。③P—gp＋GST-π＋TopoⅡ阳性表达率为17．1％，P—gp＋GST-π、P—gp＋TopoⅡ和GST-π＋TopoⅡ阳性率分别为60％、14．3％、2．8％，其中P—gP＋GST-π和GST-π＋TopoⅡ的阳性表达具有相关性（P〈0．01）。④TopoⅡ表达阳性者的3年生存率低于阴性者。结论①原发性肝癌多药耐药与其P—gp、GST-π、TopoⅡ表达有关。②对肝癌患者化疗前进行耐药基因检测，对患者化疗用药具有指导意义，有助于联合用药的合理选择，提高疗效及延长患者生存期。     

应用DHPLC筛查人类mtDNA高变区I的异质性

【目的】检测人类mtDNA HVI区的异质性，建立有效的筛查低水平异质性DNA的技术。【方法】扩增人mtDNA的HVI区内269bp的片段，以不同比例混合相差一个碱基的2种DNA片段的PCR扩增产物，配制异质性DNA模型，用变性高效液相色谱技术(DHPLC)检测，确定最佳检测条件。【结果】应用DHPLC检测HVI区的片段(269bp)，最低可检测出含量为5％的异质性样本。在80例无关个体的mtDNA样本中，共检测到15例具有异质性。【结论】所建立的PCR-DHPLC方法可用于检测mtDNA的异质性。     

人类基因组中短串联重复序列的研究及应用现状

短串联重复序列(short tandem repeat，STR)也称做微卫星(Microsatellite)DNA。广泛存在于真核生物基因组中，具有高度的多态性，作为新一代遗传标记，STR以其独特的优势保存下来，使分子生物学方面的研究发生了翻天覆地的变化。     

抗DNA酶B与ASO联合测定对小儿链球菌感染的诊断价值

目的:探讨抗DNA酶B与抗链球菌溶血素"O"(ASO)联合测定对小儿链球菌感染的诊断价值.方法:分别测定126例小儿链球菌感染患者(分成4组)和50例健康人群抗DNA酶B和ASO水平,计算各组别的阳性率,并进行分析.结果:急性不典型风湿热组、肾炎上感组、急性咽炎组等组别,抗DNA酶B与ASO联合测定阳性率差异无显著性(P>0.05).而肾炎皮损组、肾炎恢复期组差异有极显著性(P<0.01).结论:抗DNA酶B与ASO联合检测可以提高小儿链球菌感染的检出率.     

拉曼光谱技术在肿瘤与DNA损伤研究中的应用进展

拉曼光谱是由分子对入射光产生的频率发生较大变化的非弹性散射现象所形成的发射光谱，1928年由印度物理学家拉曼(Raman)发现。每一种物质(分子)有自己特征的拉曼光谱，因此可以用拉曼光谱表征这一物质，因而拉曼光谱是研究物质结构的重要手段之一。1939年拉曼光谱成为非破坏性的分析方法之一。长期以来由于传统色散型拉曼光谱仪结构复杂，并且有荧光干扰等问题，所以拉曼光谱的应用受到限制。     

ECH030肠道病毒基因测序完成

复旦大学公共卫生学院姜庆五教授领衔的课题组与国际知名传染病研究机构——美国公共卫生研究所合作，于日前在世界上首先完成了无菌性脑膜炎病原发埃可30(ECH030)肠道病毒全基因测序。有关专家认为，由于该病毒源于疾病暴发人群样本，对于阐明ECH030的致病性和基因变异特点都极为重要。     

树舌多糖GF对小鼠HepA瘤基因组DNA甲基化影响的实验研究

目的初步探讨树舌多糖GF对小鼠HepA瘤基因组甲基化的影响.方法提取基因组DNA,采用限制性酶切片段长度多态性分析的方法进行甲基化检测.结果 HpaII酶切结果:树舌多糖组可见3个条带,猪苓对照组可见3个条带, 阴性对照组可见4个条带,正常对照组可见2个条带.MspI酶切结果:树舌多糖组可见6个条带,猪苓对照组可见5个条带,阴性对照组可见5个条带,正常对照组可见6个条带.结论小鼠HepA瘤基因组DNA是低甲基化的,树舌多糖GF有阻碍小鼠HepA瘤基因组DNA低甲基化发生的趋势,可能还具有抗5mC的突变的作用.