告达庭诱导人肝癌细胞SMMC7721凋亡的作用

目的：观察Caudatin体外对人肝癌细胞SMMC7721的作用。方法：采用MTT法测定不同浓度的Caudatin作用于SMMC7721细胞24，48和72h对其生长的抑制作用。用流式细胞仪以PI单染检测细胞周期、以Annexin V／PI双染检测细胞凋亡，比色法测定Caspase-3酶活力。结果：Caudatin体外能抑制人肝癌细胞SMMC7721的增殖并呈明显的时间和剂量依赖性。Caudatin体外能诱导SMMC7721细胞凋亡，并使细胞周期阻滞于G0／G1期。Caspase-3的酶活力随着Caudatin体外作用时间的延长先升高并于8h达到最大，再随时间的变化而降低。结论：Caudatin体外能显著抑制人肝癌细胞SMMC7721的生长，其抗肿瘤作用可能与其抑制肿瘤细胞增殖、阻滞细胞周期于G0／G1期，并通过激活Caspase-3诱导肿癌细胞凋亡有关。     

文冠果果壳提取物对学习记忆障碍的改善作用

目的研究文冠果果壳乙醇提取物、总皂苷及ST-n-2对学习记忆障碍的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用跳台法观察东莨菪碱和亚硝酸钠所致学习记忆障碍小鼠的学习记忆能力,八臂放射状迷路法观察( )-MK-801致学习记忆障碍大鼠的学习记忆能力。结果文冠果果壳乙醇提取物、总皂苷及ST-n-2均显著改善东莨菪碱所致的记忆获得障碍和亚硝酸钠所致的记忆巩固障碍,文冠果果壳乙醇提取物显著改善( )-MK-801所致的工作记忆和参照记忆障碍。结论文冠果果壳乙醇提取物、总皂苷及ST-n-2对学习记忆障碍均有显著改善作用,其作用机制可能与增强中枢胆碱能神经系统及谷氨酸能神经系统功能、抗脑组织耗氧损伤有关;总皂苷是文冠果果壳改善记忆障碍的有效部位,ST-n-2是其主要有效成分之一。     

徐长卿种子质量的比较研究

目的考查不同生长状况下徐长卿种子的质量。方法测定种子的千粒重及发芽率。结果山东徐长卿种子的千粒重在3.63~6.17g,发芽率在85%~98%。26℃的温度易于种子萌发。结论2年生植株产的种子质量优于1年生植株的种子。随着时间的延长,徐长卿种子的发芽率受到一定影响。     

白首乌的化学成分研究

从白首乌Cynanchum auriculatum Royle ex Wight中分离并鉴定了7个化合物,分别为:蒲公英醇乙酸酯(Ⅰ),Cynanchone A(Ⅱ),丁二酸(Ⅲ),白桦脂酸(Ⅳ),开德苷元(Ⅴ),隔山消苷CIN(Ⅵ),隔山消苷KIN(Ⅶ)。其中化合物Ⅰ-Ⅳ为首次从该植物中分得。     

青羊参遗传转化中组织培养系统的研究

目的建立用于遗传转化的青羊参组织培养系统。方法以不同外植体部位、不同消毒剂、不同消毒时间建立无菌苗;以不同外植体部位、不同激素种类及配比、不同质量浓度的2,4-D与KT诱导青羊参愈伤组织形成、继代、分化;测定青羊参对标记基因分解物庆大霉素(Gent.)的敏感性。结果以青羊参的种子及茎段做外植体,以10%次氯酸钠消毒种子20～30min,或以0.2%HgCl2消毒茎段3min建立无菌苗具有最好效果;青羊参的种子、根、茎、叶易于形成愈伤组织;2,4-D对青羊参愈伤组织的形成是必要的;青羊参对KT较为敏感,不论用KT诱导青羊参愈伤组织的形成,还是诱导胚芽或腋芽形成,均有较好效果;以MS为基本培养基,以2,4-D1.0mg/L KT1.0mg/L为激素配比诱导青羊参愈伤组织的形成具有较好效果;以MS 2,4-D0.5mg/L KT0.5mg/L继代愈伤组织具有较好效果;以MS KT0.5mg/L NAA0.1mg/L诱导种子的胚芽或茎段的腋芽萌发具有较好效果;青羊参的愈伤组织不论来源于种子,还是来源于根、茎、叶,不论使用激素6-BA,还是使用KT、ZT、2ip均未观察到愈伤组织分化形成不定芽;100μg/mL的庆大霉素是青羊参转基因植株筛选的最佳压力。结论通过基因枪介导转基因时,选择种子或茎段在MS 2,4-D1.0mg/L KT1.0mg/L培养基上萌动14d,形成愈伤但未形成芽的材料作为基因枪轰击材料较好。     

老瓜头愈伤组织诱导培养技术的研究

目的为老瓜头Cynanchum komarovii资源利用提供前期的生物技术实验参考。方法以老瓜头的根段、茎段和叶片为外植体,采用正交试验方法,筛选诱导愈伤组织产生的最适培养基;进行愈伤组织增殖培养过程中,测定了不同时间愈伤组织的鲜、干质量,绘制愈伤生长曲线;同时进行了愈伤组织分化培养基的实验筛选。结果不同外植体诱导愈伤产生,其根诱导效果最好,各处理诱导率达90%~100%,茎段和叶片愈伤组织诱导最佳配方分别为MS 2,4-D1.0mg/L 6-BA2.0mg/L NAA0.5mg/L和MS 2,4-D0.5mg/L 6-BA0.5mg/L NAA0.5mg/L,茎段比叶片较容易诱导,各处理诱导出的愈伤组织质地松散,颜色鲜黄,几乎无褐化现象。愈伤组织继代生长在第10天进入对数生长期,愈伤鲜生长量最大达4.961g,干质量0.496g。愈伤组织的分化率很低,很难生芽,易分化出钉状根。结论对于诱导愈伤形成,根段是最佳的外植体,筛选出了茎段和叶片诱导愈伤的最适配方,愈伤组织生长量较大,但分化困难。     

元宝枫叶中黄酮类化合物的提取工艺优选

目的优化提取元宝枫叶中黄酮类化合物,并比较不同条件下元宝枫提取物抑制脂肪酸合成酶(FAS)活性的大小。方法采用L16(44)正交试验考察不同提取工艺条件,测定元宝枫叶中黄酮类化合物的量及其抑制FAS活性的大小。结果黄酮类化合物的最佳浸提工艺:25℃温度下,乙醇体积分数为40%,固液比为1∶15,提取2.5h。结论元宝枫叶中黄酮类化合物的量及其对FAS的抑制率之间不呈现正相关。其中一部分黄酮类成分对FAS有抑制作用。     

白藜芦醇合酶基因的克隆及丹参的转化

目的为探索利用分子生物学技术培育新型药用植物的新途径,将外源的白藜芦醇合酶(RS)基因导入到丹参中表达,以改善或增加丹参的效用。方法根据已公布的核苷酸序列,利用引物悬挂延伸法,经过3次扩增,最终从葡萄基因组DNA中获得完整的RScDNA基因序列;以质粒pBin438为基础,构建含有RS目的基因的组成型植物表达载体。在根癌农杆菌介导下,利用叶盘法转化丹参,进而通过PCR、PCR-Southern杂交对不同的转基因植株进行筛选与检测。结果总共得到了45棵卡那霉素抗性植株,经PCR和PCR-Southern杂交检测,确定葡萄RS基因已整合到部分转基因丹参苗的基因组中。结论成功建立了白藜芦醇合酶基因转化丹参的体系,并获得了转基因植株。     

青羊参遗传转化中组织培养系统的研究

目的建立用于遗传转化的青羊参组织培养系统。方法以不同外植体部位、不同消毒剂、不同消毒时间建立无菌苗;以不同外植体部位、不同激素种类及配比、不同质量浓度的2,4-D与KT诱导青羊参愈伤组织形成、继代、分化;测定青羊参对标记基因分解物庆大霉素(Gent.)的敏感性。结果以青羊参的种子及茎段做外植体,以10%次氯酸钠消毒种子20～30min,或以0.2%HgCl2消毒茎段3min建立无菌苗具有最好效果;青羊参的种子、根、茎、叶易于形成愈伤组织;2,4-D对青羊参愈伤组织的形成是必要的;青羊参对KT较为敏感,不论用KT诱导青羊参愈伤组织的形成,还是诱导胚芽或腋芽形成,均有较好效果;以MS为基本培养基,以2,4-D1.0mg/L KT1.0mg/L为激素配比诱导青羊参愈伤组织的形成具有较好效果;以MS 2,4-D0.5mg/L KT0.5mg/L继代愈伤组织具有较好效果;以MS KT0.5mg/L NAA0.1mg/L诱导种子的胚芽或茎段的腋芽萌发具有较好效果;青羊参的愈伤组织不论来源于种子,还是来源于根、茎、叶,不论使用激素6-BA,还是使用KT、ZT、2ip均未观察到愈伤组织分化形成不定芽;100μg/mL的庆大霉素是青羊参转基因植株筛选的最佳压力。结论通过基因枪介导转基因时,选择种子或茎段在MS 2,4-D1.0mg/L KT1.0mg/L培养基上萌动14d,形成愈伤但未形成芽的材料作为基因枪轰击材料较好。     

徐长卿多糖的分离纯化与化学结构研究Ⅰ

 目的:研究中药徐长卿中一种葡聚糖的化学结构。方法:采用柱层析进行分离纯化,并用甲基化分析和¹³C-NMR等方法阐明多糖CPB-2IG的化学结构。结果:该多糖分子量为17×10⁴,由单一葡萄糖组成,比旋度为+1592°,构型为α型,单糖的连接方式为1,6连接。结论:CPB-2IG的化学结构为直链α-D--(1→6)葡聚糖。