人促红细胞生成素在大肠杆菌中融合高表达：稀有密码子对外源蛋白翻译速率的影响

本实验分别用两种融合表达载体（ｐＧＥＸ－２Ｔ及ｐＤＳ－６Ｈ）在大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ中表达人促红细胞生成素（ｈ－ＥＰＯ）。结果发现，虽然ｈ－ＥＰＯ基因中大肠杆菌使用频率为０％或１％的密码子占密码子总量的１４．３％，但实验中却取得了较高的蛋白表达量。ｐＧＥＸ－２Ｔ和ｐＤＳ－６Ｈ中表达的融合蛋白（分子量：４４４００和２３８００）分别占细菌总蛋白的２９．７％和１７．５％。从而提示，一个基因中的密码子使用频率与翻译延长速率之间可能不是一种简单的对应关系。表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ中５＇融合基因长度达１３００ｂｐ，而ｐＤＳ－６Ｈ中仅为３６ｂｐ，而ｐＤＳ－６Ｈ但两者表达水平却无显著差异，因此作为翻译起始限制因素的翻译起始区的ＡＴＧ下游顺序仅需长约３６个核苷酸。     

连续消毒对水中大肠杆菌抗力曩探讨

Under defined conditions E. coli were subjected to repeated chlorine disinfections 10 times. The survival E. coli at 30 s (A10), and the survival E. coli at 10 min (B10) had no difference in resistance to chlorine to their original strain (A0). However, the compound E. coli (C10) survived at various contact time showed an increased resistance than their original strain (A10), the degree of increased resistance varying with different conditions of disinfection. E. coli C1(0) lost its increased resistance after it has been passaged 10 times on nutrient agar.     

过氧戊二酸对大肠杆菌噬菌体f2杀灭机理

观察结果表明过氧戊二酸对大肠杆菌噬菌休ｆ２有较强的杀灭作用，并影响其吸附特性和感染能力。电镜观察表明过氧戊二酸处理后的ｆ２颗粒聚集成团、变形破碎或残缺不全，这可能是ｆ２灭活的主要原因。     

紫外线话筒消毒仪消毒效果观察

在公共场所 ,人们经常接触的话筒可能会被细菌污染 ,通过接触话筒可传播疾病。鉴于这种情况 ,我们对紫外线话筒消毒仪的杀菌情况进行了观察。材料与方法　 (1 )供试验用的紫外线话筒消毒仪为锦州市电光医疗器械厂生产 ,按照消毒技术规范进行操作。试验菌为大肠杆菌 (ATCC 80 99)。对大肠杆菌进行活菌计数 ,大肠杆菌培养 48h ,观察结果 ,选择 1× 1 0 5～ 1× 1 0 6 cfu/ml的浓度进行实验。 (2 )吸取菌悬液 0 1ml加入灭菌平皿中 ,放 37℃温箱中待干 ,将平皿放于距紫外线话筒消毒仪 5cm处杀菌 ,时间分别为 30s ,1 ,3 ,5min ,同时作 2个不经…     

重组鼠肝素辅因子Ⅱ在大肠杆菌的表达及纯化

重组鼠肝素辅因子Ⅱ（ｒＨＣⅡ）ｃＤＮＡ在ＰＥＴ一５ａ质粒载体被构建，克隆到大肠杆菌株ＤＨ５ａ；ｒＨＣⅡ蛋白在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）被表达为非糖基化蛋白。用肝素琼脂糖柱，ＭｏｎｏＱ和ＭｏｎｏＳ柱层析纯化ｒＨＣⅡ，获得高活性和纯度单一的ｒＨＣⅡ。ｒＨＣⅡ在免疫反应及硫酸皮肤素或肝素依赖性凝血酶抑制活性方面，与天然鼠血浆ＨＣⅡ无明显差异。     

洗必泰对大肠杆菌组织组织和细胞色素氧化酶的影响

本文用电镜和组织化学显微分光光度法观察了洗必泰对大肠杆菌作用前后的组织结构和细胞色素氧化酶的活性和含量，结果表明洗必泰作用后大肠杆菌的细胞壁膜破坏，细胞色素氧化酶的活性降低，此可能是大肠杆菌致死的重要原因。     

地高辛素标记的DNA探针快速鉴定产不耐热肠毒素大肠杆菌的研究

用地高辛素标记的６７０ｂＰ－ＬＴ－ＤＮＡ片段作为探针，用菌落原位杂交法对９株标准参考株进行检测，结果全部相符。对７０株从临床分离的菌株也进行菌落原位杂交．并与３２－Ｐ标记的探针进行比较．结果地高辛素探针的特异性为９７．７％，敏感性为１００％，符合率为９８．６％。从含正常肠道菌的粪便中可以直接检出ＬＴ－ＥＴＥＣ而无须经纯培养。定量试验表明本法最低检出量为６ＣｆｕＬＴ－ＥＴＥＣ／斑点。整个检测过程短．仅须２４～３０ｈ。探针的稳定性好，有效期可长达１年。     

rhTPO在大肠杆菌中的表达、纯化及生物活性分析

目的：探讨人促血小板生成素(human thromlbopoietin，hTPO)在大肠杆菌中表达、分离纯化及生物学活性初步鉴定。方法：利用RT-PCR法从人胎肝细胞中扩增目的基因片段，将其定向插入pQE30表达质粒T5启动子下游的多克隆区，转化大肠杆菌M15，得到pQE30-TPO的工程菌，诱导目的蛋白表达、纯化。将表达产物给血小板减少模型小鼠尾静脉注射，观察注射后不同时间血小板量的改变。结果：经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside IPTG)诱导培养，该工程菌可以产生单一特异性的高表达蛋白条带。将纯化后的表达蛋白注射小鼠，结果显示对实验性小鼠血小板减少症具有一定的治疗作用。结论：在大肠杆菌中成功地高效表达了重组hTPO，该产物具有促血小板生成的活性。     

幽门弯曲菌研究进展

<正> 幽门弯曲菌(Campylobacter pylori或pyloridis,又名胃窦弯曲菌)早在30年代末就有人注意到,但认识其特性及其与胃部疾病的关系还是80年代的事。1983年澳大利亚的Marshall首先从胃炎病人胃粘膜活检标本中分离到弯曲状革兰氏阴性杆菌,