不同性别大鼠创伤失血性休克后多形核白细胞反应的差异及胃复安干预的实验研究

本研究在以下几个方面具有创新：（1）将腺苷引入心肺复苏治疗中，观察腺苷与肾上腺素合用对心跳停搏后A主循环恢复率和复苏成功率的影响，结果表明合用腺苷可明显提高自主循环恢复率和复苏成功率；（2）观察腺苷在心肺复苏中对兔心、脑组织病理结构和超微结构的影响，结果表明腺苷可以明显减轻心脑组织的损害；（3）观察腺苷窒息大鼠心脏和肠系膜微循环的影响，并观察到肾上腺素对微循环无明显改善作用，联合应用腺苷可以改善微循环；（4）将激光多普勒血流量图象仪引入心肺复苏中，动态观察窒息大鼠肠壁组织血液灌流量变化，并观察到腺苷可以增加肠壁组织血流灌注量。[编者按]     

X-连锁肾上腺脑白质营养不良患者氢质子核共振波谱特征及其临床意义

目的研究X-连锁肾上腺脑白质营养不良(X-ALD)患者的氢质子核共振波谱(1HMRS)特点及其在早期诊断中的作用和意义。探讨血极长链脂肪酸(VLCFA)水平、1HMRS表现与疾病的关系。观察Lorenzo油治疗后患者VLCFA水平、1HMRS的变化情况。方法7例患者均测定VLCFA水平,对其中6例在MRI定位下选定病变明显区、病变周围区及似正常区行1HMRS检测,计算N-乙酰天冬氨酸(NAA)、肌酐(Cr)、胆碱复合物(Cho)的峰面积及NAA/Cr、Cho/Cr和NAA/Cho比值。其中2例患者(1例尚未出现临床症状,1例已经发病)于Lorenzo油治疗3个月后复查VLCFA水平及1HMRS波谱。结果NAA/Cr在病变明显区比病变周围区明显降低(1.32±0.57,2.01±0.33,P<0.05),Cho/Cr在病变周围区比似正常区明显升高(2.34±0.34,1.83±0.25,P<0.05)。VLCFA水平不能反映病变的严重程度,Lorenzo油治疗3个月后患者VLCFA下降,1HMRS波谱显示未出现临床症状者中枢脱髓鞘明显减轻,已出现临床症状者波谱变化不大。结论1HMRS对X-ALD的早期诊断有重要帮助,可以先通过MRI发现中枢神经系统的脱髓鞘病变,在MRI表现正常区代谢产物已有改变,MRI和1HMRS表现可以直接反映病变的严重程度。VLCFA水平与病变的严重程度没有相关性。早期口服Lorenzo油可以延缓疾病进展,改善症状。     

逆行荧光标记观察猫上橄榄复合体向内耳的投射

Objective To investigate the distribution and projective feature of cat olivocochlear neurons. Methods Eleven adult cats were divided into two groups randomly. The experimental group of eight cats was injected of I% cholera toxin B (CTB) to the left cochlea, while injected of 5% fluoro gold (FG) to the right cochlea. The control group of three cats was injected of saline to bilateral cochlea. After a survival time of 7 days, serial frozen sections were cut in the cat brainstem. All the sections were processed by immunofluoreseent procedure for CTB and FG, and the labeled olivocochlear neurons were observed byfluorescent microscope. Results In the experimental group, the mean total of olivocochlear neurons labeled by CTB and FG was 3210 ± 168, including lateral olivocochlear neurons (LOC, 2298 ± 120) and medial olivocochlear neurons (MOC,913 ± 64). The labeled neurons were divided into three different types according to their feature of projection: neurons which only projected to the ipsilateral cochlea, neurons which only projected to the contralateral cochlea, and double-labeled neurons which projected both to the ipsilateral and contralateral cochlea, but the double-labeled neurons comprised 3.9% and 15. 1% in the LOC and MOC system respectively. No labeled neurons were found in the control group. Conclusions There are three types of neurons in the cat olivocochlear system. The neurons which projected to the bilateral cochlea may distribute both in the LOC and MOC system.     

绝经期乳腺癌妇女服用他莫昔芬后Ki-67及Bcl-2在子宫内膜中的表达

目的:评估绝经期乳腺癌妇女服用他莫昔芬(tamoxifen,TAM)后Ki-67及Bcl-2在子宫内膜中的表达。方法:46例绝经后因乳腺癌服用TAM超过6个月妇女的子宫内膜为研究组,行宫腔镜检查及内膜活检。18例因子宫脱垂行子宫切除的绝经后妇女的萎缩型子宫内膜为对照组。用免疫组化法测定Ki-67及Bcl-2在子宫内膜中的表达。结果:与对照组比较,Ki-67在TAM相关内膜腺上皮细胞呈显著高表达(15.41±4.83vs9.05±5.52,P=0.009);Bcl-2在TAM相关内膜腺上皮细胞呈较高表达,但与对照组比较无统计学差异(0.50±0.17vs0.43±0.11,P=0.077)。结论:绝经后乳腺癌妇女服用TAM能引起子宫内膜细胞增殖,但并不代偿性促进细胞凋亡,诱导细胞增殖是TAM对绝经后子宫内膜作用机理的一部分。     

地塞米松对急性淋巴细胞白血病患儿核转录因子-κB表达的影响及意义

目的探讨儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白的表达及意义,观察地塞米松(DEX)对其活性的影响,为临床寻求以NF-κB为靶点的治疗手段的依据。方法1.应用SP免疫组化法,检测20例ALL患儿和20例正常对照儿童NF-κB p65蛋白表达。2.用SP免疫组化法检测DEX对ALL细胞NF-κB p65蛋白活性影响。结果1.ALL患儿20例的NF-κB p65蛋白阳性表达率为85.50%(17/20),表达定位于ALL细胞胞核及胞浆中,明显高于正常对照组10.0%(2/20),两者比较有显著性差异(χ2=22.56 P<0.01)。2.临床治疗剂量的DEX 5.0 mg/L作用于ALL细胞24 h,能显著抑制NF-κB p65蛋白表达,其阳性表达率为(25.0±3.0)%,与未处理的ALL细胞比较,有显著性差异(t=55.00 P<0.01)。结论1.NF-κB p65蛋白表达于儿童ALL细胞中。2.抑制NF-κB的活性可能是DEX作用于儿童ALL细胞的机制之一,抑制NF-κB信号传导途径可能在儿童ALL治疗中有重大价值。     

ERK信号转导通路蛋白在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及与肿瘤恶性程度的相关性研究

目的研究细胞外信号调节激酶p-ERK1/ERK2在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达与临床的病理关系。方法应用免疫组织化学方法检测p-ERK1/ERK2在33例卵巢上皮细胞癌,21例良性卵巢上皮性肿瘤标本中的定性表达情况,采用Image-ProPlus图象分析系统对表达强度行半定量分析。结果①p-ERK1/ERK2在良性上皮性肿瘤中的表达率为33.3%,在卵巢上皮细胞癌中的表达率为72.7%,其中Ⅳ期、Ⅲ期的表达明显高于Ⅱ期、Ⅰ期(P<0.05);②p-ERK1/ERK2表达强度与肿瘤组织病理学分期有关(P<0.05),良性肿瘤的表达明显低于恶性肿瘤(P<0.05)。结论p-ERK1/ERK2在卵巢上皮细胞癌中高表达,且表达强度与卵巢上皮细胞癌的分期相关;ERK蛋白的表达在卵巢上皮细胞癌患者的发生、发展中可能起重要促进作用,可以作为预测卵巢上皮细胞癌恶性程度及预后的指标。     

亲体部分肝移植治疗肝豆状核变性

目的通过对儿童期肝豆状核变性(WD)1例的亲体部分肝移植术(LRLT)后的肝脏病理学研究,探讨WD患儿LRLT的手术适应证。方法采集WD患儿LRLT后的受体和供体的肝脏标本,进行HE、MASSON、Timm′s、Rubeanic染色。结果WD患儿肝脏HE、MASSON染色表现为不同程度的退行性变,胶原纤维增生明显及典型假小叶形成;Timm′s、Rubeanic染色发现不均匀分布黑色颗粒或团块样物质沉积,处于典型肝硬化阶段,与临床Child Pugh分级存在差异。结论肝脏病理对WD的手术时机选择有重要价值,在肝脏病理支持的基础上,手术指征可适当放宽。     

早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞与成纤维细胞共培养模型的建立

目的建立早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)与肺成纤维细胞(LF)共培养模型,为研究肺发育和肺损伤时AECⅡ和LF的相互作用提供实验基础。方法分离、纯化胎鼠AECⅡ和LF,通过插入式培养皿和培养板来构建AECⅡ-LF共培养模型。AECⅡ以5×105／mL的密度接种到6孔板中,LF以1×106／mL的密度接种到PCF插入式Millicell培养皿中,以6孔板中不放入套皿单独培养的AECⅡ为对照。用倒置显微镜观察AECⅡ形态和基本生长情况,台盼蓝染色了解细胞成活情况,免疫细胞化学染色法检测AECⅡ Ki67表达。结果早产大鼠AECⅡ和LF共培养模型成功构建。共培养2 d与单独培养2 d相比,AECⅡ的形态、活力和增殖无明显差异。共培养4 d,AECⅡ仍可保持其细胞形态,细胞数目、细胞活力;AECⅡ Ki67表达较单独培养4d 明显增加。结论体外构建的早产大鼠AECⅡ与LF共培养模型,部分模拟了体内微环境。AECⅡ和LF共培养体系有利于保持 AECⅡ的增殖和分化功能,可用于体外研究肺发育和肺损伤时AECⅡ和LF的相互作用。     

更昔洛韦治疗特发性血小板减少性紫癜应用指征

目的探讨更昔洛韦(GCV)治疗人巨细胞病毒(HCMV)感染相关的特发性血小板减少性紫癜的(ITP)应用指征。方法选择血清HCMV DNA PCR和(或)HCMV IgM检测呈阳性ITP患儿46例,采用逆转聚合酶扩增反应(RT-PCR)检测巨核系祖细胞中HCMV晚期抗原mRNA,并行GCV治疗,判定其疗效及应用指征。结果46例血清HCMV-DNA PCR阳性和(或)血清HCMV-IgM阳性的ITP骨髓巨核祖细胞HCMV晚期抗原基因mRNA阳性19例,GCV治疗有效16例,mRNA阴性27例,GCV治疗有效4例。阳性组疗效高于阴性组,有显著性差异(P<0.01)。结论HCMV感染的ITP患儿,若对常规治疗无效,应检测其巨核祖细胞内HCMV晚期抗原基因mRNA,阳性者是应用更昔洛韦的有效指征。     

体外诱导小鼠骨髓单个核细胞向内皮分化的实验研究

目的:为组织工程研究做准备,分离培养小鼠骨髓单个核细胞并诱导向血管内皮分化。方法:成年Balb/c小鼠,应用淋巴细胞分离液(密度1.077g/m l),将长骨骨髓经F icoll非连续密度梯度离心,收集中层的单个核细胞,加入诱导培养基并置于纤维连接素包被的培养板上进行诱导分化,观察细胞生长状况,以透射电镜及Ⅷ因子、CD31、Lectin免疫组化以及流式细胞仪方法对培养细胞进行鉴定。结果:细胞圆形、纺锤形单层融合贴壁生长;Ⅷ因子、CD31、Lectin免疫组化染色阳性;透射电镜显示细胞具有内皮特征性的W-P小体。结论:采用F icoll密度梯度离心可获得较高纯度的骨髓单个核细胞,经体外培养并诱导分化,具有血管内皮细胞的特征。