芫花主要黄酮成分对肝微粒体UGTs及UGT1A1活性的体外抑制作用

目的 考察芫花主要黄酮成分芫花素和芹菜素对尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGTs）及UGT1A1活性的影响。方法 采用体外肝微粒体孵育模型,以4-硝基酚（4-nitrophenol,4-NP）为底物检测UGTs活性,胆红素为底物检测UGT1A1活性;利用UV及UPLC-MS/MS测定底物或代谢产物的含量。结果 对UGTs,在大鼠肝微粒体、小鼠肝微粒体以及人肝微粒体孵育体系中,芫花素和芹菜素均能不同程度地抑制UTGs活性;抑制强弱顺序：在大鼠肝微粒体温孵体系中,芫花素>芹菜素;在小鼠肝微粒体以及人肝微粒体温孵体系中,芹菜素>芫花素。对UGT1A1,在人肝微粒体孵育体系中,芫花素和芹菜素均表现为中等强度的竞争性抑制作用,抑制强弱顺序：芹菜素（IC₅₀=12.40 μmol·L^-1）>芫花素（IC₅₀=23.21 μmol·L^-1）。结论 芫花素和芹菜素对不同肝微粒体孵育体系中UGTs及UGT1A1均可产生显著抑制作用且存在种属差异。芫花素及芹菜素可能存在基于UGT酶的药物相互作用。     

芹菜素对百草枯致小鼠肺纤维化保护作用及机制研究

目的 研究芹菜素对百草枯致小鼠肺纤维化的保护作用及机制。方法 将小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组（1 mg/kg）和芹菜素低、高剂量（10、20 mg/kg）组,除对照组外,其他各组ip百草枯（50 mg/kg）建立小鼠肺纤维化模型,第8天开始ig给药,连续给药21 d。观察小鼠体质量变化;测量小鼠肺系数;采用HE染色观察肺组织形态学变化;免疫组化法观察小鼠肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达变化;ELISA法检测各组小鼠肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原和炎症因子肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、IL-1β含量;Western blotting法测定肺组织Caveolin-1蛋白表达水平。结果 造模第28天时,与模型组比较,芹菜素低、高剂量组小鼠体质量显著增加（P<0.05）;地塞米松组和芹菜素低、高剂量组肺系数显著降低（P<0.05）;芹菜素低、高剂量组肺组织内炎性细胞浸润较少、肺泡壁断裂及肺泡腔融合较少,肺纤维化程度较轻;芹菜素低、高剂量组和地塞米松组小鼠的肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原和IL-6、IL-1β、TNF-α含量显著下降（P<0.01）,Caveolin-1蛋白表达显著下降（P<0.01）。结论 芹菜素对百草枯诱导小鼠肺纤维化具有保护作用,其机制可能与Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及炎症因子水平下调、Caveolin-1蛋白表达水平下调相关。     

芹菜素对L02细胞非酒精性脂肪性肝炎模型炎症反应及胰岛素抵抗的改善作用

目的 探讨芹菜素对游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)诱导的L02细胞的非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)模型的炎症反应和胰岛素抵抗的治疗活性。方法 FFA处理L02细胞24 h,建立NASH细胞模型;MTT法检测细胞生长抑制率并制定安全给药浓度;油红O染色法观察细胞脂质沉积情况;Elisa法检测细胞的白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)含量;Western-blot法及Elisa法检测细胞的胰岛素受体(IR)的含量。结果 MTT试验显示芹菜素最高给药浓度(280.00 μg·mL^-1)下,细胞生长抑制率仅为18.8%;与模型组比较,芹菜素高、中、低剂量组(250,150,100 μg·mL^-1)GLUT-4和IR的含量相均明显提高(P<0.01),而高、中剂量组的IL-8、TNF-α含量和脂变率均明显下降(P<0.01)。结论 芹菜素可调节细胞脂变率和IL-8、TNF-α、GLUT-4、IR的含量,改善FFA诱导的L02细胞NASH模型的胰岛素抵抗及炎症反应,且具有极小的细胞毒性。     

LC-MS/MS测定大鼠口服芫花粗提物后芹菜素、3’-羟基芫花素和芫花素的血药浓度

目的建立一个灵敏、快速的液相色谱-质谱联用法同时测定大鼠口服芫花粗提物后芹菜素、3’-羟基芫花素和芫花素在血浆样品中的浓度。方法以秦皮甲素为内标,大鼠血浆样品经液液萃取后,以甲醇-0.5%甲酸(80∶20)为流动相,采用Lichrosorb Rp-C18(4.5 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离,通过ESI三重四级杆串联质谱,以多反应监测(MRM)方式进行检测。结果芹菜素、3’-羟基芫花素和芫花素测定方法的线性范围均为10~2 000 ng·m L-1;定量下限为10 ng·m L-1。该方法被成功应用于芫花粗提物在大鼠体内的药动学研究。结论该方法灵敏度高,操作简便,分析速度快,适用于含有芹菜素、3’-羟基芫花素或芫花素的药物测定或药动学研究。     

白背叶提取物芹菜素对裸鼠人胃癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响

目的:研究白背叶提取物芹菜素对裸鼠人胃癌SGC-7901细胞移植瘤生长及凋亡的影响.方法:建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,连续11 dig给予芹菜素600,300,150 mg·kg-或ip五氟尿嘧啶(5-FU) 20 mg·kg-1治疗,观察移植瘤瘤重及药物对肿瘤生长的抑制率;透射电镜观察肿瘤组织细胞凋亡情况.结果:芹菜素600,300 mg·kg-1和5 -FU均能明显抑制裸鼠移植瘤生长,抑瘤率分别为31.78％ (P ＜0.01),25.66％ (P ＜0.05)和49.03％ (P ＜0.01),且芹菜素可致裸鼠移植瘤大量细胞发生凋亡,可见典型的细胞凋亡形态学变化.结论:白背叶提取物芹菜素可能通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用.     

HPLC法同时测定了哥王中芹菜素和山奈酚的含量

目的建立同时测定了哥王中芹菜素和山奈酚含量的方法。方法采用HPLC法。色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-体积分数为0.4%磷酸-四氢呋喃(体积比40∶50∶10),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为365 nm,柱温为35℃。结果芹菜素和山奈酚质量浓度分别在3.00~60.0 mg.L-1、0.347~6.94 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为100.2%(RSD=0.95%)和99.4%(RSD=1.0%)。结论该方法准确,重复性好,适用于了哥王药材的质量控制。     

南苜蓿的化学成分研究

 目的 研究南苜蓿的化学成分。方法 采用不同柱色谱技术反复进行分离和纯化,通过理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构。结果 从南苜蓿地上部分分离并鉴定出14个化合物,分别为芹菜素(1)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(2)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(3)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(4)、木犀草素(5)、异芒柄花素(6)、异甘草素(7)、刺囊酸-3-O-[O-α-L-鼠李糖-(1→2)-α-L-阿拉伯糖苷](8)、香豆雌酚(9)、腺嘌呤(10)、黄嘌呤(11)、正三十九烷醇(12)、胡萝卜苷(13)、β-谷甾醇(14)。结论 以上化合物均为在该植物中首次分得,其中化合物3、4、6、8、10、11、12为首次从该属植物中分得。
     

金雀异黄酮与芹菜素的雌激素样作用体外研究

目的:用雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达阳性细胞株人乳腺癌细胞MCF-7,检测金雀异黄酮(genistein)与芹菜素(apigenin)的雌激素样活性大小。方法:用MTT法研究金雀异黄酮与芹菜素对体外培养MCF-7细胞增殖的影响;Real-time RT-PCR法检测其对ERα,ERβ,PR,PS2 mRNA表达水平的影响。结果:金雀异黄酮与芹菜素促进MCF-7增殖;金雀异黄酮的1×10-10mol.L-1组显著增加ERαmRNA的表达水平,是对照组的17.76倍,是阳性对照E2组的1.75倍。芹菜素显著促进了PR mRNA表达水平,是对照组4.57倍,并达到E2组1.11倍。两者在不同浓度对ERα,ERβ,PR,PS2 mRNA中的一个或几个均有不同的促进作用。结论:金雀异黄酮与芹菜素均有明显的雌激素样作用,虽对于不同的雌激素应答基因(ERα,ERβ,PR,PS2 mRNA)表现出不同的促进表达作用,但金雀异黄酮更加强烈。提示植物雌激素发挥雌激素样作用的信号途径与雌激素信号途径并不完全相同;黄酮类药物的B环位置是雌激素样活性的关键位点之一,异黄酮(B环处于3位时)的雌激素样活性大于黄酮(B环处于2号位)。     

芹菜素选择性抑制人胃癌细胞活力和诱导细胞凋亡

目的:对比研究芹菜素对人胃癌BGC-823细胞和永生化人胃粘膜上皮GES-1细胞活力和细胞凋亡的影响。方法:体外培养BGC-823和GES-1细胞。MTS比色法测定细胞活力。PI染色FCM分析细胞凋亡率。ELISA法检测细胞Caspase-3活性。结果:芹菜素对BGC-823细胞活力有显著抑制作用(P<0.05),呈浓度依赖性,其IC50是22μmol/L;然而,对GES-1细胞活力抑制作用弱,其IC50达到77μmol/L;选择指数是3.5(77/22)。芹菜素选择性诱导BGC-823细胞Sub G1百分率增高(P<0.05),同时,活化BGC-823细胞Caspase-3(P<0.05)。结论:芹菜素具有选择性抑制人胃癌BGC-823细胞活力和诱导细胞凋亡作用。     

芹菜素固体脂质纳米粒的制备

目的为芹菜素新型制剂的研究和开发提供实验基础。方法采用热熔超声法制备芹菜素固体脂质纳米粒;以包封率为指标,通过正交试验对处方进行优化。结果制备的纳米粒为类球形,包封率为63.11%,平均粒径为(135±18)nm,zeta电位为-18.90 mV,36 h体外累积释放95.74%。结论热熔超声法可用于制备芹菜素固体脂质纳米粒。