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目的 探讨Linc00460通过海绵吸附miR-320a对乳腺癌(BC)细胞有氧糖酵解作用的影响。方法 qRT-PCR法检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A及5种BC细胞系中Linc00460和miR-320a表达水平。qRT-PCR检测干扰Linc00460对miR-320a表达的影响,双荧光素酶报告基因实验检测miR-320a和Linc00460的靶向关系。将si-Linc00460和miR-320a inhibitor共转染至MDA-MB-231细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-320a表达水平;MTT法检测细胞增殖能力;2-NBDG法检测细胞葡萄糖摄取率;比色法检测细胞上清液中乳酸含量;酶活性试剂盒检测糖酵解关键酶的活性;Western blot检测酵解途径中关键蛋白表达水平。结果 与MCF-10A细胞比较,5种BC细胞系中Linc00460高表达,而miR-320a低表达。干扰Linc00460后,MDA-MB-231细胞中miR-320a表达显著升高。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-320a和Linc00460可靶向结合。干扰Linc00460表达后MDA-MB-231细胞增殖能力受到明显抑制(P=0.000),细胞葡萄糖摄取率和细胞上清液中乳酸含量降低(均P=0.000),PFK、PK和LDH酶活性受到抑制(均P=0.000),PFKM、GLUT1和LDHA蛋白表达水平下调(均P=0.000)。抑制miR-320a可明显逆转si-Linc00460对MDA-MB-231细胞增殖和糖酵解的抑制作用(均P=0.000或0.001)。结论 Linc00460可能通过海绵吸附miR-320a,上调PFKM表达,从而促进BC细胞有氧糖酵解作用。 相似文献
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目的:检测潜在长链非编码RNA Linc00961在恶性黑素瘤组织及细胞中的表达,及其对恶性黑素瘤A375细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:采用聚合酶链式反应方法检测恶性黑素瘤组织及细胞中Linc00961的表达水平;分析Linc00961在不同TNM分期恶性黑素瘤组织中的表达;构建Linc00961过表达慢病毒质粒上调A375细胞中Linc00961表达,细胞划痕实验检测Linc00961对A375细胞迁移距离的影响,Transwell实验检测Linc00961对A375细胞迁移侵袭的影响。结果:Linc00961在恶性黑素瘤组织及A375细胞中的表达低于良性痣及正常黑素HEMa-LP细胞。TNM IV期恶性黑素瘤组织中的Linc00961表达水平显著低于TNM I、II、III期。过表达A375细胞中Linc00961后,细胞迁移距离降低,细胞迁移及侵袭数目减少(P<0.05)。结论:Linc00961在恶性黑素瘤组织及细胞中低表达,并可抑制恶性黑素瘤细胞迁移及侵袭。 相似文献
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目的 分析Linc00152在泛癌不同组织中表达差异及其表达情况与肿瘤的恶性程度及患者预后的关系,并探究Linc00152在不同类型癌细胞中相关功能。方法 选取33例乳腺标本进行RNA-Seq,用qPCR方法检测50对乳腺癌组织和正常组织Linc00152的表达,结合GEO和TCGA数据库,分析Linc00152表达与乳腺癌恶性程度及患者预后的相关性;分析Linc00152在不同类型癌症、不同分期和分级中的表达情况。采用MDA-MB-231乳腺癌细胞系、SGC-7901胃癌细胞系、786-O肾癌细胞系进行细胞增殖能力、细胞凋亡和细胞迁移侵袭能力检测。结果 Linc00152在乳腺癌组织高表达(P<0.001),在HER2阳性和三阴性乳腺癌中Linc00152表达更高(P<0.0001);Linc00152高表达的乳腺癌患者无事件生存期和无转移生存期较差(P<0.001;P<0.01);敲降Linc00152后细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,细胞凋亡增加(P<0.05)。结论 Linc00152在恶性肿瘤中具有促癌作用,可能是潜在的治疗靶点。 相似文献